Aknas ir ķermeņa centrālā laboratorija. Tā sintezē proteīnus (albumīnu, protrombīnu, fibrinogēnu, citus asins recēšanas faktorus), lipīdus (holesterīnu), lipoproteīnus, žultsskābes, bilirubīnu, žulti. Aknās tiek izmantotas toksiskas vielas, kas rodas organismā un iekļūst organismā (antitoksiska funkcija). Aknas sintezē glikogēnu un ir saistītas ar aizkuņģa dziedzeri, regulējot ogļhidrātu rezerves organismā. Tās aktīvā loma gremošanas procesā ir tā, ka žults emulģē taukus un uzlabo to sadalīšanos pa aizkuņģa dziedzera lipāzi. Pārtikas sadalīšanas produkti (tauki, taukskābes, glicerīns, aminoskābes, ogļhidrāti, minerāli, ūdens, vitamīni) iekļūst caur vēnām caur portāliem vēnās. Tajā tie tiek daļēji noglabāti, daļēji apstrādāti, izmantoti un daļēji sagatavoti izmantošanai citos audos.
Aknu slimības izraisa viena vai otras tās funkcijas traucējumus, ko izmanto diagnostikas nolūkos. Visplašāk tiek veikti klīnisko laboratoriju pētījumi par pigmenta, ogļhidrātu, proteīnu veidojošo funkciju traucējumiem. Akūtu iekaisuma un toksisku aknu bojājumu gadījumā no aknām izdalās ievērojams daudzums intracelulāro fermentu. Aldolāzes, alanīna un aspartīnskābes transamināžu (aminoferāzes), laktāta dehidrogenāzes un tā frakciju, holīnesterāzes, argināzes un citu pētījumu pētījumi ir ieguvuši diagnostisko vērtību, bet aldolāzes un transamināžu aktivitātes rādītāji tiek izmantoti, lai diagnosticētu iekaisuma aknu slimības, intoksikāciju, kopā ar akūtu distrofiju viņas modeļos, kā arī viņas modeļiem. fosfatāze. Tās darbības rādītāji tiek izmantoti, lai diagnosticētu obstruktīvu dzelti. Asins fermentu spektra izpēte tiek izmantota dažādu aknu slimību, īpaši dzelte, diferenciāldiagnozē.
Tālāk sniegta pamatinformācija par visizplatītāko paraugu diagnostisko vērtību, kas atspoguļo aknu stāvokli normālos un patoloģiskos apstākļos. Dažu paraugu metodes vai to ieviešanas principi tiek sniegti, ja metodēm ir nepieciešams sīks apraksts. Biochemiskās metodes aknu darbības izpētei ir atrodamas šādās publikācijās: Vadlīnijas standartizētu klīnisko un laboratorisko pētījumu metožu izmantošanai.
Funkcionālie testi, kas atspoguļo aknu lomu ogļhidrātu metabolismā. Aknu slimību gadījumā cukura līmenis tukšā dūšā lielākajā daļā pacientu ir normāls - 4,44-6,11 mmol / l (80-110 mg%). Reizēm rodas hiperglikēmija, ko bieži izraisa simpātadrenālās veģetatīvās nervu sistēmas disfunkcija. Ja aknu ciroze, kad tiek traucēta glikogēna sintēze un tās rezerves ir ievērojami izsmeltas, var rasties hipoglikēmija.
Paraugi tolerances ogļhidrātiem ar glikozes slodzi tiek veikti tādā pašā veidā, kā pētot salu aparāta funkciju. Testu galvenokārt izmanto ar vienu glikozes slodzi (cukuru, fruktozi, levulozi).
