Skaitīšanas metode kamerā. Caurules metodes iegūšana un atšķaidīšana. Caurulē (vēlams Vidalevskaya) ievada 0,4 ml šķīdinātāja šķidruma un 0,02 ml kapilāro asiņu. Iegūto atšķaidījumu praktiski uzskata par 1:20. Par šķīdinātāju parasti izmanto 3-5% etilskābes šķīdumu, kas tonēts ar metilēnzilu (etiķskābes lizē eritrocītus, metilēnzilā iekrāso leikocītu kodolu). Pirms kameras uzpildīšanas rūpīgi sakrata Goryaeva caurule ar atšķaidītu asiņu. Kameru piepilda tāpat kā sarkano asins šūnu skaitīšanai.
Leukocīti ir daudz mazāki par eritrocītiem (1–2 uz lielu kvadrātu), tāpēc, lai iegūtu precizitāti, skaitļi tiek veikti 100 lielos laukumos (nešķiroti). Aprēķins: 100 lielie laukumi (1600 mazi) tiek uzskaitīti kā leikocīts.
Atceroties, ka neliela kvadrāta tilpums ir 1/4000 mm3, un asinis atšķaida 20 reizes, aprēķina leikocītu skaitu 1 μl asinīs: 4000 20 un dala ar 1600 = a x 1/2. Praktiski, lai iegūtu faktisko leikocītu saturu 1 μl asinīs, ir pietiekami sadalīt uz pusi no aprēķinā iegūtā skaita un pievienot 2 nulles. Vidējā metode ir ± 7%.
Precīzāka (2-3% kļūda) un perfekts ir leikocītu skaits, izmantojot elektroniskās ierīces. Leukocītu skaitīšana daļiņu skaitītājos tiek veikta saskaņā ar to pašu principu kā eritrocītiem. Pirms asinis atšķaida un sajauc ar jebkuru reaģentu, kas lizē sarkano asins šūnu. „Technicon” autoanalizatorā kā „Culter” un „Celloskop” ierīcēs tiek izmantots etiķskābes šķīdums - saponīns vai sapoglobīns, ko pievieno atšķaidītam (1: 500, 1: 700) izotoniskā nātrija hlorīda šķīdumā (6 pilieni uz 20 ml). audzēšana).
Asins leikocītu skaitīšana tiek veikta ar krāsotām perifērajām asinīm.
Labāk ir rēķināties ar plānāko punktu, kas atrodas netālu no uztriepes, vismaz 200 šūnām (izņemot izteiktu leikopēniju), un tad iegūst noteiktu veidu balto asinsķermenīšu procentuālo attiecību. Skaitīšana ir ieteicama tādā pašā kārtībā: puse no šūnām jāuzskaita augšpusē, puse no insulta apakšas, nenonākot pie pašas malas un vidus, zigzagging (3-4 redzes lauki gar gājienu, 3-4 lauki taisnā leņķī pret insultu, tad 3-4 lauki uz sāniem, kas ir paralēli malai, atkal taisnā leņķī uz augšu un tā tālāk uz vienu pusi).
Krāsu sagatavošana. Rūpīgi nomazgāts un attaukots stikls (tā mala) injekcijas vietā skar asins pilienu. Smear padara slīpēšanas stiklu, liekot to 45 ° leņķī pret slaidu priekšā kritiena priekšā. Pēc tam, kad stikls ir nokritis uz šo pilienu, viņi gaida, līdz asinis izplūst gar tās malu, tad ar ātru kustību viņi veic slīpēšanas stiklu uz priekšu, neņemot to prom no objekta, pirms tas izžūst visu pilienu.
Pareizi izgatavotai uztriepei ir dzeltenīga krāsa (plānas), nesasniedz stikla malas un beidzas ar pēdām (ūsas).
Sauso smērvielu krāsošana, kas ražota pēc iepriekšējas fiksācijas. Vislabākā fiksācija tiek panākta absolūtā metilēnalkoholā (3-5 minūtes) vai Nikiforov maisījumā ar vienādām absolūtā etanola un ētera daļām (30 minūtes).
Galvenās hematoloģiskās krāsas ir metilēnzils un tā atvasinājums - debeszils I (metilēna debeszils) un debeszils II (vienādu daļu debeszils I un metilēnzils), skābā ūdenī šķīstošā dzeltenā eozīna.
● Romanovska-Giemsa glezna. Romanovska-Giemsa krāsai (rūpnieciski izgatavota) ir šāds sastāvs: Azur II - 3 g, ūdenī šķīstošs dzeltens eozīns - 0,8 g, metilspirts - 250 ml un glicerīns - 250 ml. Darba krāsu šķīdumu sagatavo ar ātrumu 1,5-2 pilienus gatavās krāsas uz 1 ml destilēta ūdens. Krāsu pārlej uz uztriepes ar iespējami augstāku slāni; krāsošanas laiks - 30-35 minūtes Pēc šī perioda tamponus mazgā ar ūdeni un žāvē gaisā. Šajā metodē ir iespējams labi atšķirt kodolu, bet citoplazmas neitrofilā granulācija ir daudz sliktāka, tāpēc to plaši izmanto perifēro asins uztveršanas krāsošanai.
● Kombinēta maija-Grunvaldes-Romanovska-Giemsa krāsošana pēc Pappenheima. Gatava krāsviela, maija-Grunvaldes fiksators, kas ir eozīnmetilēna zilā šķīdums metilēnalkoholā, 3 minūtes tiek pipetēts uz fiksētas uztriepes. Pēc 3 minūtēm krāsai, kas pārklāj šķīdumu, pievieno vienādu daudzumu destilēta ūdens un krāsošana turpinās vēl vienu minūti. Pēc tam krāsa tiek nomazgāta un uztriepes tiek žāvētas gaisā. Tad žāvēto uztriepi pārkrāso ar svaigi pagatavotu Romanovsky krāsas šķīdumu 8-15 minūtes. Šī metode tiek uzskatīta par labāko, jo īpaši attiecībā uz smadzeņu kauliņu uztriepēm.
Leukocītu skaita pieaugumu perifēriskajā asinīs virs normālā līmeņa sauc par leikocitozi, samazinājumu sauc par leikopēniju. Leukocitozi (leikopēniju) reti raksturo visu veidu leikocītu skaita proporcionāls palielinājums (samazinājums), piemēram, leikocitoze ar asins sabiezēšanu. Vairumā gadījumu palielinās jebkura šūnu tipa skaits (samazinājums). Atsevišķu leikocītu veidu palielināšanās vai samazināšanās asinīs var būt relatīva vai absolūta, atkarībā no kopējā leikocītu skaita - normāla, paaugstināta vai pazemināta. Leukocītu skaita izmaiņas, individuālo formu un morfoloģijas attiecība ir atkarīga no patogēna veida un virulences, patoloģiskā procesa rakstura, kursa un apjoma, organisma individuālās reakcijas.
Aprēķinot leikocītu un trombocītu skaitu
Faktori, kas ietekmē balto asinsķermenīšu pētījuma pareizību
- ilgstoša asins uzglabāšana istabas temperatūrā
Leukocītu satura normas asinīs
Vecums leikocītu skaits
- 1 diena 11.6 - 22.0
- 1 nedēļa 8.1.- 14.3
- 1 mēnesis 7.6 - 12.4
- Pieaugušie 4,0 - 9,0
Metodes leikocītu skaita noteikšanai asinīs.
- Leukocītu skaita skaitīšana skaitīšanas kamerā
- Leukocītu skaitīšana hematoloģijas analizatoros
Leukocītu skaita noteikšana skaitīšanas kamerā.
