Princips Leukocītu skaita noteikšana mikroskopijas laikā noteiktā skaitī skaitīšanas kameras kvadrātu un to skaita aprēķināšana 1 litrā asinīs, ņemot vērā asins atšķaidījumu un skaitīšanas kameras tilpumu.
Reaģents: 3-5% etiķskābes šķīdums, tonēts, lai krāsotu leukocītu kodolu ar dažiem pilieniem metilēnzilā šķīduma. Šķīdumam ir zila krāsa, to var uzglabāt ilgu laiku.
Noteikšanas gaita. Sausā testa mēģenē ielej 0,4 ml etiķskābes šķīduma. No pirksta tiek savākti 0,02 ml asins (jūs varat lietot antikoagulantu stabilizētu venozo asinis). Noslaukiet pipetes galu, pēc tam izšļakstiet asinis no mēģenes apakšējās daļas, samaisiet, atkārtoti izsauciet un izsitiet asins un reaģenta maisījumu (pipetēšanu). Iezīmējiet cauruli un atstājiet to līdz skaitīšanai. Uzglabāt asins maisījumu ar etiķskābes šķīdumu ieteicams ne vairāk kā 2-4 stundas.
Asinis atšķaidītas mēģenē ar etiķskābi, rūpīgi samaisa un piepilda ar skaitīšanas kameru. Aizpildītā kamera 1 minūtes tiek atstāta horizontālā stāvoklī, lai noregulētu balto asinsķermenīšu daudzumu. Nemainot kameras horizontālo stāvokli, tās novieto uz mikroskopa galda un zemā palielinājumā (okulārs 10 ×, objektīvs 8 ×) aprēķina baltās asins šūnas 100 lielos laukumos, kas atbilst 1600 maziem.
Lai iegūtu lielāku precizitāti, leikocīti tiek skaitīti pāri tīklam lielos laukumos, kas nav sadalīti mazos laukumos un svītrās, sākot no režģa augšējā kreisā stūra. Lai nodrošinātu labāku kontrastu, redzamības lauka tumšums, kondensatora nolaišana un atvēruma aizvēršana. Šūnas, kas atrodas kvadrāta iekšpusē un atrodas uz jebkurām divām līnijām, tiek skaitītas, lai to pašu šūnu neskaitītu divreiz.
Leukocītu skaita aprēķins tiek veikts pēc formulas:
kur X ir leikocītu skaits 1 μl asinīs; un - leikocītu skaits 100 lielos laukumos; 20 - asins atšķaidīšana; 100 ir lielo kvadrātu skaits; 250 ir konversijas koeficients uz 1 μl, jo viena liela kvadrāta tilpums ir 1/250 μl (kvadrāta puse ir 1/5 mm, augstums ir 1/10 mm).
Praksē, lai aprēķinātu leikocītu skaitu 1 μl asinīs, to skaits 100 lielajos laukumos tiek reizināts ar 50 un 1 litrā - iegūto vērtību reizina ar 106.
Piezīme Aprēķinot leikocītos, kļūda ir neizbēgama 6–8% gadījumu.
- Tā kā perifēriskajā asinīs ir liels skaits normocītu, tie tiek uzskaitīti leikocītu (gan leikocītu, gan normocītu - kodētu šūnu) skaitā. Lai pareizi noteiktu leikocītu skaitu, no kopējā kodolu asins šūnu skaita vajadzētu atņemt normocītu skaitu.
- Atlikušās kļūdas ir līdzīgas tām, kas rodas, aprēķinot sarkano asins šūnu skaitu skaitīšanas kamerā.
Leukocītu skaits
Skaitīšanas metode kamerā. Caurules metodes iegūšana un atšķaidīšana. Caurulē (vēlams Vidalevskaya) ievada 0,4 ml šķīdinātāja šķidruma un 0,02 ml kapilāro asiņu. Iegūto atšķaidījumu praktiski uzskata par 1:20. Par šķīdinātāju parasti izmanto 3-5% etilskābes šķīdumu, kas tonēts ar metilēnzilu (etiķskābes lizē eritrocītus, metilēnzilā iekrāso leikocītu kodolu). Pirms kameras uzpildīšanas rūpīgi sakrata Goryaeva caurule ar atšķaidītu asiņu. Kameru piepilda tāpat kā sarkano asins šūnu skaitīšanai.
Leukocīti ir daudz mazāki par eritrocītiem (1–2 uz lielu kvadrātu), tāpēc, lai iegūtu precizitāti, skaitļi tiek veikti 100 lielos laukumos (nešķiroti). Aprēķins: 100 lielie laukumi (1600 mazi) tiek uzskaitīti kā leikocīts.
Atceroties, ka neliela kvadrāta tilpums ir 1/4000 mm3, un asinis atšķaida 20 reizes, aprēķina leikocītu skaitu 1 μl asinīs: 4000 20 un dala ar 1600 = a x 1/2. Praktiski, lai iegūtu faktisko leikocītu saturu 1 μl asinīs, ir pietiekami sadalīt uz pusi no aprēķinā iegūtā skaita un pievienot 2 nulles. Vidējā metode ir ± 7%.
Precīzāka (2-3% kļūda) un perfekts ir leikocītu skaits, izmantojot elektroniskās ierīces. Leukocītu skaitīšana daļiņu skaitītājos tiek veikta saskaņā ar to pašu principu kā eritrocītiem. Pirms asinis atšķaida un sajauc ar jebkuru reaģentu, kas lizē sarkano asins šūnu. „Technicon” autoanalizatorā kā „Culter” un „Celloskop” ierīcēs tiek izmantots etiķskābes šķīdums - saponīns vai sapoglobīns, ko pievieno atšķaidītam (1: 500, 1: 700) izotoniskā nātrija hlorīda šķīdumā (6 pilieni uz 20 ml). audzēšana).
Asins leikocītu skaitīšana tiek veikta ar krāsotām perifērajām asinīm.
Labāk ir rēķināties ar plānāko punktu, kas atrodas netālu no uztriepes, vismaz 200 šūnām (izņemot izteiktu leikopēniju), un tad iegūst noteiktu veidu balto asinsķermenīšu procentuālo attiecību. Skaitīšana ir ieteicama tādā pašā kārtībā: puse no šūnām jāuzskaita augšpusē, puse no insulta apakšas, nenonākot pie pašas malas un vidus, zigzagging (3-4 redzes lauki gar gājienu, 3-4 lauki taisnā leņķī pret insultu, tad 3-4 lauki uz sāniem, kas ir paralēli malai, atkal taisnā leņķī uz augšu un tā tālāk uz vienu pusi).
Krāsu sagatavošana. Rūpīgi nomazgāts un attaukots stikls (tā mala) injekcijas vietā skar asins pilienu. Smear padara slīpēšanas stiklu, liekot to 45 ° leņķī pret slaidu priekšā kritiena priekšā. Pēc tam, kad stikls ir nokritis uz šo pilienu, viņi gaida, līdz asinis izplūst gar tās malu, tad ar ātru kustību viņi veic slīpēšanas stiklu uz priekšu, neņemot to prom no objekta, pirms tas izžūst visu pilienu.
Pareizi izgatavotai uztriepei ir dzeltenīga krāsa (plānas), nesasniedz stikla malas un beidzas ar pēdām (ūsas).
Sauso smērvielu krāsošana, kas ražota pēc iepriekšējas fiksācijas. Vislabākā fiksācija tiek panākta absolūtā metilēnalkoholā (3-5 minūtes) vai Nikiforov maisījumā ar vienādām absolūtā etanola un ētera daļām (30 minūtes).