Galaktozūras tests pamatojas uz to, ka galaktoze ir grūtāk nekā glikoze, pārvēršas glikogēnā vielā un aknu slimības gadījumā lielāks daudzums izdalās caur nierēm. 40 g galaktozes tiek ievadīts testā 200 ml ūdens. Tad urīnu savāc trīs atsevišķās porcijās ik pēc 2 stundām, 6 stundas 6-2,5 g galaktozes izdalās. Saskaņā ar A. I. Khazanovu (1968), hroniskā hepatīta gadījumā tests ir pozitīvs 4-12% pacientu un aknu cirozes gadījumā 47,1% pacientu.
Galaktosēmiskās līknes ir jutīgākas par galaktozūras paraugu. Tukšs kuņģis veselam cilvēkam satur 0,1–0,9 mmol / l asinīs vai 2–17 mg% galaktozes. Pēc veselas personas 40 g galaktozes slodzes 30–60 minūšu laikā novēroja strauju galaktozes līmeņa paaugstināšanos līdz 6,6 mmol / l jeb 120 mg%, un pēc tam pēc 2-3 stundām indikators tiek samazināts līdz 2,20 mmol / l, vai 40 mg%. Cilvēkiem ar aknu slimību galaktozes līmenis ir augstāks, tas ilgst ilgāk un pēc 3 stundām neatgriežas normālā stāvoklī.
Funkcionālie testi, kas atspoguļo aknu lomu lipīdu metabolismā. Aknas ir iesaistītas visos tauku vielmaiņas posmos. Normālai tauku absorbcijai zarnās ir nepieciešams žults. Tas darbojas kā mazgāšanas līdzeklis un emulgators taukiem, veicina aizkuņģa dziedzera lipāzes darbību, uzlabo tauku uzsūkšanos zarnās. Aknās fosfolipīdi tiek sintezēti lipotropo vielu klātbūtnē, kas darbojas kā lipīdu grupu (metionīna, holīna) vai fosfolipīdu sintēzes veicinoša faktora (vitamīns B).12). Ar lipotropo vielu trūkumu aknās uzkrājas neitrāli tauki un samazinās glikogēna daudzums. Kad tajā aknu slimība samazina adenozīna trifosfāta saturu, kas dod enerģiju sintētiskiem procesiem.
Holesterīna līmenis asinīs ir svarīgākais lipīdu sintēzes rādītājs aknās. Holesterīns tiek uzņemts ar ēdienu. Tās uzsūkšanās zarnās notiek ar žultsskābju līdzdalību. Tomēr uztura holesterīns nav vienīgais vai pat galvenais holesterīna avots organismā. To nepārtraukti sintezē aknās no acetilcenzīma A. Holesterīna sintēze pārsniedz tās uzņemšanu. Sintēzes un uztura holesterīna pārpalikums tiek izvadīts no organisma caur zarnām. Daļa no tā tiek pārvērsta aknās par žultsskābēm, un to izmanto arī citos orgānos (virsnieru dziedzeros, sēkliniekos) kā izejmateriālu steroīdu hormonu sintēzei. Daļa holesterīna ir aknās apvienota ar taukskābēm, lai veidotu holesterīna estrus.
Holesterīna saturu asinīs nosaka ar Ilkas metodi. Holesterīns tiek iepriekš ekstrahēts ar hloroformu. Etiķskābes anhidrīda un etiķskābes un sērskābes maisījuma klātbūtnē šķīdums dod zaļu krāsu. Holesterīna koncentrāciju nosaka, izmantojot kalorimetrisko metodi FEC. Veseliem cilvēkiem serums satur 3,0-6,5 mmol / l (116-150 mg%) holesterīna. Aknu hepatīta un cirozes gadījumā asinīs ir holesterīna pārkāpums: hiperholesterinēmija, acīmredzami saistīta ar aknu ekskrēcijas funkcijas pārkāpumu, retāk - hipoholesterolēmiju, kas saistīta ar tās sintēzes samazināšanos aknās.
Holesterīna esteri hepatītā veidojas mazākos daudzumos nekā parasti, un esteru un holesterīna attiecība samazinās līdz 0,3-0,4, nevis 0,5-0,7 veseliem.