- Leukocītu skaita noteikšana mikroskopā tiek veikta pēc sarkano asins šūnu lizēšanas 100 lielos skaitīšanas režģa laukumos un pārrēķinot 1 litram asins, pamatojoties uz kvadrātu tilpumu un asins atšķaidījumu. Leukocītu skaits jāveic 2 - 4 stundu laikā pēc asins savākšanas.
- Ja perifēro asiņu asinsķermenīši ir kodēti, tie netiek lizēti un skaitīti kopā ar leikocītiem. Šajā gadījumā, lai noteiktu patieso leikocītu skaitu, šūnu skaits sarkanajā rindā tiek atņemts no kopējā skaitīto šūnu skaita.
- Piemēram: kopējais leikocītu skaits aprēķinā kamerā (vai analizatorā) -45x109 / l. Aprēķinot leikocītu formulu, tika konstatēts, ka uz 100 leikocītiem ir 50 eritroblastu (normoblastu).
Mēs aprēķinām patieso leikocītu skaitu asinīs:
150 šūnas - 45 x 109 / l
100 šūnas (leikocīti) - X
X = 100 * 45 * 10 / l / 150 = 30 * 10 / l
Tādējādi patiesais leikocītu skaits asinīs ir 30 x 109 / l.
Galvenie kļūdu avoti leikocītu aprēķināšanā kamerā:
- Nepareiza asins un etiķskābes tilpuma attiecība, kas ņemta mēģenē.
- Nepareizi sagatavots etiķskābes šķīdums (koncentrācijā, kas pārsniedz 5%, var izdalīties daži leikocīti, kas novedīs pie rezultāta nenovērtēšanas).
- Parauga ilgstoša iedarbība temperatūrā virs 28 ° C, kas var paātrināt leikocītu izdalīšanos paraugā un novest pie rezultāta nenovērtēšanas.
- Nepareiza Goryaev kameras aizpildīšana. Tāpat kā ar sarkano asins šūnu aprēķināšanu, kamerai jāpaliek 1 minūti, lai noregulētu šūnas.
- Pēc iepriekšējās definīcijas Goryaev kamera netika pietiekami labi nomazgāta. Kamerā palikušie leikocīti var pārvērtēt analīzes rezultātus.
Trombocītu skaitīšanas metodes
- skaitīšanas kamerā
Katrai metožu grupai ir priekšrocības un trūkumi.
- Trombocītu skaitīšana kamerā ir pietiekami precīza, nav nepieciešams aprēķināt sarkano asins šūnu skaitu. No otras puses, šī metode ir darbietilpīgāka, jo trombocīti dabiskā formā tiek attēloti ar maziem un slikti kontrastētiem elementiem. Metodes trūkums ir trombocītu skaitīšana tuvākajās stundās pēc asins ņemšanas.
- Trombocītu skaita noteikšana asinīs ir ievērojami zemāka par kameras metodi vai automātiskajiem skaitītājiem. Kļūdas asins uztveršanas skaitīšanā var būt sliktas uztriepes kvalitātes un ar to saistītās nevienmērīgās trombocītu izkliedes dēļ, neprecīza sarkano asins šūnu skaita noteikšana. Būtisks šīs metodes trūkums ir nepieciešamība vienlaicīgi skaitīt trombocītu un sarkano asins šūnu daudzumu asinīs. Tā priekšrocība ir spēja jebkurā laikā pētīt trombocītus neatkarīgi no asins savākšanas laika.
- Trombocītu noteikšanas metode, izmantojot hematoloģisko analizatoru, ļauj precīzi noteikt trombocītu skaitu, to vidējo tilpumu un sadalījumu pēc tilpuma.
Leukocītu skaitīšanas metode Goryaev kamerā
Balto asinsķermenīšu - balto asins šūnu - loma ķermeņa antimikrobiālajā aizsardzībā ir būtiska. Granulocīti phagocytize mikrobus un tos iznīcina, izmantojot fermentus, kas atrodas granulās, limfocīti ražo antivielas un nodrošina imūnās atbildes reakciju uz ķermeni.
Cauruļu metodes noteikšanas metode: ielej testa mēģenē 0,4 ml Türk šķīduma (Türk šķidrums satur etiķskābi, lai iznīcinātu sarkano asins šūnu un metilēnzilu, lai krāsotu leikocītu kodolu). Izmantojiet kapilāru pipeti, lai novilktu 0,02 ml asiņu no svaiga piliena, viegli uzsitiet to mēģenē ar reaģentu un izskalojiet pipeti. Labi samaisa. Tajā pašā laikā asins atšķaidīšana ir 20 reizes. Apaļā stikla stieņa galā tiek savākta atšķaidītas asins piliens un uzklāta pulēta stikla kameras malā.
Skaitīšana tiek veikta 100 lielos, nepārtrauktos laukumos, ko veido četri. Izmantots neliels pieaugums.
Skaitīšanas formulas Nr. 1 atvasināšana.
1. 100 kvadrātu satur 1600 mazus kvadrātu (16x100)
2. Asins tilpums virs mazā kvadrāta 1/4000 mm3
3. Asins atšķaidīšana 20 reizes
Leukocītu skaits 1 μl asinīs = pie -4000-20. = Ax 50
Piemēram: 130 lielie laukumi Goryaev režģī tika uzskaitīti 130 leikocīti. 1 μl asinīs leikocītu skaits būs 130 x 50 = 6500 vai 6,5-10 3.
Lai noteiktu leikocītu saturu 1 litrā asinīs, leikocītu skaits, izteikts tūkstošos, jāreizina ar 10 9.
Mūsu piemērā leikocītu skaits 1 litrā asinīs ir 6,5-10 9.
194.48.155.245 © studopedia.ru nav publicēto materiālu autors. Bet nodrošina iespēju brīvi izmantot. Vai ir pārkāpts autortiesību pārkāpums? Rakstiet mums Atsauksmes.
Atspējot adBlock!
un atsvaidziniet lapu (F5)
ļoti nepieciešams
Leukocīti (leucocytus)
Leukocīti. Leukocītu kvantitatīvā noteikšana. Leukocītu skaitīšana, izmantojot kameru Goryaeva. Leukocītu kvantitatīvais saturs. Leukocitoze.
Baltās asins šūnas
Leukocītu skaits asinīs ir atkarīgs gan no to veidošanās ātruma, gan no to mobilizācijas no kaulu smadzenēm, kā arī no to izmantošanas un migrācijas audos (uz bojājumiem), plaušu un liesas sagūstīšanu. Šos procesus savukārt ietekmē vairāki fizioloģiski faktori, un tāpēc leikocītu skaits veselā cilvēka asinīs ir pakļauts svārstībām: tas palielinās dienas beigās, fiziskās slodzes, emocionālā stresa, proteīnu pārtikas patēriņa un straujas apkārtējās temperatūras izmaiņas.
Leukocītu kvantitatīvā noteikšana
Leukocīti tiek skaitīti, izmantojot Goryaev kameru un izmantojot automātiskos skaitītājus.
Leukocītu skaitīšana, izmantojot kameru Goryaeva
Ar in vitro metodi, lai ņemtu leikocītu skaitu asinīs:
- Caurulē ielej 0,4 ml 3-5% etiķskābes šķīduma, kas tonēts ar metilēnzilu. Izmantojiet kapilāru pipeti, lai 20 μl asinis izvilktu no jauna piliena (atšķaidīšana 20 reizes), uzmanīgi uzsitiet to mēģenē ar reaģentu un izskalojiet pipeti. Labi samaisa;
- tīrā un sausā pārseguma stikls tiek berzēts uz kameru tā, lai kontakta vietā veidotos varavīksnes gredzeni;
- asinis, kas atšķaidītas mēģenē, labi samaisa. Apaļa stikla stieņa gals aizņem asins pilienu un nogādā to kameras pulēta stikla malā;
- pēc kameras piepildīšanas tas atstāj uz 1 min ilgu laiku leikocītu nogulsnēšanai;
- Leukocīti tiek uzskatīti par zemu palielinājumu (objektīvs × 8 vai × 9, okulārs × 10 vai × 15) ar tumšāku redzamības lauku (ar pazeminātu kondensatoru vai sašaurinātu diafragmu);
- apmierinošiem rezultātiem, leikocīti tiek skaitīti 100 lielos laukumos.