Galvenās hematoloģiskās krāsas ir metilēnzils un tā atvasinājums - debeszils I (metilēna debeszils) un debeszils II (vienādu daļu debeszils I un metilēnzils), skābā ūdenī šķīstošā dzeltenā eozīna.
● Romanovska-Giemsa glezna. Romanovska-Giemsa krāsai (rūpnieciski izgatavota) ir šāds sastāvs: Azur II - 3 g, ūdenī šķīstošs dzeltens eozīns - 0,8 g, metilspirts - 250 ml un glicerīns - 250 ml. Darba krāsu šķīdumu sagatavo ar ātrumu 1,5-2 pilienus gatavās krāsas uz 1 ml destilēta ūdens. Krāsu pārlej uz uztriepes ar iespējami augstāku slāni; krāsošanas laiks - 30-35 minūtes Pēc šī perioda tamponus mazgā ar ūdeni un žāvē gaisā. Šajā metodē ir iespējams labi atšķirt kodolu, bet citoplazmas neitrofilā granulācija ir daudz sliktāka, tāpēc to plaši izmanto perifēro asins uztveršanas krāsošanai.
● Kombinēta maija-Grunvaldes-Romanovska-Giemsa krāsošana pēc Pappenheima. Gatava krāsviela, maija-Grunvaldes fiksators, kas ir eozīnmetilēna zilā šķīdums metilēnalkoholā, 3 minūtes tiek pipetēts uz fiksētas uztriepes. Pēc 3 minūtēm krāsai, kas pārklāj šķīdumu, pievieno vienādu daudzumu destilēta ūdens un krāsošana turpinās vēl vienu minūti. Pēc tam krāsa tiek nomazgāta un uztriepes tiek žāvētas gaisā. Tad žāvēto uztriepi pārkrāso ar svaigi pagatavotu Romanovsky krāsas šķīdumu 8-15 minūtes. Šī metode tiek uzskatīta par labāko, jo īpaši attiecībā uz smadzeņu kauliņu uztriepēm.
Leukocītu skaita pieaugumu perifēriskajā asinīs virs normālā līmeņa sauc par leikocitozi, samazinājumu sauc par leikopēniju. Leukocitozi (leikopēniju) reti raksturo visu veidu leikocītu skaita proporcionāls palielinājums (samazinājums), piemēram, leikocitoze ar asins sabiezēšanu. Vairumā gadījumu palielinās jebkura šūnu tipa skaits (samazinājums). Atsevišķu leikocītu veidu palielināšanās vai samazināšanās asinīs var būt relatīva vai absolūta, atkarībā no kopējā leikocītu skaita - normāla, paaugstināta vai pazemināta. Leukocītu skaita izmaiņas, individuālo formu un morfoloģijas attiecība ir atkarīga no patogēna veida un virulences, patoloģiskā procesa rakstura, kursa un apjoma, organisma individuālās reakcijas.
Leukocītu skaitīšanas metode Goryaev kamerā
Balto asinsķermenīšu - balto asins šūnu - loma ķermeņa antimikrobiālajā aizsardzībā ir būtiska. Granulocīti phagocytize mikrobus un tos iznīcina, izmantojot fermentus, kas atrodas granulās, limfocīti ražo antivielas un nodrošina imūnās atbildes reakciju uz ķermeni.
Cauruļu metodes noteikšanas metode: ielej testa mēģenē 0,4 ml Türk šķīduma (Türk šķidrums satur etiķskābi, lai iznīcinātu sarkano asins šūnu un metilēnzilu, lai krāsotu leikocītu kodolu). Izmantojiet kapilāru pipeti, lai novilktu 0,02 ml asiņu no svaiga piliena, viegli uzsitiet to mēģenē ar reaģentu un izskalojiet pipeti. Labi samaisa. Tajā pašā laikā asins atšķaidīšana ir 20 reizes. Apaļā stikla stieņa galā tiek savākta atšķaidītas asins piliens un uzklāta pulēta stikla kameras malā.
Skaitīšana tiek veikta 100 lielos, nepārtrauktos laukumos, ko veido četri. Izmantots neliels pieaugums.
Skaitīšanas formulas Nr. 1 atvasināšana.
1. 100 kvadrātu satur 1600 mazus kvadrātu (16x100)
2. Asins tilpums virs mazā kvadrāta 1/4000 mm3
3. Asins atšķaidīšana 20 reizes
Leukocītu skaits 1 μl asinīs = pie -4000-20. = Ax 50
Piemēram: 130 lielie laukumi Goryaev režģī tika uzskaitīti 130 leikocīti. 1 μl asinīs leikocītu skaits būs 130 x 50 = 6500 vai 6,5-10 3.
Lai noteiktu leikocītu saturu 1 litrā asinīs, leikocītu skaits, izteikts tūkstošos, jāreizina ar 10 9.
Mūsu piemērā leikocītu skaits 1 litrā asinīs ir 6,5-10 9.
194.48.155.245 © studopedia.ru nav publicēto materiālu autors. Bet nodrošina iespēju brīvi izmantot. Vai ir pārkāpts autortiesību pārkāpums? Rakstiet mums Atsauksmes.
Atspējot adBlock!
un atsvaidziniet lapu (F5)
ļoti nepieciešams
Leukocītu skaits asinīs
Leukocitoze var būt absolūta (patiesa) un relatīvā (pārdales).
Absolūtā leikocitoze tiek novērota akūtiem iekaisuma procesiem, audu nekrozei, akūtām bakteriālām infekcijām (izņemot vēdertīfu, brucelozi, tularēmiju uc), alerģiskiem stāvokļiem, ļaundabīgiem audzējiem (ar audu iznīcināšanu), slēgtiem galvas traumām un asiņošanu smadzenēs, diabētu. urēmiskā koma, šoks, akūta asins zudums, kā primārā reakcija - ar staru slimību. Ar leikēmiju notiek ievērojams leikocītu skaita pieaugums.
Relatīvais (redistributīvs) ir sekas, kas rodas, saņemot leikocītus asins plūsmā no orgāniem, kas kalpo viņas depo. Tas notiek pēc ēšanas (pārtikas leikocitozes), karstām un aukstām vannām, spēcīgām emocijām (vegetovaskulāra leikocitoze), intensīvam muskuļu darbam (myogen leukocytosis) utt.
Leukopēnija Leukopēniju uzskata par kaulu smadzeņu funkcionālās spējas inhibēšanas rādītāju toksisku vielu (arsēna, benzola uc), dažu medikamentu (sulfanilamīdu, hloramfenikola, butadiona, imūnsistēmas, ciklofosfamīda uc), vīrusu (gripas, vīrusu hepatīta) iedarbības rezultātā., masalas uc), mikrobiem (vēdertīfs, bruceloze uc), jonizējošam starojumam, rentgena stariem un hipersplenismam (palielināta liesas funkcija).
Leukocitozi un leikopēniju reti raksturo proporcionāls visu veidu leikocītu skaita pieaugums (samazinājums) (piemēram, leikocitoze ar asins sabiezējumu); vairumā gadījumu tiek palielināts (samazināts) jebkura šūnu tipa skaits, tādēļ tiek izmantoti termini "neitrofīlija", "neitropēnija", "limfocitoze", "limfopēnija", "eozinofīlija", "eozinopēnija", "monocitoze", "monocitopēnija"., "Basofīlija".
Leukocītu skaita pārmaiņu klīniskajā novērtējumā liela nozīme ir atsevišķu leikocītu formu, ti, leikocītu formulas procentuālajai attiecība.