Aknās lipoproteīnu sintēze ir arī ļoti zema un augsta blīvuma pakāpe. Mazās zarnas epitēlija šūnās veidojas hilomikroni un neliela daļa ļoti zema blīvuma lipoproteīnu. Lipoproteīnu sintēze un sadalīšanās notiek ar lipoproteīna lipāzes, kas saistīta ar heparīnu, līdzdalību. Jāatzīmē, ka aknu cirozes gadījumā heparīna saturs asinīs samazinās. Tādējādi aknas ir iesaistītas gan lipoproteīnu veidošanā, gan to iznīcināšanā. Ar aknu slimībām ir dislipoproteinēmija, galvenokārt palielināts lipoproteīnu veidošanās (hepatīts, sākotnējās aknu cirozes formas). Ir palielināts beta-lipoproteīnu līmenis asinīs.
Lipoproteīnu izpēte asinīs tiek veikta galvenokārt elektroforētiskā veidā.
Smagās aknu slimības - aknu koma, aknu ciroze - traucē intersticiālu lipoproteīnu metabolismu. Šajā gadījumā piena saturs (norma ir 0,78–1,2 mmol / l (7–14 mg%) un piruvīnskābe (norma ir 57–136 µmol / l (0,5–1,2 mg%))) palielinās asinīs..
Ja tiek konstatēta aknu koma, paaugstināts acetona līmenis asinīs.
Funkcionālie testi, kas atspoguļo aknu lomu olbaltumvielu metabolismā. Aknas transaminē aminoskābes, oksidē tās piruvīnskābē trikarboksilskābes ciklā (Krebs) un proteīnu sintēzi. Visi albumīni, 75–90% alfa globulīnu, 50% beta globulīnu tiek sintezēti aknās. Veselas aknas dienā var saražot 13-18 g albumīna. Protrombīns, proconvertīns, proaccelerin tiek sintezēts tikai aknās. Proteīnu sintēze notiek, piedaloties enerģijai. Viens no aknu sintētiskās funkcijas samazināšanās iemesliem ir mikroorganisko savienojumu satura samazināšanās tajā. Smagas aknu slimības gadījumā kopējais sūkalu olbaltumvielu daudzums var samazināties līdz. 40 g / l 80 g / l vietā. Ievērojami samazinās albumīna saturs (līdz 20 g / l, nevis 40 g / l). Patoloģiskos apstākļos aknas sintezē globulīnus ar neparastām īpašībām (paraproteīni). Ir zināms, ka šāds proteīns ir sliktāk krāsots ar biureta reaģentu, mazāk stabils sāls šķīdumā (piemēram, kalcija hlorīdā) timola klātbūtnē. Ar šīm īpašībām tika izveidoti nogulumu diagnostikas paraugi.
Kopējo seruma proteīnu nosaka ar polarimetrisko metodi vai reakciju ar biureta reaģentu. Normāls - 60-80 g / l. Olbaltumvielu frakcijas nosaka ar elektroforēzi uz papīra vai akrilamīda gēla. Saskaņā ar V. E. Predtechenska, albumīna saturs asins serumā ir 56,5–66,8%, alfarglobulīns - 3,0–5,6, alfagglobulīns - 6,9–10,5, beta-globulīns - 7,3 - 12,5 un gamma globulīni - 12,8–19,0%. Aknu slimībās samazinās albumīna saturs asinīs, kas palielina gamma globulīnu saturu. Akūtos iekaisuma procesos (hepatīts) alfa-globulīnu līmenis palielinās 1,5-2 reizes. Gammas globulīnus ražo limicocīti un retikuloendoteliālās sistēmas šūnas. Hroniskā hepatīta gadījumā ar izteiktu autoimūnu procesu gamma globulīnu saturs asinīs ievērojami palielinās (līdz 30%). A. I. Khazanovs atzīmē, ka pacientiem ar dekensirovanny aknu cirozi novēro ievērojamu beta vai gamma globulīna pieaugumu un bieži norāda uz sliktu slimības prognozi. Tas atspoguļo olbaltumvielu sintēzes aknās reorganizāciju un palielinātu paraproteīnu veidošanos.