Zinot lielā laukuma tilpumu un asins atšķaidīšanas pakāpi, atrodiet leikocītu skaitu 1 μl un 1 l asinīs. Lielā laukuma puse ir 1/5 mm, platība ir 1/25 mm2, telpas laukums virs šī laukuma ir 1/250 mm3.
Baltās asins šūnas skaitīšanas formula:
kur B ir leikocītu skaits 100 lielos laukumos;
P - atšķaidīšanas pakāpe (20).
Leukocītu skaits
Norm: 4,0–9,0 × 10 9 / L
Tiek aicināts palielināt leikocītu skaitu virs 9,0 × 10 9 / l
leikocitoze, to skaita samazināšanās zem 4,0 × 10 9 / l - leikopēnija. Tomēr pat 3,5 × 10 9 1 l leikocītu vairākiem indivīdiem var būt norma. Saskaņā ar literatūru šādi cilvēki ir palielinājuši imūnsistēmu, un visticamāk, tie saslimst, kas, šķiet, ir saistīts ar nepieciešamību pēc imūnās atbildes uz leikocītu rezervi audos, kur ir 50–60 reizes vairāk nekā asinsritē. Protams, veseliem indivīdiem ar zemu balto asins šūnu skaitu perifēriskajā asinīs attiecīgi palielinās to rezerves audos. Šī parādība izskaidrojama ar iedzimtu un ģimenisku raksturu vai parazīmisko nervu sistēmas ietekmes palielināšanos.
Leukopēnija var būt funkcionāla un organiska.
Funkcionālā leikopēnija ir saistīta ar asins veidošanās traucējumiem un tiek novērota:
- ar dažām baktēriju un vīrusu infekcijām (vēdertīfu, gripu, bakas, masaliņām, Botkin slimību, masalām);
- narkotiku iedarbībā (sulfonamīdi, pretsāpju līdzekļi, pretkrampju līdzekļi, pretaizdzīšanas līdzekļi, citostatiskie un citi medikamenti);
- muskuļu darba laikā, svešu olbaltumvielu ieviešana, nervu un temperatūras ietekme, bads, hipotoniskie stāvokļi;
- viltus leikocitopēnija var būt saistīta ar leikocītu agregāciju ilgstošas asins uzglabāšanas laikā istabas temperatūrā (vairāk nekā 4 stundas).
Organiskā leikopēnija, ko izraisa kaulu smadzeņu aplazija un tās aizstāšana ar taukaudiem, rodas, ja:
- aplastiska anēmija;
- agranulocitoze;
- leikopēniskā leikēmija;
- dažas Hodžkina slimības formas;
- jonizējošais starojums;
- hipersplenisms (primārā un sekundārā);
- kolagēna slimības.
Leukocitoze
Leukocitoze ir asinsrades sistēmas reakcija uz iedarbību
eksogēni un endogēni faktori. Ir fizioloģiska un patoloģiska leikocitoze.
Fizioloģiskā leikocitoze ir:
- gremošanas līdzekļi - pēc ēšanas, īpaši proteīnu daudzums; leikocītu skaits nepārsniedz 10,0–12,0 × 10 9 / l un pēc 3-4 stundām tas normalizējas;
- ar emocionālu stresu (adrenalīnu), smagu fizisku slodzi, dzesēšanu, pārmērīgu saules iedarbību (saules apdegumu), vairāku hormonu (katecholamīnu, glikokortikosteroīdu uc) ievadīšanu grūtniecības otrajā pusē, menstruāciju laikā un nevienmērīga leikocītu sadalījuma dēļ asinīs mainstream.
Patoloģiskā leikocitoze ir sadalīta absolūtā un relatīvā.
Absolūtā leikocitoze - leikocītu skaita palielināšanās asinīs līdz vairākiem simtiem tūkstošu (100,0–600,0 × 10 9 / l un vairāk).
- Visbiežāk novērota leikēmija: hroniskā leikēmijā - 98-100% gadījumu akūtā leikēmijā - 50-60%. Leukocītu šūnu attiecības maiņa kaulu smadzenēs un asins punktos kalpo par pamatu leikēmijas diagnostikai.
Ir novērota relatīva leikocitoze:
- akūti iekaisuma un infekcijas procesi, izņemot vēdertīfu, gripu, bakas, masaliņas, Botkin slimību, masalus. Lielākā leikocitoze (līdz 70,0–80,0 × 10 9 / l) novērota sepsi;
- toksisku vielu (kukaiņu indes, endotoksīni), jonizējošā starojuma (tūlīt pēc apstarošanas) ietekmē;
- kortikosteroīdu, adrenalīna, histamīna, acetilholīna un digitālo preparātu iedarbības rezultātā;
- ar audu dezintegrāciju (nekrozi), miokarda infarktu, perifēro artēriju trombozi, attīstot gangrēnu, apdegumus, eksudatīvu pleirītu, perikardītu, urēmiju, aknu komu;
- ievērojams asins zudums traumās, iekšējā, ginekoloģiskā un cita veida asiņošana.
Leikocītu skaita pieaugums infekcijas slimībās vairumā gadījumu ir saistīts ar leikocītu formulas maiņu pa kreisi
Leukocītu skaits
Leukocītu skaitu aprēķina, izmantojot automātisko skaitītāju vai Goryaev kamerā. Lai aprēķinātu leikocītus kamerā, tiek pagatavots Turk šķidrums - etiķskābes šķīdums, kas tonēts ar metilēnzilā ūdens šķīdumu (9 ml 10% etiķskābes pievieno 0,1 ml 0,1% metilēnzilā šķīduma). Testa mēģenē ielej 0,4 ml šķidruma Türk. Iegūstiet tieši 0,02 ml asiņu, uzmanīgi pievienojiet atšķaidīšanas šķidrumam. Asins atšķaidīšana ir 1:20. Labi samaisa un atstāj uz 4 minūtēm. Piepildiet kameru Goryaeva, rūpīgi sakratot mēģeni ar atšķaidītu asiņu. Kamera tiek atstāta uz 1 min. Uz plakanas virsmas leikocītu nogulsnēšanai. Tad leukocīti tiek skaitīti zemā mikroskopa palielinājumā (objektīvs 8, okulārs 10 vai 15) ar tumšāku redzamības lauku (ar kondensatoru nolaižot vai sašaurinātu diafragmu). Leukocīti tiek uzskatīti par 100 neizpaustiem lieliem laukumiem, kas atbilst 1600 maziem. Šūnu skaitīšanas rezultāti lielos kvadrātos apkopo un aprēķina to skaitu 1 μl asinīs, izmantojot formulu:
kur X ir leikocītu skaits 1 μl asinīs; A - šūnu skaits, kas skaitīti 100 lielos laukumos, 1600 - mazo kvadrātu skaits; 20 - asins atšķaidīšana; 4000 ir reizinātājs, kas rada 1 μl asins tilpumu, pamatojoties uz neliela kvadrāta tilpumu (1/4000 μl).