Veselīgas personas leikocītu asins skaitīšana:
Relatīvais apjoms Absolūtā summa
Basofīli ……………………….0-1% 0-0.0650 x 10 9 / l
Eozinofīli …………………….0,5-5% 0,02-0,30 x 10 9 / l
Neitrofīli: - mielocīti............. 0% nav
- sadurts... 1-6% 0,040-0,300 x 10 9 / l
- segmentēti….47-72% 2,0-5,5 x 10 9 / l
Limfocīti …………………………….19-37% 1,2-3,0 x 10 9 / L
Monocīti ……………………….3-11% 0,09-0,6 x 10 9 / L
Leukocītu skaitīšana tiek veikta iekrāsotajās perifērās asinīs. Lai pareizi interpretētu pētījumus par leikocītu formulu, ieteicams skaitīt absolūtos daudzumos, bet ne relatīvajos. Visbiežāk izmantotās Romanovska-Giemsa, Pappenheimas gleznu gleznošanas metodes. Iegremdējot tiek skaitītas vismaz 200 šūnas, un pēc tam iegūst noteiktu veidu leikocītu procentuālo attiecību. Leukogrammas analīze, ņemot vērā citus asins parametrus un klīnisko attēlu, ir vērtīga pārbaudes metode, tā palīdz diagnosticēt un noteikt slimības prognozi.
Galvenie neitrofilijas cēloņi.
Akūtas bakteriālas infekcijas - lokalizētas un vispārinātas.
Audu iekaisums vai nekroze.
Zāļu iedarbība (kortikosteroīdi).
Galvenie neitropēnijas cēloņi.
Infekcijas - baktērijas (vēdertīfs, bruceloze, tularēmija, paratifīds) un vīruss (infekciozs hepatīts, masalas, gripa, masaliņas un citi).
Mezelotoksiska iedarbība un granulocitopoēzes nomākums (jonizējošais starojums; ķīmiskie līdzekļi - benzols, anilīns, DDT; zāļu iedarbība - citostatiskie līdzekļi un imūnsupresanti; B vitamīns12-folskābes deficīta anēmija, akūta aleukēmiska leikēmija, aplastiska anēmija).
Antivielu iedarbība (imūnās formas) - paaugstināta jutība pret zālēm, autoimūnām slimībām (SLE, reimatoīdais artrīts, hroniska limfātiskā leikēmija), izoimūnu izpausmes (jaundzimušo hemolītiskā slimība).
Pārdalīšana un nogulsnēšanās orgānos - šoka apstākļi, slimības ar splenomegāliju un hipersplenismu.
Iedzimtas formas (ģimenes labdabīga hroniska neitropēnija).
Galvenie eozinofilijas cēloņi.
Parazītu invāzijas (trihineloze).
Hroniski ādas bojājumi - psoriāze, pemphigus, ekzēma.
Audzēji (leikozes eozinofīlie varianti).
Citas slimības - fibroplastisks endokardīts Lefflera, skarlatīna.
Infekciju un iekaisuma slimību atveseļošanās fāzē (labvēlīga prognozes zīme).
Eozinopēnijas (aneozinofilijas) cēloņi.
Palielināta adrenokortikosteroīdu aktivitāte organismā.
Bāzofilijas galvenie cēloņi:
Hroniska mieloīda leikēmija un eritrēmija.
Galvenie monocitozes cēloņi.
Subakūtas un hroniskas baktēriju infekcijas.
Parazitāras infekcijas - leishmaniasis, malārija.
Hemoblastoze - monocītiska leikēmija, limfogranulomatoze, limfomas.
Citi apstākļi ir SLE, sarkoidoze, reimatoīdais artrīts, infekcioza monocitoze; atkopšanās periodā no infekcijām, atstājot agranulocitozi pēc splenektomijas.
Monocītu skaita samazināšanās ir svarīga galvenokārt limfocītu-monocitisko attiecību novērtēšanā plaušu tuberkulozē.
Galvenie limfocitozes cēloņi.
Infekcijas - akūta vīrusu (infekcioza mononukleoze, masalas, masaliņas, vējbakas), hroniskas baktērijas (tuberkuloze, sifilis, bruceloze), vienšūņu (toksoplazmoze).
Hemoblastoze (limfocītiskā leikēmija, limfoma).
Citas slimības - hipertireoze, Adisona slimība, B vitamīns12-folijas deficīta anēmija, hipo-un aplastiska anēmija.
Limfocitopēniju novēro SLE, Hodžkina slimībā, plaši izplatītā limfmezglu tuberkulozē, nieru mazspējas terminālajā stadijā, akūtu staru slimību, imūndeficīta stāvokļiem, lietojot glikokortikoīdus.
Dažu leikocītu veidu palielināšanās vai samazināšanās asinīs var būt relatīva vai absolūta. Ja mainās tikai kāda veida balto asinsķermenīšu veids, tad notiek relatīvā neitrofīlija, relatīvā eozinopēnija utt. Jebkura veida leikocītu absolūtā satura, tas ir, šo šūnu skaita pieaugumu vai samazinājumu asins tilpuma vienībā, sauc par absolūto neitrofiliju, absolūto eozinopēniju utt.
Formula pārvietošana pa kreisi (palielinot neitrofilu jauno formu skaitu) ir iekaisuma vai nekrotiska procesa pazīme organismā.
Leukocītu formulas maiņa pa labi ir raksturīga radiācijas slimībai un B vitamīnam12-folskābes deficīta anēmija.
Visu veidu granulēto leikocītu - granulocītu (neitrofilu, eozinofilu, basofilu) skaita trūkumu vai būtisku samazinājumu apzīmē ar terminu agranulocitoze. Atkarībā no sastopamības mehānisma izceļas mielotoksisks (jonizējošā starojuma, citostatiskās devas ietekme) un imūnsistēma (haptens un autoimūna agranulocitoze).
Leukocīti (leucocytus)
Leukocīti. Leukocītu kvantitatīvā noteikšana. Leukocītu skaitīšana, izmantojot kameru Goryaeva. Leukocītu kvantitatīvais saturs. Leukocitoze.
Baltās asins šūnas
Leukocītu skaits asinīs ir atkarīgs gan no to veidošanās ātruma, gan no to mobilizācijas no kaulu smadzenēm, kā arī no to izmantošanas un migrācijas audos (uz bojājumiem), plaušu un liesas sagūstīšanu. Šos procesus savukārt ietekmē vairāki fizioloģiski faktori, un tāpēc leikocītu skaits veselā cilvēka asinīs ir pakļauts svārstībām: tas palielinās dienas beigās, fiziskās slodzes, emocionālā stresa, proteīnu pārtikas patēriņa un straujas apkārtējās temperatūras izmaiņas.
Leukocītu kvantitatīvā noteikšana
Leukocīti tiek skaitīti, izmantojot Goryaev kameru un izmantojot automātiskos skaitītājus.
Leukocītu skaitīšana, izmantojot kameru Goryaeva
Ar in vitro metodi, lai ņemtu leikocītu skaitu asinīs:
- Caurulē ielej 0,4 ml 3-5% etiķskābes šķīduma, kas tonēts ar metilēnzilu. Izmantojiet kapilāru pipeti, lai 20 μl asinis izvilktu no jauna piliena (atšķaidīšana 20 reizes), uzmanīgi uzsitiet to mēģenē ar reaģentu un izskalojiet pipeti. Labi samaisa;
- tīrā un sausā pārseguma stikls tiek berzēts uz kameru tā, lai kontakta vietā veidotos varavīksnes gredzeni;
- asinis, kas atšķaidītas mēģenē, labi samaisa. Apaļa stikla stieņa gals aizņem asins pilienu un nogādā to kameras pulēta stikla malā;
- pēc kameras piepildīšanas tas atstāj uz 1 min ilgu laiku leikocītu nogulsnēšanai;
- Leukocīti tiek uzskatīti par zemu palielinājumu (objektīvs × 8 vai × 9, okulārs × 10 vai × 15) ar tumšāku redzamības lauku (ar pazeminātu kondensatoru vai sašaurinātu diafragmu);
- apmierinošiem rezultātiem, leikocīti tiek skaitīti 100 lielos laukumos.