Sedimentu paraugi balstās uz asins seruma koloidālās stabilitātes izmaiņām, mijiedarbojoties ar dažādiem elektrolītiem. Koloidālā asins sistēmas stabilitāte tiek traucēta disproteinēmijas un paraproteinēmijas rezultātā.
Sublimācijas tests (sublimācijas-nogulumu reakcija), Takat-Ara reakcija, ir tas, ka sublimācijas un nātrija karbonāta mijiedarbības laikā ar asins seruma olbaltumvielām nogulsnes, veidojot pārslas. Pašlaik reakcija tiek izmantota Grinstedta (1948) modifikācijā. 0,5 ml ne-hemolizēta seruma, kas atšķaidīts ar 1 ml fizioloģiskā šķīduma, pievieno 0,1% sublimējošu pilienu, līdz parādās noturīgs duļķainums, lasot laikraksta tekstu, tas nav iespējams caur vertikālu šķidruma slāni. Likme ir 1,6–2,2 ml 0,1% dzīvsudraba hlorīda šķīduma. Tests ir pozitīvs parenhīma aknu bojājumos, īpaši aknu cirozes, akūtas un hroniskas hepatīta, silikozes un silicotuberkulozes gadījumā.
Veltmana tests (koagulācijas tests, termoagulācijas reakcija) tika ierosināts 1930. gadā, lai diferencētu fibro-produktīvos un nekrotiskos procesus aknās. Svaigu serumu bez hemolīzes pēdām ielej 11 numurētās 0,1 ml mēģenēs. Tad 5 ml kalcija hlorīda šķīduma pievieno samazinošās koncentrācijās: 0,1, 0,09, 0,08 utt. Līdz 0,01%, cauruļu saturu viegli sakrata un ievieto verdošā ūdens vannā 15 minūtes, pēc tam rezultāts ir atzīmēts. Paraugu uzskata par pozitīvu olbaltumvielu nokrišņu gadījumā. Caurules ar pozitīvu rezultātu sauc par koagulācijas joslu. Parasti tas ir 6-7 caurules. Tās samazināšanās (nobīde pa kreisi) novērota plaušu, audzēju, miokarda infarkta iekaisuma procesos; pagarināšana (pāreja uz labo pusi) - iekaisuma procesos aknās, akūta aknu distrofija, ciroze, kā arī hemolītiska slimība, nefroze, plaušu plaušu tuberkuloze. Šobrīd Veltmann paraugs ir modificēts šādi: 0,1 ml asins seruma pievieno 4,9 ml ūdens, tad pievieno 0,1 ml 0,5% kalcija hlorīda šķīduma. Maisījumu karsē līdz viršanai, bez nogulsnēm izlej vēl 0,1 ml kalcija hlorīda šķīduma. Procedūru atkārto, līdz testa mēģenē parādās peles proteīns. Rezultātus novērtē par kopējo kalcija hlorīda daudzumu, kas iztērēts reakcijai. Parasti nepieciešams 0,4–0,5 ml kalcija hlorīda.
Timoola tests (timola duļķainības tests) Huerg un Popper modifikācijā (timola tonera tests) ir balstīts uz testa seruma duļķainuma veidošanos piesātināta timola šķīduma klātbūtnē veronālajā buferī. Nokrišņi veidojas globulīna-timolofosfatīda kompleksa parādīšanās rezultātā, samazinoties albumīna saturam asinīs, palielinoties beta un gamma globulīniem. Duļķainības pakāpe ir atkarīga no apkārtējās vides temperatūras un pH. Reakciju novērtē ar fotokalorimetrisko metodi pie 660 nm pret timol-meronālo šķīdumu. Aprēķins tiek veikts saskaņā ar kalibrēšanas līkni, kas apkopota no bārija sulfāta suspensijas. Parasti seruma duļķainība ir 0–5 vienības. M (Maklagana). Dūmu palielināšanās (pozitīvs tests) novērota epidēmijas hepatīta aknu bojājumu apstākļos (tests ir pozitīvs pirms dzelte), aknu cirozē, pēc akūta hepatīta utt.