Leukocītu formulas skaitīšana: tiek pētītas krāsotas perifērās asinis. Nepieciešams nosacījums, lai pareizi ņemtu vērā asins šūnu morfoloģiskās īpašības, ir pareizi veidota un labi iekrāsota asins uztriepes. Uz sausiem, tīriem, labi attaukotiem slaidiem sagatavo asins uztriepes, kas izturētas Nikiforov maisījumā (etilspirts 96 ° un dietilēteris 1: 1). Ņemot stikla slaidu garām malām, pieskarieties tās virsmai ar asins pilienu (bet ne ādu), kas atbrīvojas no punkcijas, vai uzliekiet pilienu asins ar mikropipeti vai kapilāru. Stikla slaidu tur uz galda vai kreisajā rokā šaurām malām. Izmantojot labo roku, uzklājiet stikla šķīvi ar šauru malu ar asinīm pa kreisi no kritiena 45 ° leņķī un virziet to pa labi, līdz tas pieskaras asinīm. Viņi gaida, līdz asinis izplatīsies visā grīdas stikla malā, un pēc tam ar ātru, ātru kustību ved to no labās uz kreiso pusi, līdz viss piliens ir izsmelts. Asins pilienam jābūt mazam un proporcionālam tā, lai viss uztriepes tiktu novietots uz stikla, nesasniedzot 1-1,5 cm pirms tās malas. Labi veidots uztriepes ir plānas, dzeltenā krāsā un beidzas ar "slotu". Gaisa žāvētas asins uztriepes tiek ievietotas speciālos traukos fiksēšanai vai parastos stikla glāzēs, kas piepildītas ar fiksējošo šķidrumu (metilspirts, fiksācijas laiks 3-5 minūtes; etilspirts, 30 minūtes; Nikiforova maisījums, 20-30 minūtes). Fiksētie preparāti tiek žāvēti gaisā un pēc tam iekrāsoti ar Romanovsky-Giemsa krāsu. Gatavo krāsu šķīdums Romanovsky-Giemsa (azureozīns) atšķaidīja 1:10 vajadzīgajā krāsā. Fiksētās uztriepes ielej ar atšķaidītu krāsu, kas uzlej uz uztriepes ar iespējami augstāku slāni. Krāsošana ilgst atkarībā no gaisa temperatūras telpā no 25 līdz 45 minūtēm. Pēc krāsas nokrāsošanas, nomazgājiet krāsu ar destilētu ūdeni un ieliekiet vertikāli insultus koka kājā žāvēšanai. Asins uztveršanas mikroskopiju veic, iegremdējot 100 × 10 palielinājumu. Leukocītu skaitīšana notiek pa zigzaga līniju (“Meander line”), skaitot 100-200 šūnas, ņemot vērā atsevišķu leikocītu formu skaitu: stab un segmentētos neitrofilus, eozinofīlus, basofilus, monocītos, limfocītus. Aprēķiniet katra šūnas veida procentuālo daļu.
Fagocītu un limfocītu absolūtā skaita aprēķināšana Fagocītu (neitrofilu un monocītu) un augstāko mugurkaulnieku limfocītu absolūto skaitu aprēķina, pamatojoties uz datiem par leikocītu skaitu perifērās asinīs un leikocītu formā.
Fagocītu funkcijas tests
Fagocītiskā indeksa un fagocītu skaita noteikšana
Ir izstrādāts liels skaits metožu, lai novērtētu leikocītu uzsūkšanos un sagremošanu. Visi no tiem ir balstīti uz fagocītu spēju absorbēt svešķermeņus, kas veido testa sistēmu (specifisks mikroorganisma veids, zimozāns, latekss - absorbcijas objekts). Atklāšana tiek veikta in vitro vai in vivo. Vispārējais noteikšanas kurss ir šāds: Heparinizētu vai citrātu svaigu asiņu (vai fagocītu suspensiju) sajauc ar vienādu tilpumu suspendēta ikdienas mikrobu suspensija (Saccharomyces cerevisiae, Staphilococcus aureus, S. albus, E.coli, A. nydrophila) vai cits absorbcijas objekts. Maisījumu viegli sajauc un ievieto termostatā (37-40ºС - siltās asinīs atkarībā no ķermeņa normālās temperatūras, 26 ° C - karstumizturīgām zivīm un zemākai aukstumainai). Pēc 15, 30, 45, 60 un 90 minūtēm smērvielas sagatavo uz priekšmetstikliņiem, žāvē, piestiprina ar metilspirtu vai Nikiforova maisījumu un iekrāso pēc Romanovska-Giemsa. Viņi raugās uz iegremdētajām uztriepēm un nosaka fagocītu aktivitāti - fagocītu, kas piedalās fagocitozē, procentuālo daļu, fagocītu indeksu - viena fagocītu leukocīta uztverto testa mikrobu skaitu, fagocītu skaitu - vidējo fagocītu objektu skaitu uz 1 aktīvo neitrofilu. Rādītāju novērtēšana dažādos laika intervālos ļauj novērtēt fagocitozes dinamiku. Parasti pēc 90 minūtēm fagocītu indeksam vajadzētu būt zemākam nekā pēc 45 minūtēm un 60 minūtēm, pateicoties mikrobiem. Gremošanas pārkāpuma gadījumā tas nemainās.
Fagocītu funkcionālās aktivitātes novērtējums ar nitro-zilo tetrazola redukcijas reakciju (NBT tests)
Šis tests ir fagocītu baktericīdās funkcijas indikators un ļauj novērtēt to spēju uz skābekļa atkarību. Kad šis nogalināšanas mehānisms ir aktivizēts, tiek aktivizēts NADPH oksidāzes enzīms, kas izraisa reaktīvo skābekļa sugu parādīšanos fagocītos. Šādu vielu izdalīšanos šūnā sauc par skābekļa (elpošanas) sprādzienu, ko var reģistrēt, izmantojot NBT testu. Šā testa formulējumā fagocītiem pievieno nitrozīna tetrazolija vielu, tā absorbējas šūnā un reaktīvo skābekļa sugu klātbūtnē pārvēršas tumšzilā krāsā diformazāns. Jo vairāk tumšzilās granulas tiek piestiprinātas pie virsmas vai fagocītu iekšpusē, jo veidojas aktīvākas skābekļa formas, jo vairāk skābekļa atkarīgs no skābekļa.
NBT tests ir noteikts divās versijās: spontāni un inducēti. Uzstādot spontānu NBT testu, fagocīti tiek kultivēti NST klātbūtnē bez iepriekšējas šūnu aktivācijas, veicot inducēto NBT testu, barotnei pievieno fagocītu reakcijas aktivitāti. NBT testa iestatīšana divos variantos ļauj aprēķināt šūnu funkcionālo rezervi, kas ir starpība starp inducēto diformazānu pozitīvo šūnu skaitu (intensitāti) un spontānu pozitīvo šūnu skaitu (intensitāti). Inducētā NBT testa vērtības raksturo fagocītu šūnu aktivitāti antigēnu stimulatora klātbūtnē, un tās tiek uzskatītas par kritēriju to gatavībai pilnīgai fagocitozei. Spontānais NBT tests ļauj novērtēt neaktivētu fagocītu skābekļa atkarīgo nogalināšanas mehānismu aktivācijas pakāpi. Tā raksturo intracelulāro mikrobicīdu sistēmu aktivācijas pakāpi.
Lai izveidotu spontānu NBT testu, 0,1 ml asiņu pievieno 0,05 ml 0,2% NBT šķīduma kālija fosfāta buferšķīdumā (0,1, pH 7,3) un 0,05 ml tā paša bufera. Paralēli tiek ņemts paraugs, lai ņemtu vērā inducēto NBT testu, kurā 0,05 ml buferšķīduma vietā tiek pievienots tāds pats tilpums fagocītu aktivatora (piemēram, pirogēns pie koncentrācijas 50 μg / ml). Reakcijas maisījumu termostata ūdens vannā 37 ° C temperatūrā (30–60 min). Sagatavo vidēja blīvuma uztriepes, žāvē gaisā un piestiprina etilspirta vai Nikiforova maisījumā (20 min), pēc tam krāso ar neitrāla sarkana ūdens šķīdumu (0,1%, 1 min.)