Zinot lielā laukuma tilpumu un asins atšķaidīšanas pakāpi, atrodiet leikocītu skaitu 1 μl un 1 l asinīs. Lielā laukuma puse ir 1/5 mm, platība ir 1/25 mm2, telpas laukums virs šī laukuma ir 1/250 mm3.
Baltās asins šūnas skaitīšanas formula:
kur B ir leikocītu skaits 100 lielos laukumos;
P - atšķaidīšanas pakāpe (20).
Leukocītu skaits
Norm: 4,0–9,0 × 10 9 / L
Tiek aicināts palielināt leikocītu skaitu virs 9,0 × 10 9 / l
leikocitoze, to skaita samazināšanās zem 4,0 × 10 9 / l - leikopēnija. Tomēr pat 3,5 × 10 9 1 l leikocītu vairākiem indivīdiem var būt norma. Saskaņā ar literatūru šādi cilvēki ir palielinājuši imūnsistēmu, un visticamāk, tie saslimst, kas, šķiet, ir saistīts ar nepieciešamību pēc imūnās atbildes uz leikocītu rezervi audos, kur ir 50–60 reizes vairāk nekā asinsritē. Protams, veseliem indivīdiem ar zemu balto asins šūnu skaitu perifēriskajā asinīs attiecīgi palielinās to rezerves audos. Šī parādība izskaidrojama ar iedzimtu un ģimenisku raksturu vai parazīmisko nervu sistēmas ietekmes palielināšanos.
Leukopēnija var būt funkcionāla un organiska.
Funkcionālā leikopēnija ir saistīta ar asins veidošanās traucējumiem un tiek novērota:
- ar dažām baktēriju un vīrusu infekcijām (vēdertīfu, gripu, bakas, masaliņām, Botkin slimību, masalām);
- narkotiku iedarbībā (sulfonamīdi, pretsāpju līdzekļi, pretkrampju līdzekļi, pretaizdzīšanas līdzekļi, citostatiskie un citi medikamenti);
- muskuļu darba laikā, svešu olbaltumvielu ieviešana, nervu un temperatūras ietekme, bads, hipotoniskie stāvokļi;
- viltus leikocitopēnija var būt saistīta ar leikocītu agregāciju ilgstošas asins uzglabāšanas laikā istabas temperatūrā (vairāk nekā 4 stundas).
Organiskā leikopēnija, ko izraisa kaulu smadzeņu aplazija un tās aizstāšana ar taukaudiem, rodas, ja:
- aplastiska anēmija;
- agranulocitoze;
- leikopēniskā leikēmija;
- dažas Hodžkina slimības formas;
- jonizējošais starojums;
- hipersplenisms (primārā un sekundārā);
- kolagēna slimības.
Leukocitoze
Leukocitoze ir asinsrades sistēmas reakcija uz iedarbību
eksogēni un endogēni faktori. Ir fizioloģiska un patoloģiska leikocitoze.
Fizioloģiskā leikocitoze ir:
- gremošanas līdzekļi - pēc ēšanas, īpaši proteīnu daudzums; leikocītu skaits nepārsniedz 10,0–12,0 × 10 9 / l un pēc 3-4 stundām tas normalizējas;
- ar emocionālu stresu (adrenalīnu), smagu fizisku slodzi, dzesēšanu, pārmērīgu saules iedarbību (saules apdegumu), vairāku hormonu (katecholamīnu, glikokortikosteroīdu uc) ievadīšanu grūtniecības otrajā pusē, menstruāciju laikā un nevienmērīga leikocītu sadalījuma dēļ asinīs mainstream.
Patoloģiskā leikocitoze ir sadalīta absolūtā un relatīvā.
Absolūtā leikocitoze - leikocītu skaita palielināšanās asinīs līdz vairākiem simtiem tūkstošu (100,0–600,0 × 10 9 / l un vairāk).
- Visbiežāk novērota leikēmija: hroniskā leikēmijā - 98-100% gadījumu akūtā leikēmijā - 50-60%. Leukocītu šūnu attiecības maiņa kaulu smadzenēs un asins punktos kalpo par pamatu leikēmijas diagnostikai.
Ir novērota relatīva leikocitoze:
- akūti iekaisuma un infekcijas procesi, izņemot vēdertīfu, gripu, bakas, masaliņas, Botkin slimību, masalus. Lielākā leikocitoze (līdz 70,0–80,0 × 10 9 / l) novērota sepsi;
- toksisku vielu (kukaiņu indes, endotoksīni), jonizējošā starojuma (tūlīt pēc apstarošanas) ietekmē;
- kortikosteroīdu, adrenalīna, histamīna, acetilholīna un digitālo preparātu iedarbības rezultātā;
- ar audu dezintegrāciju (nekrozi), miokarda infarktu, perifēro artēriju trombozi, attīstot gangrēnu, apdegumus, eksudatīvu pleirītu, perikardītu, urēmiju, aknu komu;
- ievērojams asins zudums traumās, iekšējā, ginekoloģiskā un cita veida asiņošana.
Leikocītu skaita pieaugums infekcijas slimībās vairumā gadījumu ir saistīts ar leikocītu formulas maiņu pa kreisi
Leukocītu skaits un leikocītu skaits.
Lai aprēķinātu leikocītos, asinis atšķaida maisītājos vai mēģenēs. Šim nolūkam izmantojiet 3-5% etiķskābes šķīdumu (sarkano asins šūnu iznīcināšanai), tonējot ar jebkuru anilīna krāsu (leikocītu kodolu krāsošanai). Skaitīšanas režģis tiek aizpildīts tāpat kā sarkano asins šūnu skaitīšanai. Leukocīti tiek skaitīti 100 lielos laukumos. Goryaev tīklā ir ērti tos skaitīt nepārtrauktos laukumos (no tiem ir 100 no tiem). Ņemot vērā asins atšķaidījumu un šķidruma tilpumu virs laukumiem, aprēķiniet nemainīgu reizinātāju. Ja audzējat 20 reizes, tas ir 50 gadi.
Strādājot ar testa mēģenēm, tās tajās iepilda 0,38 ml šķidruma un tajā atbrīvo 0,02 ml asiņu. Lai aprēķinātu automātisko skaitīšanu testa mēģenēs, sarkanās asins šūnas hemolizējas ar saponīnu. Normālais balto asinsķermenīšu skaits ir 4,3 • 10 9 - 11,3 • 10 9 / l vai 4300-11 300 1 μl asinīs.
Leukocītu skaits, kas aprēķināts krāsotajās uztriepes.
Labs uztriepes atbilst šādām prasībām: tas ir plāns, un formas elementi atrodas vienā slānī; šajā gadījumā uztriepes ir dzeltenas un caurspīdīgas. Labs uztriepes ir vienādas, un šūnas nav bojātas. Lai asinis gulētu vienmērīgi uz stikla, tas tiek attaukots, sadedzinot gāzes degli pār liesmu vai turot spirta un ētera maisījumā. Ar stikla galu, tie pieskaras svaigi izlaistajam nelielajam asins pilienam un nekavējoties to uzklāj uz stikla. Pirms iekrāsošanas uztriepi uz 3 minūtēm iegremdē metanolā, 30 minūtes etilspirta vai tā maisījumā. Ir vairāki citi fiksatori. Pēc fiksācijas izžāvēto tamponu piepilda ar krāsu.