Kad smagi aknu pārkāpumi, tiek traucēts aminoskābju deaminācijas process, kas noved pie to satura palielināšanās asinīs un urīnā. Ja veseliem cilvēkiem amonija slāpekļa saturs serumā ir 50-80 mg / l, tad ar smagiem distrofiskiem procesiem aknās tas var palielināties līdz 300 mg / l (300 mg / l atbilst 30 mg% no amonija slāpekļa pārneses attiecība, izteikta mg%; mmol / l ir 0,7139). A. I. Khazanovs norāda, ka akūta vīrusu hepatīta gadījumā palielinās glutationa, glutamīnskābes, metionīna, fenilalanīna, serīna un treonīna līmenis serumā. Ar hronisku hepatītu atklājās tādas pašas izmaiņas aminoskābju saturā asinīs, bet mazākā mērā.
Dienas laikā veselas personas urīnā izdalās 100-400 mg (vidēji 200 mg) aminoskābju. Aminoazots ir viens no tiem 1-2% no kopējā urīna slāpekļa, un aknu slimībās tas sasniedz 5-10%. Akūtās distrofijas gadījumā novēro palielinātu leucīna un tirozīna izdalīšanos ar urīnu. Parasti tirozīns tiek izvadīts 10-20 mg / l apjomā ar akūtu vīrusu hepatītu - līdz 1000 mg / l (2 g dienā). Urīnā sedimentus var atrast leucīna un tirozīna kristāliem.
Atlikušais slāpeklis un urīnviela asins serumā aknu slimībās palielinās, ja attīstās akūta hepatorenāla mazspēja vai smaga akūta aknu bojājuma rašanās (akūta hepatīta distrofija, hroniska hepatīta paasināšanās, aknu ciroze, aknu vēzis, pēc žults ceļu operācijas un citi). Veseliem cilvēkiem slāpekļa atlikums asinīs ir 14,3–28,6 mmol / l (0,20–0,40 g / l), urīnviela - 2,5–3,3 mmol / l (0,15—0,0, 20 g / l). Ar aknu slimībām atlikušā slāpekļa saturs asinīs nedaudz palielinās - līdz 35,4-64,3 mmol / l (0,50 - 0,90 g / l). Tās līmeņa pieaugums virs 71,4 mmol / l (1,0 g / l) tiek novērots ar nieru bojājumiem un ievērojami pasliktina slimības prognozi.
Atlikušais slāpeklis asinīs tiek noteikts ar vairākām metodēm - pēc asins mineralizācijas ar tiešu reakciju ar Nesslera reaģentu vai Rappoport-Eichgorn hipobromīta metodi. Urīnvielas līmeni asinīs nosaka arī ar vairākām metodēm: izteiktā metode ir balstīta uz reaktīvā papīra “Ureatest” izmantošanu, tiek izmantota urāzes metode ar fenola hipohlorīdu, urāzes metode ar Nesslera reaģentu utt.
Aknas un hemostāze ir cieši saistītas. Aknās tiek sintezēti asins koagulācijā iesaistītie proteīni. Svarīgākie no tiem ir protrombīns un fibrinogēns, un šo proteīnu sintēzes pārkāpumi ir biežāki. Jāatzīmē, ka akūtās plaušu, locītavu, aknu iekaisuma slimībās fibrinogēna saturs asinīs var ievērojami palielināties. Pacientiem ar akūtu vīrusu, toksisku, hronisku hepatītu, aknu cirozi pacientiem novēro protrombīna satura pazemināšanos asinīs. Protrombīna deficīta nozīmīgākās klīniskās pazīmes ir spontāni asiņošana zem ādas, zem gļotādu, mutes dobuma asiņošana, kuņģa.