Pēc reakcijas asins uztriepes tiek iegremdētas mikroskopā (100 × objektīvs, 10 × okulārs). No 100 šūnām tiek skaitīts aktivēto neitrofilu (DAN,%), kas satur diformazāna granulas, proporcija. Atkarībā no šūnās nogulsnētā difrformazāna daudzuma, to aktivitāte tiek novērtēta patvaļīgās vienībās, un tiek aprēķināts neitrofilo aktivācijas indekss (IAN, izmantotās vienības):
kur ir HNeg. - to šūnu skaits, kurās nav diformazāna granulu;
H1 - to šūnu skaits, kurās diformazāna nogulšņu platība ir mazāka par 1/3 no kodola laukuma;
H2 - to šūnu skaits, kurās diformazāna nogulsnes aizņem no 1/3 līdz visam kodola lielumam;
H3 - to šūnu skaits, kurās diformazāna nogulsnes aizņem lielāku kodola laukumu.
Mobilizācijas koeficienta (KM) atvasināšana saskaņā ar šādu formulu:
Leukocītu noteikšana asinīs
Raksta saturs
- Leukocītu noteikšana asinīs
- Kas ir leikocīti?
- Kāds ir sieviešu asins analīzes ātrums
Leikocītu skaits asinīs
Nav noteikts fiksēts leikocītu skaits, kas būtu uzskatāms par normu visiem cilvēkiem. Šis skaitlis mainās atkarībā no personas vecuma: jo vecāks cilvēks, jo mazāks ir leikocītu skaits asinīs. Parastais leikocītu skaits jaundzimušajam ir 9-30x109 / l. Pieaugušajam šis skaitlis ir trīs reizes mazāks - 4-9x109 / l. Šo daļiņu daudzuma rādītājs asinīs var nedaudz atšķirties no normas atkarībā no ķermeņa funkcionālā stāvokļa un pat dienas laika.
Tātad grūtnieču asinīs ir palielināts leikocītu skaits. Standarts pirmo reizi pēc ēdienreizes palielinās pēc treniņa, pārkaršanas un dzesēšanas. Bet, ja daļiņu skaits palielinās trīs reizes vairāk nekā norma, tad tas ir signāls par slimības attīstību organismā.
Nosacījumu, kurā organismam ir augsts leikocītu saturs, sauc par leikocitozi, un pretējo stāvokli sauc par leikopēniju. Jāatzīmē, ka asins paraugu ņemšanas kvalitāte analīzēm būtiski ietekmē leikocītu skaitu: procedūra vienmēr jāveic tukšā dūšā.
Kā noteikt leikocītu skaitu
Lai noteiktu asins leikocītu līmeni vairākos veidos: ziedojot asinis, uztriepes, urīnu vai spermu.
Ir ļoti svarīgi uzraudzīt balto asins šūnu līmeni urīnā grūtniecības laikā. Augsti rādītāji norāda uz to, ka ķermenī atrodas bērns, iekaisuma procesi, piemēram, pielonefrīts vai cistīts.
Neaizmirstiet, ka analīzes galīgais rezultāts ir atkarīgs no tā pareizas rīcības. Tāpēc ārsti pirms jebkādu spēcīgu zāļu parakstīšanas grūtniecei tiek pārvērtēti.
Turpmāk aprakstīto procedūru izmanto, lai nolasītu leikocītu skaitu asinīs, spermā vai urīnā. Noteikta daļa šķidruma tiek ievietota aparātā - centrifūga. Nogulsnes uzklāj uz stikla un pārbauda ar mikroskopu. Lai aprēķinātu leikocītu skaitu, nogulsnes tiek krāsotas, izmantojot īpašu krāsu. Pēc tam tiek aprēķināts redzamais leikocītu skaits redzes laukā.
Ja analīze parādīja novirzi no parastā balto asins šūnu skaita, ir nepieciešams noskaidrot daļiņu skaita pieauguma iemeslu. Dažas slimības tiek diagnosticētas, pārbaudot balto asins šūnu skaitu.
Leukocīti, to skaits un galvenās grupas. Leukocītu skaita noteikšanas metodes. Leykoformula un tās vērtība.
Leukocīti Norm - (4–9) x109 / l asins. To skaits ir atkarīgs no veidošanās ātruma limfmezglos, liesā un kaulu smadzenēs, mobilizācija no kaulu smadzenēm, izmantošana un migrācija audos, plaušu un liesas uztveršana un fizioloģiskie faktori. Granulocītu (galvenokārt neitrofilo) fagocītu galvenā funkcija ir svešu materiālu uztveršana un sagremošana ar hidrolītisko enzīmu palīdzību. Novērtējot leikocītu skaitu klīnikā, tiek izmantota leikocītu formula - atsevišķu leikocītu formu procentuālais daudzums. Parasti šī vērtība ir nemainīga.
Leukocītu formula
Leukocītu skaita pieaugums līdz vairākiem desmitiem tūkstošu norāda uz leikocitozi, un to novēro akūtas iekaisuma un infekcijas slimības, kam seko leukocītu formulas maiņa pa kreisi. Leukocītu skaita pieaugums līdz vairākiem simtiem tūkstošu norāda uz leikēmiju. Smagās infekcijas slimībās notiek neitrofilo morfoloģijas izmaiņas: tiek novērota degranulācija, vakuolizācija utt. Leikocītu skaita samazinājums zem 4000 norāda leikopēniju, biežāk agranulocitozi. Balto asinsķermenīšu skaita samazināšana var būt saistīta ar dažādu narkotiku lietošanu, palielinātu radioaktīvo fonu, urbanizāciju utt. Neitropēnija izpaužas citostatiku ietekmē, ar lupus, reimatoīdo artrītu, malāriju, salmonellu, brucelozi kā specifisku sindromu - ar AIDS un starojumu.
Neitrofīli leikocīti. Saturs asinīs - 50–75% (2,2–4,2) x109 / l. Diametrs –10–12 mikroni.
Kodols ir kompakts, sastāv no 3-4 segmentiem, kas savienoti ar tiltiem; citoplazma ar bagātīgu smiltīm. Infekcijās un iekaisumos neitrofili pilda makrofāgu - fagocitozi spējīgu šūnu funkciju.
Leukocīti ir eozinofīli. Likme ir 1–5% leikocītu, (0,1–0,3) x109 / l. Šūnas, kas ir lielākas par neitrofiliem, diametrs ir līdz 12 mikroniem. Sirds bieži sastāv no 2–3 segmentiem. Citoplazma ir nedaudz bazofila, satur lielu, spilgtu krāsojumu ar eozīna granulāciju, dodot pozitīvu oksidāzi, peroksidāzi, citohroma oksidāzi, sukcināta dehidrogenāzi, skābo fosfatāzes reakcijas. Viņi spēj fagocitozi, piedalīties olbaltumvielu produktu detoksikācijā un organisma alerģiskajās reakcijās. Eosinofilija ir raksturīga ķiršu infekcijām, tā ir iespējama atveseļošanās posmā infekcijas slimībās.
Leukocīti bazofīli. Saturs asinīs - 0–1% (līdz 0,06 x 109 / l). Diametrs ir no 8 līdz 12 mikroniem. Kodols ir plats, neregulāras formas. Citoplazma satur lielu graudu, kas metakromatiski iekrāsojas violetās melnās krāsās. Piedalieties alerģiskajās reakcijās (tūlītēji un aizkavēti veidi): rodas histamīns un heparīns (heparinocītu grupa).