Atšķirot asins šūnas (leikocītu formulas definīcijas), izmanto diferenciālu krāsošanu. Romanovska-Giemsa visplašāk izmantotā krāsa. Šī krāsa ir vāji skābes (eozīna) un vāji sārmainu (debeszils II) krāsu maisījums. Šūnas un to daļas atkarībā no barotnes reakcijas uztver vienu vai otru krāsvielas sastāvdaļu: skābās (basofīliskās) vielas ir krāsaina zilā zilā krāsā, sārmainā (oksifiliskā) krāsaina eozīna sarkana; Neitrāls uztver gan krāsas, gan apgriezt violetu.
Leukocītu formula attiecas uz asins leikocītu individuālo formu procentuālo daudzumu.
NB! Lai iegūtu pietiekami precīzu aprēķinu, ir nepieciešams apskatīt vismaz 200 balto asins šūnu.
Skaitīšana tiek veikta ar iegremdēšanas sistēmu. Sakarā ar to, ka šūnas ir nevienmērīgi izvietotas uztriepē (lielākas iet uz malām), ir svarīgi ievērot šādu kustības kārtību uz uztriepes, kurā tās malas un vidējā laukuma daļa būtu vienādi redzama. Tiek izmantota viena no divām kustības metodēm: viena no tām pārvieto insultu no augšējās malas uz apakšējo, pārvieto 2 līdz 3 redzes laukus gar malu, tad virzās pretējā virzienā uz augšējo malu utt. Otrajā metodē tie pārvietojas no malas uz 5 —6 lauki insultu vidū, tad tāds pats apjoms uz sāniem, tad atpakaļ uz malu, pāriet vairākiem laukiem uz sāniem un atkārtojiet kustību vēlreiz, līdz tiek aprēķinātas 50 šūnas. Skatiet 4 no šīm vietām 4 uztvērēja stūros. Skaitīt 200 šūnas, skaits ir sadalīts uz pusēm un nosaka katra veida balto asins šūnu skaitu.
Leukocīti ir asins elementi, kas ātri reaģē uz dažādām ārējām ietekmēm un izmaiņām ķermeņa iekšienē. Kopējā leikocītu skaita noteikšanai var būt liela diagnostiskā vērtība, jo tā atklāj asins veidojošo orgānu stāvokli vai to reakciju uz kaitīgām sekām. Leukocītu skaita pieaugums - leikocitoze - ir leikopoēzes aktivācijas rezultāts, to skaita samazināšanās - leikopēnija - var būt atkarīga no asins veidojošo orgānu inhibīcijas, to izsīkuma un leikocītu pastiprināta sadalīšanās pret leukocītu antivielu iedarbībā. Visbiežāk sastopamā leikocītu grupa ir neitrofīli, kuru skaits palielinās ar daudzām infekcijām, intoksikācijām un audu sadalījumu.
Aktīvajai neitropozei raksturīga ne tikai neitrofilu kopējā skaita palielināšanās asinīs, bet arī nenobriedušu formu parādīšanās tajā: palielinās stabējošo šūnu skaits, parādās jauni neitrofīli, dažreiz pat mielocīti. Šo neitrofilo kompozīcijas "atjaunošanos" sauc par leikocītu nobīdi pa kreisi. Neitrofilu aizsargājošo lomu nosaka to fagocītiskā funkcija, baktericīdā iedarbība un proteolītisko enzīmu atbrīvošanās, kas veicina nekrotiskā auda rezorbciju un brūču dzīšanu.
Visbiežāk reģeneratīva novirze notiek jebkura iekaisuma procesa vai nekrozes fokusa klātbūtnē. Ļoti asu kreiso pāreju uz promyelocītiem un pat mieloblastiem ar nozīmīgu leikocitozi sauc par leikēmoīdu reakciju. Neitrofilo leikocītu skaita samazināšanās - absolūtā neitropēnija - rodas, ja kaulu smadzenes kavē dažu mikroorganismu (tīfu drudža, brucelozes uc) un vīrusu, jonizējošā starojuma, vairāku zāļu iedarbību.
2. Limfocīti. Limfocitozi novēro atjaunošanās periodā no akūtām infekcijas slimībām, ar infekciozu mononukleozi, infekciozu limfocitozi, limfocītu leikēmiju, masaliņām, brucelozi, tirotoksikozi.
Absolūtā limfopēnija rodas staru slimības gadījumā, limfātiskās sistēmas sistēmiskie bojājumi: limfoma, limfosarkoma.
3. Eozinofīli. Tie ir atrodami asinīs salīdzinoši nelielos daudzumos (galvenokārt audos), bet to skaits palielinās, dažkārt ievērojami, alerģiskos procesos (seruma slimība, bronhiālā astma), helmintiskās invāzijās un niezoši dermatozēs.
Sepsi, smagas tuberkulozes formas, vēdertīfs un smaga intoksikācija novēro eozinofilu - eozinopēnijas - samazināšanos līdz pilnīgai izzušanai.
4. Basofīli. Vai ir svarīgi audu vielmaiņas mediatoru nesēji (tauku audu šūnu asins "ekvivalenti"). Ja organisms ir sensibilizēts, to skaits palielinās, un, kad alergēns tiek atkārtoti ieviests, to sadalījums strauji samazinās.
5. Monocīti. Monocītu - monocitozes - skaita pieaugums ir imūnprocesu attīstības rādītājs. Monocīti tiek atzīti par audu makrofāgu analogiem. Monocīti ir atrodami vairākās hroniskās slimībās (hronioze, tuberkuloze, sifiliss). Monocitopēniju dažkārt novēro smagu septisku, hipertoxicālu vēdertīfu drudža formu gadījumā.
Agranulocīti. Agranulocītu īpašā iezīme ir nesadalītais kodols un basofīlā (zilā) citoplazma.
Limfocīti ir mazākais leikocītu lielums. Kodols ir apaļas, ovālas vai pupu formas; aizņem lielāko daļu šūnas, intensīvi krāsotas. Vairums limfocītu ar šauru loka citoplazmu ieskauj kodolu, krāsotas gaiši zilā krāsā un tiek noskaidrotas uz kodolu.
Monocīts ir lielākais no asins šūnām. Liela neregulāras formas un relatīvi gaiša krāsa. Citoplazma ir pelēcīgi zila, dūmu krāsa, kas nav noskaidrota līdz kodolam
Papildus šīm šūnām, tas ir reti sastopams normālā asinīs, un plazmas šūnas bieži var rasties slimībās. Tās izceļas ar ekcentriski izvietotu blīvu kodolu, bieži vien ar riteņu līdzīgu struktūru. Šo šūnu skaits palielinās ar dažām infekcijas slimībām, brūču sepsi un multiplās mielomas.