Proteīnu, kas nodrošina asins koagulācijas procesu, sintēze notiek ar K vitamīna līdzdalību. K vitamīns ir taukos šķīstošs un iekļūst organismā kopā ar taukiem. Aknu slimībās, kas saistītas ar žults veidošanos un žults ekskrēciju organismā, rodas hipovitaminoze K.
Samazināta asins koagulācijas faktoru sintēze var būt saistīta ar aknu veidošanās funkcijas inhibēšanu. Šajā gadījumā hipoprotrombinēmija rodas ar pietiekamu ķermeņa daudzumu ar K vitamīnu. Klīnikā diagnostikas nolūkos pirms un pēc iekraušanas ar Vikasol tiek pārbaudīts protrombīna daudzums asinīs.
Liels heparīna daudzums tiek sintezēts aknās un plaušās.
Nav saprotams jautājums par hemorāģiskā diatēzes iespējamību, kas saistīta ar asins sistēmas antikoagulantu faktoru palielināšanos aknu slimībās.
Protrombīna komplekso faktoru (protrombu-jaunā indeksa) aktivitāte tiek pētīta ar Quick metodi (95–105% norma), fibrinogēna koncentrāciju asinīs pārbauda ar Rutberg metodi (norma ir 200–300 mg 100 ml plazmā). Saskaņā ar V. V. Mensikova ieteikto vienoto gravimetrisko metodi (1987), fibrinogēna līmenis asinīs ir 200–400 mg% jeb 2–4 g / l. Metode asins koagulācijas faktoru noteikšanai ir detalizēti aprakstīta Klīnisko un laboratorisko pētījumu metožu rokasgrāmatā.
Funkcionālie testi, kas atspoguļo aknu lomu pigmenta metabolismā. Tas galvenokārt ir bilirubīna noteikšana serumā, urobilīna, stercobilīna, žults pigmentu pētījums urīnā. Mēs jau minējām pētījumu par bilirubīna saturu žults. Šie rādītāji tieši vai netieši atspoguļo bilirubīna konversijas procesu aknās. Aknām ir svarīga loma dzelzs saturošu pigmentu metabolismā - hemoglobīns, mioglobīns, citohroms utt.
Hemoglobīna sadalījuma sākumposms ir metil tilta laušana un verdohemoglobīna (verdoglobīna) veidošanās, kas satur arī dzelzi un globīnu. Nākotnē Verdoglobīns zaudē dzelzi un globīnu, sāk porfirīna gredzena izvēršanu un biliverīna veidošanos, atjaunojot galveno žults pigmentu - bilirubīnu (netiešs, nesaistīts bilirubīns). Šādu bilirubīnu kombinē ar Ehrlich diazoreactive pēc ārstēšanas ar alkoholu vai kofeīnu, tas nozīmē, ka tas nodrošina netiešu krāsu reakciju. To aktīvi absorbē hepatocīti, un ar fermentu palīdzību Golgi aparātā glikuroniltransferāzes ir saistītas ar vienu (monoglukuronīdu) vai divām (diglukuronīda) glikuronskābes molekulām. Piecpadsmit procenti bilirubīna aknās caur sulfāta transferāzi ar sērskābi un veido fosfoadenozīna fosfosulfātu. Šāds bilirubīns ātri reaģē ar diazoreaktīvu un dod tiešu reakciju.