Monocīti / makrofāgi. Likme ir 2-10% leikocītu, (0,2-0,55) x109 / l. Izmēri no 12 līdz 20 mikroniem. Kodols ir liels, vaļīgs, ar nevienmērīgu hromatīna sadalījumu. Viņi ilgstoši nepārvietojas asinīs, nonāk audos, pārvēršoties makrofāgos, kas spēj kustēties amoeboīdos. Vadošās organisma imūnās atbildes šūnas. Galvenā funkcija ir endocitoze. Tās ir mononukleāro fagocītu sistēmas centrālā saikne. Tiek veiktas vairākas no citokīniem atkarīgas funkcijas: hematopoētiska, imūnstimulējoša, iekaisuma, imūnsupresīva un pretiekaisuma iedarbība.
Makrofāgu sekrēcijas produkti:
Proteazes: plazminogēna aktivators, kolagenāze, elastāze, angiotenzīna konvertāze.
Iekaisuma un imūnmodulācijas starpnieki: interleikīns-1 (IL-1), audzēja nekrozes faktors α, interferons γ, lizocīms, neitrofilu aktivācijas faktors, komplementa komponenti C1, C2, C3, C5, pareizi, B, D, IL-3, IL -6, IL-8, IL-10, IL-12, IL-15.
Augšanas faktori: CSF-GM, CSF-G, CSF-M, fibroblastu augšanas faktors, transformējošs augšanas faktors.
Koagulācijas faktors un fibrinolīzes inhibitori: V, VII, IX, X, plazminogēna inhibitori, plazmīna inhibitori.
Līmvielas: fibronektīns, trombospondīns, proteoglikāni.
Kameras skaitīšanas metode
Caurules metodes iegūšana un atšķaidīšana. Caurulē (vēlams Vidalevskaya) ievada 0,4 ml šķīdinātāja šķidruma un 0,02 ml kapilāro asiņu. Iegūto atšķaidījumu praktiski uzskata par 1:20. Par šķīdinātāju parasti izmanto 3-5% etilskābes šķīdumu, kas tonēts ar metilēnzilu (etiķskābes lizē eritrocītus, metilēnzilā iekrāso leikocītu kodolu). Pirms kameras uzpildīšanas rūpīgi sakrata Goryaeva caurule ar atšķaidītu asiņu. Kameru piepilda tāpat kā sarkano asins šūnu skaitīšanai.
Leukocīti ir daudz mazāki par eritrocītiem (1–2 uz lielu kvadrātu), tāpēc, lai iegūtu precizitāti, skaitļi tiek veikti 100 lielos laukumos (nešķiroti).
Aprēķins: 100 lielie laukumi (1600 mazi) tiek uzskaitīti kā leikocīts. Atceroties, ka neliela kvadrāta tilpums ir 1/4000 mm 3, un asinis atšķaida 20 reizes, aprēķina leikocītu skaitu 1 μl asinīs: 4000 * 20 un dala ar 1600 = a * 1/2. Praktiski, lai iegūtu faktisko leikocītu saturu 1 μl asinīs, ir pietiekami sadalīt uz pusi no aprēķinā iegūtā skaita un pievienot 2 nulles. Vidējā metode ir ± 7%.
Precīzāka (2-3% kļūda) un perfekts ir leikocītu skaits, izmantojot elektroniskās ierīces. Leukocītu skaitīšana daļiņu skaitītājos tiek veikta saskaņā ar to pašu principu kā eritrocītiem. Pirms asinis atšķaida un sajauc ar jebkuru reaģentu, kas lizē sarkano asins šūnu. Analizatorā "Technicon" kā tādu izmanto etiķskābes šķīdumu aparātā "Culter" un "Celloskop" - saponīnu vai sapoglobīnu, ko pievieno atšķaidītam (1: 500, 1: 700) izotoniskā nātrija hlorīda šķīdumā (6 pilieni uz 20 ml). audzēšana).
12. Granulocītu funkcijas. T-un B-limfocītu loma specifisku imunitātes mehānismu radīšanā:
Imūnās sistēmas galvenās šūnas ir T-un B-limfocīti, kas cirkulē asinsritē un limfātiskajā sistēmā, pastāvīgi pārvietojoties no viena imūnsistēmas orgāna uz citiem, spēj veikt audus, lai veiktu aizsargfunkcijas (1. attēls).
Specifiskas imunitātes aizsardzības reakcijās, papildus T un B šūnām, fagocītu šūnas (granulocīti, monocīti, makrofāgi), „dabiskie slepkavas”, mīkstās šūnas, endoteliālās un epitēlija šūnas, kas spēlē palīgšūnu lomu, mijiedarbojas ar T un B šūnām. limfocīti.
Imūnās atbildes reakcija sastāv no sarežģītas šūnu mijiedarbības sērijas, ko aktivizē svešā antigēna materiāla uzņemšana. Pirmkārt, makrofāgs uztver ķermeni, kurā ir antigēni. Tad makrofāgs noņem daļu no antigēna (peptīda) un parāda to uz tās virsmas, it kā to prezentētu imūnās šūnās. Limfocītu aktivizēšana ar antigēnu izraisa limfocītu proliferāciju un transformāciju.
Limfocīti ir vienīgās organisma šūnas, kas spēj specifiski atpazīt savus un svešus antigēnus un reaģēt, aktivizējoties, lai kontaktētos ar konkrētu antigēnu. Ļoti līdzīgā morfoloģijā limfocīti ir sadalīti divās populācijās, kurām ir dažādas funkcijas un kas ražo dažādus proteīnus.
Vienu no populācijām sauc par B-limfocītiem. Cilvēkiem B limfocīti nobrieduši kaulu smadzenēs. B-limfocīti atpazīst antigēnus ar specifiskiem imūnglobulīna receptoriem, kas, kā B-limfocīti nobrieduši, parādās uz to membrānām. B-limfocīti spēj atpazīt un saistīt olbaltumvielu, polisaharīdu un lipoproteīnu šķīstošos antigēnus, un B-limfocītu galvenā funkcija ir antigēna specifiska atpazīšana. Antigēna atpazīšana izraisa B-limfocītu aktivāciju, proliferāciju un transformāciju plazmas šūnās - specifisku antivielu - imūnglobulīnu - ražotājus. Tādējādi veidojas humorāla imūnreakcija. B-limfocīti visbiežāk ir nepieciešami T-limfocītiem, kas aktivizē citokīnu produktus, lai attīstītu humorālo imūnreakciju.
Citu populāciju sauc par T-limfocītiem, jo to prekursori tiek diferencēti sāpenī. T-limfocīti pilda svarīgāko antigēna atpazīšanas un saistīšanās funkciju. T-limfocīti, kas aktivizēti ar antigēniem, vairojas un pārvēršas dažādās apakšgrupās, kas vēl vairāk piedalās visās imūnās atbildes formās. Aktivētais T-limfocīts ražo un izdalās arī citokīni, kas uzlabo T-limfocītu, B-limfocītu un makrofāgu skaita palielināšanas procesu.
Starp nobriedušiem T-limfocītiem ir divas galvenās apakšpopulācijas: T-palīgšūnas (CD4 +) un T-killer šūnas - citotoksiskas T-limfocīti (CD8 +). Etiķete “CD” ir raksturīga “šūnu virsmas fenotipam” - “diferenciācijas klasterim” (no angļu valodas diferenciācijas kopām - CD).
Pastāv arī cita veida limfocīti - lieli granulētie limfocīti, kas atšķiras no mazākām T-šūnām un B-limfocītiem, ne tikai pēc struktūras īpašībām, bet arī no antigēna atpazīšanas receptoru trūkuma. Šīs šūnas sauc par "dabiskiem slepkavas": tās spēj nogalināt mērķa šūnas vai audzēju šūnas, kas inficētas ar dažādiem vīrusiem (sk. 1. tabulu).
1. tabula. Cilvēka limfocītu klasifikācija
T šūnas destruktīvi ietekmē šādus objektus:
1. Ļaundabīgas šūnas.