Aprēķinot leikocītu formulu, uzmanība tiek pievērsta ne tikai kvantitatīvām pārmaiņām tajā, bet arī formālo elementu kvalitatīvajām izmaiņām. Agrāk tika konstatētas degeneratīvas izmaiņas leikocītos. Smagas intoksikācijas gadījumā neitrofilu granulācija kļūst bagātīga, liela, intensīvi krāsaina un to sauc par toksisku (vai toksisku). Dažreiz asins uztriepes tiek konstatētas asinīs, krāsotas kā leukocītu kodolmateriāls. Tie ir tā sauktie Botkin - Humprecht ēnas - kodolkromatīna paliekas, kas norāda uz paaugstinātu leikocītu trauslumu, kas noved pie to sadalīšanās - leikocitolīze
99. Asins grupas noteikšanas metodes, Rh faktora jēdziens.
1. Asins grupas noteikšana pēc standarta serumiem:
Nepieciešama šāda iekārta:
o divi standarta hemaglutinējošo serumu komplekti I (0), II (A), III (B) grupas ar divām dažādām sērijām un viens flakons ar serumu IV (AB)
o pudele ar pipeti ar izotonisku nātrija hlorīda šķīdumu
o notīriet sausu sauso plāksni
o stikla slaidi
o sterilas šķēpu adatas pirksta mīkstumam
o sterilas marles bumbiņas;
Standarta serumi asins grupas noteikšanai saskaņā ar ABO sistēmu tiek ražoti ar īpašu krāsu marķējumu.: I (0) - bezkrāsains, II (A) - zils, III (B) - sarkans, IV (AB) - dzeltens. Serums uzglabāts 4-10 ° C temperatūrā. Serumam jābūt vieglam un caurspīdīgam. Pārklājumu, sedimentu, duļķainuma klātbūtne liecina par seruma nepiemērotību. Pirmās aglutinācijas pazīmes parādās ne vēlāk kā 30 sekundes.
Plāksne ir sadalīta četrās kvadrās ar krāsainu zīmuli un pulksteņrādītāja virzienā ir apzīmētas ar kvadrātu I (0), II (A), III (B). Ar pipeti tiek ievietots liels I (0), II (A), W (B) grupu seruma lielais piliens. Pirkstu spilventiņu apstrādā ar alkoholu, un adata tiek izspiesta ādā. Pirmais asins piliens tiek noņemts ar marles lodīti, sekojoši pilieni dažādās slaidu daļās secīgi tiek uzklāti seruma pilieniem un rūpīgi samaisīti. Asins pilienam jābūt 5-10 reizes mazākam par seruma pilienu. Tad, kratot plāksni, rūpīgi samaisa asinis ar serumu. Sākotnējie rezultāti tiek novērtēti pēc 3 minūtēm, pēc tam pievienojot izotoniskā nātrija hlorīda šķīduma pilienu, atkal sajaucot plāksni, un pēc 5 minūtēm tiek veikts galīgais aglutinācijas reakcijas novērtējums.
Ar pozitīvu izohemaglutinācijas testu, pievienojot nātrija hlorīda izotonisku šķīdumu un sajaucot, pārslas un kodoli no piesaistītajām sarkano asins šūnām neatšķiras.
Ja negatīvas reakcijas pilieni uz seruma ir caurspīdīgi, vienmērīgi rozā, tajos nav pārslu un graudu.
Ir iespējamas četras aglutinācijas reakciju kombinācijas ar I (0), II (A), III (B) grupu standarta serumiem.
v Visi trīs serumi abās sērijās nav aglutinēti. Asins analīze -
I grupa.
v Izohemaglutinācijas reakcija ir negatīva ar seruma P (A) grupām abās sērijās un pozitīvs ar seruma I (0) un III (B) grupām. Asins analīze -
II (A) grupa.
v Izohemaglutinācijas reakcija ir negatīva ar III (B) grupas serumu abās sērijās un pozitīvu ar I (0) un II (A) grupu serumu. Asins analīze -
III (B) grupa.
v Seruma I (0), II (A), III (B) grupas abās sērijās dod pozitīvu reakciju. Asinis pieder IV (AB) grupai. Bet pirms šāda secinājuma sniegšanas ir nepieciešams veikt izohemaglutinācijas reakciju ar grupas standarta serumu IV (AB), izmantojot to pašu procedūru. Negatīvs izohemaglutinācijas tests ļauj pārbaudīt asinis IV (AB) grupai.
2. Rh faktora jēdziens.
Vēl viens antigēns (aglutinogēns) tika konstatēts eritrocītos, ko sauca par Rh faktoru. Visi cilvēki ir sadalīti indivīdos ar Rh pozitīvu (Rh +) un Rh-negatīvu (Rh) asinīm. Ir konstatēts, ka 85% cilvēku ar eritrocītiem satur Rh faktoru, t.i., to asinīs ir Rh-pozitīvs, un 15% to nesatur, t.i., šo cilvēku asinis ir Rh-negatīvas. Rh faktoram (Rh-antigēns) asinīs parasti nav anti-Rh-agglutinīna (gatavas antivielas). Šādas antivielas asins serumā parādās tikai tādas personas imunizācijas rezultātā, kurai ir Rh-negatīva asinsrite ar Rh-pozitīvām sarkanām asins šūnām. Šāda imunizācija notiek sakarā ar atkārtotu Rh-pozitīvo asins pārliešanu uz Rh negatīvu saņēmēju vai sievietes ar Rh-negatīvu Rh-pozitīvu asiņu grūtniecības laikā. Šādā veidā imunizēti cilvēki kļūst jutīgi: kad tie tiek pārnesti ar Rh pozitīvu asinīm, rodas nopietna komplikācija - asins pārliešanas šoks.
Aprēķinot leikocītu un trombocītu skaitu
Faktori, kas ietekmē balto asinsķermenīšu pētījuma pareizību
- ilgstoša asins uzglabāšana istabas temperatūrā
Leukocītu satura normas asinīs
Vecums leikocītu skaits
- 1 diena 11.6 - 22.0
- 1 nedēļa 8.1.- 14.3
- 1 mēnesis 7.6 - 12.4
- Pieaugušie 4,0 - 9,0
Metodes leikocītu skaita noteikšanai asinīs.
- Leukocītu skaita skaitīšana skaitīšanas kamerā
- Leukocītu skaitīšana hematoloģijas analizatoros
Leukocītu skaita noteikšana skaitīšanas kamerā.
- Leukocītu skaita noteikšana mikroskopā tiek veikta pēc sarkano asins šūnu lizēšanas 100 lielos skaitīšanas režģa laukumos un pārrēķinot 1 litram asins, pamatojoties uz kvadrātu tilpumu un asins atšķaidījumu. Leukocītu skaits jāveic 2 - 4 stundu laikā pēc asins savākšanas.
- Ja perifēro asiņu asinsķermenīši ir kodēti, tie netiek lizēti un skaitīti kopā ar leikocītiem. Šajā gadījumā, lai noteiktu patieso leikocītu skaitu, šūnu skaits sarkanajā rindā tiek atņemts no kopējā skaitīto šūnu skaita.
- Piemēram: kopējais leikocītu skaits aprēķinā kamerā (vai analizatorā) -45x109 / l. Aprēķinot leikocītu formulu, tika konstatēts, ka uz 100 leikocītiem ir 50 eritroblastu (normoblastu).
Mēs aprēķinām patieso leikocītu skaitu asinīs:
150 šūnas - 45 x 109 / l
100 šūnas (leikocīti) - X
X = 100 * 45 * 10 / l / 150 = 30 * 10 / l
Tādējādi patiesais leikocītu skaits asinīs ir 30 x 109 / l.
Galvenie kļūdu avoti leikocītu aprēķināšanā kamerā:
- Nepareiza asins un etiķskābes tilpuma attiecība, kas ņemta mēģenē.
- Nepareizi sagatavots etiķskābes šķīdums (koncentrācijā, kas pārsniedz 5%, var izdalīties daži leikocīti, kas novedīs pie rezultāta nenovērtēšanas).
- Parauga ilgstoša iedarbība temperatūrā virs 28 ° C, kas var paātrināt leikocītu izdalīšanos paraugā un novest pie rezultāta nenovērtēšanas.
- Nepareiza Goryaev kameras aizpildīšana. Tāpat kā ar sarkano asins šūnu aprēķināšanu, kamerai jāpaliek 1 minūti, lai noregulētu šūnas.