2. Ar mikroorganismiem inficētas šūnas.
3. Pārstādītie orgāni un audi.
Visa šūna ir iesaistīta uzbrukumā, tāpēc atbildi sauc par šūnu imunitāti.
Tādējādi ir divi galvenie imūnās atbildes veidi:
· Šūnu imunitāte ir T limfocītu funkcija.
· Humorālā imunitāte - piedaloties B-limfocītiem.
Ir vēl viena T-limfocītu apakšgrupa: regulējošās T-limfocīti, T-regulējošās šūnas Treg), T-supresori ir imūnās atbildes centrālie regulatori. To galvenā funkcija ir kontrolēt imūnās reakcijas stiprumu un ilgumu, regulējot T-efektora šūnu (T-palīgšūnu un T-citotoksisko šūnu) funkcijas.
Att. 2. Imūnās atbildes vispārējā shēma
Imūnās atbildes nomākšanas fenomens bija zināms jau ilgu laiku, bet tā mehānismi nebija zināmi. Tāpēc tika ieteikta specifisku T-supresoru šūnu esamība, bet šo šūnu eksistenci ilgi nav apstiprināta eksperimentāli. Tikai 1990. gadu beigās un 2000.gadu sākumā parādījās atsevišķu T šūnu eksistence, ko raksturo CD25 + FOXP3 + fenotips un efektīvi nomāca imūnreakciju.
13. imunitāte, tās nespecifiskie un specifiskie mehānismi: t
Adaptīvajai (novecojušai, iegūtai, specifiskai) imunitātei ir spēja atpazīt un reaģēt uz atsevišķiem antigēniem, to raksturo klonāla atbilde, reakcijā iesaistītas limfoidās šūnas, pastāv imunoloģiska atmiņa, iespējama automātiska agresija.
Klasificēts aktīvajā un pasīvajā.
- Iegūtā aktīvā imunitāte rodas pēc slimības vai pēc vakcīnas ievadīšanas.
- Iegūtā pasīvā imunitāte attīstās, kad gatavas antivielas tiek ievadītas organismā seruma formā vai nodotas jaundzimušajam ar mātes jaunpienu vai pirmsdzemdībām.
Cita klasifikācija imunitāti sadala dabiskā un mākslīgā.
- Dabiskā imunitāte ietver iedzimtu imunitāti un ieguvusi aktīvu (pēc slimības), kā arī pasīvo imunitāti pret mātes antivielu pārnešanu no bērna.
- Mākslīgā imunitāte ietver iegūto aktivitāti pēc vakcinācijas (vakcīnas ievadīšana) un iegūta pasīva (seruma ievadīšana).
Iedzimtu (nespecifisku) imunitāti izraisa spēja identificēt un neitralizēt dažādus patogēnus saskaņā ar visdrošākajiem, viņiem kopīgajiem, evolūcijas radinieku loku, pirms pirmā tikšanās ar viņiem. 2011. gadā tika piešķirta Nobela prēmija medicīnā un fizioloģijā par jaunu iedzimtu imunitātes mehānismu izpēti (Ralph Steinman, Jules Hoffman un Bruce Byotler).
To veic galvenokārt ar mieloīdo šūnu šūnām, tam nav specifiskas antigēnu specifikas, nav klonālas atbildes, nav atmiņas par primāro kontaktu ar svešzemju aģentu.
14. Mononukleāro fagocītu sistēma:
Mononukleāro fagocītu sistēma (grieķu monoks, viens + lat. Nucleos kodols: grieķu pagos graujošais, absorbējošais + golu šūnas; sinonīms: makrofāgu sistēma, monocītu makrofāgu sistēma) - šūnu fizioloģiskā aizsardzības sistēma, kas spēj absorbēt un sagremot svešķermeņus. Šūnām, kas veido šo sistēmu, ir kopīga izcelsme, ko raksturo morfoloģiska un funkcionāla līdzība, un tās ir sastopamas visos ķermeņa audos.
Mononukleāro fagocītu sistēmas modernās koncepcijas pamatā ir I.I. Mechnikovs 19. gadsimta beigās un vācu patologa Aschoffa (K.A.L. Aschoff) mācīšana par retikuloendoteliālo sistēmu (RES). Sākotnēji RES tika izolēta morfoloģiski kā ķermeņa šūnu sistēma, kas spēj uzkrāt būtisko krāsu karmīnu. Pamatojoties uz to, AER tika piesaistīti saistaudu histiocīti, asins monocīti, aknu Kupfera šūnas, kā arī asins veidojošo orgānu retikulārās šūnas, kapilāru endotēlija šūnas, kaulu smadzeņu un limfmezglu sinusa. Ar jaunu zināšanu uzkrāšanos un morfoloģisko pētījumu metožu uzlabošanu kļuva skaidrs, ka idejas par retikuloendoteliālo sistēmu ir neskaidras, nav specifiskas, un vairākos noteikumos tas vienkārši ir kļūdains. Piemēram, ilgu laiku fagocītu šūnu avota loma tika attiecināta uz retikulārajām šūnām un kaulu smadzeņu un limfmezglu sinusa endotēliju, kas izrādījās nepareiza.
Tagad ir konstatēts, ka mononukleāro fagocītu izcelsme ir cirkulējošo asins monocītu. Monocīti nogatavojas kaulu smadzenēs, pēc tam iekļūst asinsritē, no kurienes tie migrē audos un serozās dobumos, kļūstot par makrofāgiem. Retikulārās šūnas veic atbalsta funkciju un rada tā dēvēto mikro vidi hematopoētiskām un limfoidām šūnām. Endotēlija šūnas transportē vielas caur kapilāru sienām. Retikulārās šūnas un asinsvadu endotēlijs nav tieši saistīti ar šūnu aizsardzības sistēmu. 1969. gadā Leidenes konferencē, kas veltīta REC problēmai, jēdziens „retikuloendoteliālā sistēma” tika uzskatīts par novecojušu. Tā vietā tā pieņēma koncepciju par mononukleāro fagocītu sistēmu. Ar šo sistēmu ietvert histiocytes saistaudu, Kupfera šūnas no aknu (zvaigžĦveida retikuloendoteliotsity), alveolu makrofāgos, plaušu makrofāgi limfmezglu, liesas, kaulu smadzeņu, pleiras un peritoneālajos makrofāgiem, Osteoklastu kaulu audu, microglia nervu audu sinovicīta sinoviālā membrānas, ādas šūnu Langergaisa, pigmentu granulēti dendrocīti. Ir brīvi, t.i. pārvietojas caur audiem un fiksētiem (rezidentiem) makrofāgiem, kam ir relatīvi pastāvīga vieta.
Audu un serozo dobumu makrofāgiem saskaņā ar skenējošo elektronu mikroskopu ir forma, kas ir tuvu sfēriskai, ar nevienmērīgu salocītu virsmu, ko veido plazmas membrāna (citolēmija). Kultivēšanas apstākļos makrofāgi izkliedējas uz substrāta virsmas un iegūst saplacinātu formu, un kustības laikā tie veido vairākus polimorfiskus pseidopodijas.
Makrofāgu raksturīga ultrastruktūras iezīme ir daudzu lizosomu un fagolizosomu vai gremošanas vakuolu klātbūtne citoplazmā. Lizosomi satur dažādus hidrolītiskos fermentus, kas nodrošina absorbētā materiāla sagremošanu. Makrofāgi ir aktīvas sekrēcijas šūnas, kas atbrīvo fermentus, inhibitorus un komplementāros komponentus vidē. Galvenais makrofāgu sekrēcijas produkts ir lizocīms. Aktivētie makrofāgi izdalās neitrālas olbaltumvielas (elastāze, kolagenāze), plazminogēna aktivatori, komplementa faktori, piemēram, C2, C3, C4, C5, kā arī interferons.
Mononukleāro fagocītu sistēmas šūnām ir vairākas funkcijas, pamatojoties uz to spēju endocitozi, t.i. svešu daļiņu un koloidālu šķidrumu absorbcija un gremošana. Pateicoties šai spējai, viņi veic aizsardzības funkciju. Caur ķīmotaksiju, makrofāgi migrē uz infekcijas un iekaisuma centriem, kur veic mikroorganismu fagocitozi, nogalināšanu un gremošanu. Hroniska iekaisuma apstākļos var parādīties īpašas fagocītu formas - epitēlija šūnas (piemēram, infekciozā granulomā) un milzu daudzskaitlīgas šūnas Pirogov-Langkhans šūnu tipā un svešķermeņu šūnu veids. kas veidojas, apvienojot atsevišķus phagocytes polykaryonā - daudzkodolu šūnā. Granulomās makrofāgi rada glikoproteīna fibronektīnu, kas piesaista fibroblasci un veicina sklerozes attīstību.
Šūnas Mononukleāro fagocītu sistēma ir iesaistīta imūnprocesos.
Tādējādi priekšnoteikums virzītas imūnās atbildes reakcijas attīstībai ir primārā makrofāga mijiedarbība ar antigēnu. Tajā pašā laikā makrofāgs antigēnu absorbē un apstrādā imunogēnā formā. Limfocītu imūnā stimulācija notiek tiešā saskarē ar makrofāgu, kas satur transformēto antigēnu. Imūnās atbildes reakcija parasti notiek kā komplekss daudzpakāpju G un B limfocītu mijiedarbība ar makrofāgiem.
Makrofāgiem piemīt pretvēža aktivitāte un citotoksiskas īpašības pret audzēja šūnām. Šī aktivitāte ir īpaši izteikta tā sauktajās imūn makrofāgās, kas veic audzēja mērķa šūnu līzi, saskaroties ar sensibilizētiem T limfocītiem, kam ir citofīlas antivielas (limfīni).
Mononukleāro fagocītu sistēmas šūnas ir iesaistītas mieloīdo un limfoido hemopoēžu regulēšanā. Tādējādi ap konkrētu šūnu - centrālo makrofāgu, kas organizē eritroblastisko saliņu eritropoēzi, veido asins saliņas sarkanā kaulu smadzenēs, liesā, aknās un dzeltenuma sacietē. Aknu kupfera šūnas ir iesaistītas asins regulēšanā, veidojot eritropoetīnu. Monocīti un makrofāgi rada faktorus, kas stimulē monocītu, neitrofilu un eozinofilu veidošanos. Tīmekļa dziedzera dziedzera dziedzera (limfmezglu) un limfoido orgānu aizkuņģa dziedzera atkarīgajās zonās ir sastopamas tā sauktās interdigitējošās šūnas - specifiski stromālie elementi, kas pieder arī mononukleāro fagocītu sistēmām, kas ir atbildīgas par limfocītu migrāciju un diferenciāciju.
Makrofāgu apmaiņas funkcija ir to līdzdalība dzelzs metabolismā.
Liesā un kaulu smadzenēs makrofāgi veic eritrofagocitozi, bet tajos ir dzelzs uzkrāšanās hemosiderīna un feritīna formā, ko māsa var atkārtoti izmantot ar eritroblastiem.
15. Leukocīts un tā veidi. Leukopēnija:
Leikocītu formula ir noteiktu leikocītu veidu procentuālā attiecība perifēriskajā asinīs. Leukocītu formula tiek pārveidota noteiktā veidā, raksturīga katrai konkrētai slimībai. Kvantitatīvi mainās leikocīti ar dažādām slimībām, bieži vien ar infekcijām.
Leikocītu skaita pieaugums - leikocitoze, samazinājums - leikopēnija.
Leukocitoze var būt fizioloģiska un patoloģiska, pirmā parādās veseliem cilvēkiem, otrais - ar dažiem sāpīgiem apstākļiem. Leukocitoze ir izmaiņas asins šūnu sastāvā, ko raksturo leikocītu skaita pieaugums. Leukocītu līmenis asinīs ir 3,5–8,8 × 109 / l, bet šis indikators var atšķirties uz augšu vai uz leju atkarībā no laboratorijas un izmantotajām metodēm.
Leukocitoze var būt fizioloģiska un patoloģiska, pirmā parādās veseliem cilvēkiem, otrais - ar dažiem sāpīgiem apstākļiem. Fizioloģiski ietilpst barības leikocitoze (pēc ēšanas), miogēna (pēc fiziskā stresa), grūtnieču leikocitoze un citas patoloģiskas leikocitozes izraisa asinsrades orgānu reakcija uz kairinājumu, ko izraisa infekciozi, toksiski, iekaisuma, starojuma un citi līdzekļi. To novēro arī ar audu nekrozi (miokarda infarktu, audzēja sabrukumu), pēc lielas asiņošanas, brūcēm, galvas traumām utt. Parasti leikocitoze izzūd kopā ar to izraisošo cēloni. Pārejošu leikocitozi, ko raksturo nenobriedušu leikocītu parādīšanās asinīs, sauc par leikozes reakciju.
Leikopēnija ir leikocītu skaita samazināšanās asinīs dažās infekcijas un citās slimībās, kā arī radiācijas bojājumu, medikamentu vai refleksa efekta dēļ kaulu smadzenēs.
Radiācijas bojājumi, saskare ar vairākām ķimikālijām (benzols, arsēns, DDT uc) noved pie leikopēnijas; medikamentu lietošana (citostatiskas zāles, dažu veidu antibiotikas, sulfonamīdi uc). Leukopēnija rodas, ja vīrusu un cietu baktēriju infekcijas, asins sistēmas slimības.
Kad ir nepieciešama leikopēnija, lai precīzi noteiktu slimības cēloni. Līdztekus vīrusu infekcijām un asins veidojošo orgānu slimībām alopātisko zāļu blakusparādības var izraisīt leikopēniju, jo vairākiem medikamentiem ir toksiska iedarbība uz kaulu smadzenēm un ar alerģiskiem mehānismiem var izraisīt leikopēniju un agranulocitozi.
Ārstēšana sastāv no zāļu parakstīšanas, kas stimulē jaunu leikocītu veidošanos vai stimulē nogatavināto balto asins šūnu izdalīšanos.
16. Leukopoesis:
Leukopoēzes regulēšana. Leukocītu ražošana tiek stimulēta ar leukopoetīniem, kas parādās pēc liela daudzuma leikocītu izņemšanas no asinīm. Leukopoetīnu ķermeņa ķīmiskā būtība un veidošanās vieta vēl nav pētīta. Nukleīnskābes, audu degradācijas produkti, kas parādās bojājuma un iekaisuma laikā, un dažiem hormoniem ir stimulējoša iedarbība uz leikopoēzi. Tātad hipofīzes hormonu - adrenokortikotropo hormonu un augšanas hormona - ietekmē palielinās neitrofilu skaits un samazinās eozinofilu skaits asinīs.
Nervu sistēmai ir svarīga loma leikopoēzes stimulēšanā. Simpātisku nervu kairinājums izraisa neitrofilo leikocītu palielināšanos asinīs. Ilgstoša maksts nerva kairinājums izraisa leikocītu pārdalīšanos asinīs: to saturs palielinās asinsvadu asinsvados un samazinās perifēro asinsvadu asinis; kairinājums un emocionāls uzbudinājums palielina leikocītu skaitu asinīs. Pēc ēšanas palielinās leikocītu saturs asinīs, kas cirkulē asinsvados. Šādos apstākļos, kā arī muskuļu darba laikā un sāpīgos stimulos, asinīs iekļūst leikocīti kaulu smadzenēs un kaulu smadzenēs.