- Pēc iepriekšējās definīcijas Goryaev kamera netika pietiekami labi nomazgāta. Kamerā palikušie leikocīti var pārvērtēt analīzes rezultātus.
Trombocītu skaitīšanas metodes
- skaitīšanas kamerā
Katrai metožu grupai ir priekšrocības un trūkumi.
- Trombocītu skaitīšana kamerā ir pietiekami precīza, nav nepieciešams aprēķināt sarkano asins šūnu skaitu. No otras puses, šī metode ir darbietilpīgāka, jo trombocīti dabiskā formā tiek attēloti ar maziem un slikti kontrastētiem elementiem. Metodes trūkums ir trombocītu skaitīšana tuvākajās stundās pēc asins ņemšanas.
- Trombocītu skaita noteikšana asinīs ir ievērojami zemāka par kameras metodi vai automātiskajiem skaitītājiem. Kļūdas asins uztveršanas skaitīšanā var būt sliktas uztriepes kvalitātes un ar to saistītās nevienmērīgās trombocītu izkliedes dēļ, neprecīza sarkano asins šūnu skaita noteikšana. Būtisks šīs metodes trūkums ir nepieciešamība vienlaicīgi skaitīt trombocītu un sarkano asins šūnu daudzumu asinīs. Tā priekšrocība ir spēja jebkurā laikā pētīt trombocītus neatkarīgi no asins savākšanas laika.
- Trombocītu noteikšanas metode, izmantojot hematoloģisko analizatoru, ļauj precīzi noteikt trombocītu skaitu, to vidējo tilpumu un sadalījumu pēc tilpuma.
Vienota metode asins leikocītu skaita skaitīšanai skaitīšanas kamerā;
Metodes leikocītu skaita skaitīšanai asinīs
Vienotas 2 metodes leikocītu skaita noteikšanai asinīs:
- skaitīšanas kamerā;
- izmantojot hematoloģiskos analizatorus.
Princips Leukocīti tiek skaitīti mikroskopā noteiktā tilpumā skaitīšanas kamerā ar pastāvīgu asins atšķaidīšanu pēc sarkano asins šūnu iznīcināšanas.
Reaģents: 3-5% etiķskābes šķīdums, tonēts ar metilēnzila ūdens šķīdumu, lai traipinātu leikocītu kodolu un atvieglotu to skaitīšanu. Šķīdums ir zilā krāsā, stabils uzglabāšanā.
Speciālā tehnika: mikroskops, skaitīšanas kamera Goryaeva.
Noteikšanas gaita. Izmantojot mērīšanas pipeti vai automātisko dozatoru, aglutinācijas mēģenē ielej tieši 0,4 ml etiķskābes šķīduma un tam pievieno 0,02 ml (Sali kapilāru). Kapilāru vairākas reizes nomazgājiet ar skābes šķīdumu un sajauciet caurules saturu. Tas izraisa asins atšķaidīšanu 20 reizes. Atstājiet līdz skaitīšanai, bet ne vairāk kā 2-4 stundas pēc asins paraugu ņemšanas. Goryaev kamera ir sagatavota darbam, noslaukot vāka stiklu, lai parādītos varavīksnes gredzeni. Vēlreiz rūpīgi sakrata caurules saturu un piepildiet Goryaev kameru ar šo maisījumu, izmantojot Pasteur pipeti vai stikla stienīti ar izkausētu galu. Aizpildīto skaitīšanas kameru atstāj 1 minūtes horizontālā stāvoklī, lai izdalītu leukocītus. Leukocīti tiek skaitīti 100 lielos skaitīšanas kameras kvadrātos, kas nav grafiski, apstākļos, kad kondensators ir nolaists, okulārs 10x vai 15x, objektīvs 8x. Skaitīšana sākas Goryaev kameras režģa augšējā kreisajā stūrī. Aprēķinot leikocītus, tos vada noteikums: visas kvadrāta iekšpusē esošās šūnas un demarkācijas līnijas tiek uzskaitītas, ja tās pārsvarā iet laukumā. Šūnas, kas krustojas ar dalāmo līniju tieši uz pusi, tiek skaitītas tikai divās kvadrāta pusēs (piemēram, kreisajā un augšējā daļā).
Aprēķins Aprēķinot leikocītu skaitu 1 μl asinīs, izmantojiet formulu:
- leikocītu skaits 1mkl asinīs;
a - leikocītu skaits, kas aprēķināts 100 lielos laukumos;
4000 - tilpuma konversijas koeficients līdz 1 µl, pamatojoties uz mazā kvadrāta tilpumu, kas ir µl;
1600 - skaitīto mazo kvadrātu skaits;
20 - asins atšķaidīšana.
Lai pārvērstu leikocītu skaitu SI vienībās (1 l asinīs), iegūto skaitli reizina ar 10 6.
Praktiski, lai noteiktu leikocītu saturu 1 l asinīs, leikocītu skaits, kas aprēķināts 100 lielajos skaitīšanas kameras laukumos, tiek reizināts ar 50, dalīts ar 1000 (tas ir, pārvietots uz komatu ar 3 zīmēm pa kreisi) un reizināts ar 10 9.
Leukocītu skaitīšanas metodes Goryaev kamerā, indikatoru normas un novirzes
Goryaev kamera ir ierīce šūnu un daļiņu skaita noteikšanai noteiktā tilpuma šķidrumā (asinīs, urīnā), kas sastāv no īpaša bieza priekšmeta un pārklājuma stikla.
Stikla priekšmetstikliņa vidū ir iebūvēta zona, uz kuras tiek izmantots 225 lielu kvadrātu režģis. No šiem laukumiem 25 ir vienmērīgi sadalīti 16 mazākos laukumos. Šī tīkla apjoma dēļ aprēķini tiek veikti precīzāk nekā citās rokas skaitīšanas ierīcēs.
Kameras pakalpojums
Pēc instrumenta lietošanas slaidu dezinficē, iegremdējot 4% formalīna šķīdumā vienu stundu vai 70% etanola šķīdumā uz pusstundu. Pēc tam kamera tiek rūpīgi nomazgāta ar destilētu ūdeni. Šķidruma pārpalikums tiek izņemts ar mīkstu drānu. Ir vērts pievērst uzmanību tam, ka kameru nevar noslaucīt ar kokvilnas tamponu, kas saistīts ar šķiedrām. Stikla uzglabāšana sausā vietā.
Kameras izmantošanas laikā tiek aprēķināti PE, kas atrodas režģa laukumā un tā perimetra augšējā un kreisajā līnijā. Šajā gadījumā daļiņas, kas šīs šūnas aprēķināšanas laikā pieskaras perimetra labajām un apakšējām līnijām, nav iekļautas.
Leukocītu noteikšana asinīs
Leukocītu skaitīšanas metode
Leukocītu skaita aprēķins sākas ar asins atšķaidīšanu 3-5% etānskābes šķīdumā ar metilzilu 20 reizes. Darba materiāls pirms lietošanas noslaukiet sausu ar marli.
Pirms Newton krāsainu gredzenu izskatu ir jāmazgā vāka stikls. Pēc tam kamera tiek piepildīta ar atšķaidītu asins daudzumu, bet pirmie divi pilieni tiek izvadīti uz filtrpapīra. Šķidrums iekļūst kamerā ūdens kapilāro īpašību dēļ. Ir svarīgi nodrošināt, lai iepildīšanas laikā urbumos nekas neplūst. Ja tas notiek, šķidrumu viegli noņem ar filtrpapīru. Tad atstājiet režģi vienu minūti, gaidot, lai FE apturētu kustību.
Balto asins šūnu skaits tiek veikts simt lielu kvadrātu ar zemu palielinājumu, tas ir, ar okulāru 10x un mērķi 8x, saskaņā ar Egorova likumu. Rezultātā iegūtais skaitlis tiek izmantots formulā.
X = (n × 250 × 20) / 100 vai X = n × 50
X - leikocītu skaits.
n ir skaitlis, kas iegūts, skaitot kamerā.
Tiek noteikts leikocītu skaits, ņemot vērā režģa lielo kvadrātu skaitu - 100 un asins atšķaidījumu - 20.
Kā ir leikocītu skaits
Leukocītu līmenis un anomālijas
Leukocītu līmenis cilvēkiem ir 4,0 - 9,0 × 10⁹ / l. Vai arī citādi aptuveni 6000 balto asins šūnu atrodas 1 kubikmetrā asinīs.
Ārējās fizioloģiskie faktori var ietekmēt novirzes no normas:
- pārtikas uzņemšana pirms asins nodošanas;
- stress;
- grūtniecība vai menstruācijas sievietēm;
- hipotermija vai pārkaršana;
- liela fiziska slodze pirms testēšanas.
Ja balto asinsķermenīšu skaits pārsniedz 9,0 × 10 l / l (leikocīti ir paaugstināti), šo stāvokli sauc par leikocitozi. Līdzīgu attēlu var redzēt ar ļaundabīgām asins slimībām, infekcijām, radiācijas bojājumiem un saindēšanos.
Narkotikas var arī palielināt leikocītu skaitu. Audu nekroze, smaga asiņošana, ieskaitot operācijas, nieru koma, sirds slimības - tas viss var novest pie leikocitozes.
Leukocītu skaita samazināšanos zem 3,9 × 10 / l sauc par leikopēniju. Tomēr dažiem cilvēkiem fiksēts leikocītu skaits ir 3,5 × 10⁹ / l. Tiek uzskatīts, ka šādi cilvēki šajās šūnās saglabā rezervi 50 reizes vairāk nekā asinīs. Pēc ilgstošiem muskuļu darbiem infekcijas un vīrusu (vēdertīfs, gripa un masalas) rezultātā ir arī funkcionāla leikopēnija pēc pretsāpju, sulfonamīdu un citu zāļu ievadīšanas.
Leukocītu formula
Visu veidu leikocīti veido leikocītu formulu. Par to jūs varat noteikt noteiktas patoloģijas. Formulas normas atšķiras no personas dzīves vecuma un perioda. Pāreja ir skaidri redzama sievietēm grūtniecības laikā vai pēc dzemdībām.
Lai aprēķinātu šo šūnu tipu attiecību, tiek izmantotas dažādas metodes, taču tās visas ir saistītas ar to, ka smagākas šūnas (piemēram, basofīli) atrodas tuvāk uztriepes malai, un limfocīti, tāpat kā gaismas šūnas, paliek vidū.
- Filipčenko metode. Šajā metodē aprēķins tiek veikts pa robežu šķērsvirziena taisni no viena gala uz otru. Insults ir garīgi sadalīts trīs daļās.
- Schilling metode. Leukocīti tiek uzskaitīti četrās smērēšanas vietās.
Iegūtie dati tiek ierakstīti tabulā. Individuāli katra veida balto asins šūnu skaitu aprēķina pēc formulām. Atzīmēti tie elementi, kas tika skatīti. Rezultāts tiek saglabāts līdz brīdim, kamēr visu skaitīto šūnu summa ir 100.
Metodes leikocītu skaitīšanai urīnā
Urīnā tiek aprēķināts leikocītu skaits šūnā Goryaeva Nechiporenko. Šī analīze ir nepieciešama, lai uzraudzītu nieru slimību. Periodiskā urīna pārbaude palīdz kontrolēt ārstēšanas pareizību un noteiktās terapijas efektivitāti.
Urīna savākšana
Pētījumā ir tikai pirmais rīta urīns urinēšanas vidū. Pacientam ir svarīgi ievērot šo biomateriālu savākšanas pamatnoteikumus. Nav nepieciešama īpaša papildu apmācība pētījumam.
Aprēķina metode
10 ml svaigi savākta urīna centrifugē trīs minūtes ar 2,5 tūkstošiem apgriezienu minūtē. Pirms tam ir nepieciešams nodrošināt, ka urīnam, lai izvairītos no daļējas šūnu sabrukšanas, ir vāji skāba reakcija.
Izmantojot pipeti ar šauru, novilktu galu, noņemiet augšējo slāni. Atkarībā no nogulšņu daudzuma in vitro atstāj 0,5 ml urīna līdz 1 ml.
Nokrišņus sajauc ar supernatantu. Iegūto šķīdumu izmanto, lai aizpildītu Goryaev skaitīšanas kameru pēc līdzīga principa, ko izmanto, aprēķinot asins PV. Kamera tiek atstāta tikai 3 - 5 minūtes.
Baltās asins šūnas jāaprēķina lielos laukumos visā tīklā ar 7x okulāru un 40x objektīvu.
Iegūto skaitli izmanto šādā formā:
X = (a / 0,9) × (1000 / V)
X - leikocītu skaits 1 ml urīna.
a - aprēķinātais daudzums, kas dalīts ar kameras tilpumu 1 μl urīna nogulsnēs.
v - pētījuma urīna daudzums.
1000 - sedimentu daudzums.
Tas ir svarīgi! Leukocītu norma: 1 ml urīna ne vairāk kā 2 × 10³ balto asinsķermenīšu.
Leukocītu skaits asinīs
Laboratorijas darbinieki, lai atklātu leikocītu skaitu asinīs, bieži izmanto Goryaev kameru. Leukocītu skaitīšana Goryaev kamerā ir mazāk precīza metode nekā leikocītu noteikšana, izmantojot elektroniskās ierīces. Kļūdas lielums ir ± 7%.
Kā notiek skaitīšana
- Caurulē ielej 0,4 mililitru atšķaidīšanas šķidruma, kā arī 0,02 mililitrus kapilāru asiņu. Gatavu audzēšanu uzskata par vienādu ar 1:20.
- Kā atšķaidīšanas šķidrumu parasti izmanto 3 vai 5% etiķskābes šķīdumu. Tas ir iepriekš tonēts ar metilēnzilu, kas pēc reakcijas izlīdzina leikocītu kodolu.
- Pirms kameras uzpildīšanas Goryaev caurulīti pēc iespējas rūpīgāk sakrata. Kameras uzpildīšana ir tāda pati kā sarkano asins šūnu skaitīšanai.
Aprēķina funkcijas
Pēc leikocītu skaita, kas ir ievērojami zemāki par sarkano asins šūnu skaitu, šī iemesla dēļ aprēķins tiek veikts 100 lielos laukumos. 100 laukumos tika aprēķināts leikocītu skaits.
Ar nelielu kvadrātmetru 14 000 kubikmetru lielu tilpumu un 20-kārtīgu asins atšķaidījumu leikocītu skaits tiek aprēķināts šādi: 4000x20 un pēc tam sadalīts ar 1600. Izrādās, ka 1/2 x a.
Lai iegūtu balto asins šūnu skaitu 1 µl, aprēķinātais skaitlis jāsadala ar 2 un pievieno vēl divas nulles.
Leukocītu novirze no līmeņa norāda uz leikocitozi un leikopēniju, un tai nepieciešama tūlītēja detalizēta izmeklēšana, jo pastāv liela tuberkulozes, pneimonijas, sepse, vēdertīfas, radiācijas slimības iespējamība.