Aknu slimībās paaugstinātu bilirubīna saturu asinīs galvenokārt nosaka tas, ka hepatocīti izdalās to gan žults, gan asins kapilāros. Bilirubīns uzkrājas asinīs, dodot tiešu reakciju ar diazoreaktīvu (tiešu vai saistītu bilirubīnu). Mazāks daudzums satur arī bilirubīnu smagu aknu bojājumu gadījumā, kas rada netiešu reakciju, ko izraisa nefjugētā bilirubīna uztveršanas aktivitātes samazināšanās no asins šūnu aknām, un acīmredzot tas ir saistīts ar bilirubīna uztveršanas un absorbcijas mehānisma pārkāpumu hepatocītu čaulās.
Ja aknu, audzēja, viskozā gļotādas kopējā žults vai aknu kanāla aizsprostojums aknu žultsvados samazina lūšu rētas (piemēram, pēc žultsceļa operācijas), palielina žults spiedienu. Tā iekļūst asinīs un limfātiskās kapilāros. Asinis uzkrājas galvenokārt bilirubīna, kas dod tiešu reakciju ar diazoreactīvu (subhepatisku vai mehānisku, dzelti).
Eritrocītu hemolīzi papildina liels daudzums hemoglobīna, daļa no tā izdalās caur nierēm, dažas no tām ir retikuloendoteliālās sistēmas šūnas un pārvēršas verdoglobīnā un bilirubīnā. Daļa no šāda bilirubīna ir konjugēta ar glikoronskābi aknās un izdalās ar palielinātu daudzumu žults zarnās. Tomēr ievērojams bilirubīna daudzums, kas dod netiešu reakciju, saglabājas asinīs. Šādu dzelte sauc par hemolītisku vai supraheimatisku.
Ar obstruktīvu dzelti, ļoti maz žults (bilirubīns) iekļūst zarnās vai tas vispār neietilpst. Fekāliju krāsa ir atkarīga no bilirubīna - stercobilīna konversijas produktiem, kas veidojas zarnās no stercobilinogēna - bilirubīna konversijas starpprodukta. Ja žults pigmenti nenonāk zarnās, izkārnījumi kļūst gaiši, balti, acholichny. Šādos gadījumos reakcija uz stercobilīnu un urobilīnu ir negatīva.
Parenhīma dzelte, žults pigmenti iekļūst zarnās mazākā daudzumā nekā parasti, jo bilirubīna saturs žults samazinās un žults daudzums ir mazs. Tomēr bilirubīns, kas iekļūst zarnās, ir pietiekams, lai izkārnījumus krāsotu gaiši brūnā krāsā. Daļa stercobilin uzsūcas un izdalās caur nierēm, vispirms urobilinogēna un pēc tam urobilīna veidā. Ja konjugētā (tiešā) bilirubīna koncentrācija asinīs ir pārmērīga, daļa no tās nonāk urīnā, kur to var noteikt ar kolofoniju (ar joda alkohola šķīdumu) vai paraugu ar bārija sāļu nogulsnēšanos.
Ar hemolītisko dzelti žults, bilirubīna līmenis palielinās. Sterobilīns un urobilīns veidojas arī pārmērīgā daudzumā - ekskrementi un urīns ir intensīvi krāsoti. Un asinīs nesaistītā bilirubīna saturs palielinās, tas slikti šķīst ūdenī, neietekmē caur nieru barjeru audos. Tādēļ urīnā nav bilirubīna.
Bilirubīna līmeni serumā nosaka pēc Endrašík, Cleghorn un Grof metodes. Šī metode ir balstīta uz diazofenilsulfonskābes (kas veidojas ar sulfanilskābes mijiedarbību ar nātrija nitrītu) kombināciju ar bilirubīna līmeni serumā, kā rezultātā veidojas rozā violets krāsojums. Viņa spriests par bilirubīna koncentrāciju, nonākot tiešā reakcijā. Kad kofeīna reaģents tiek pievienots serumam, nekonjugētā (netiešā) bilirubīna nonāk šķīstošā disociētā stāvoklī un dod rozā-violetu krāsošanas šķīdumu diazoreaktīvajam maisījumam. Tehnoloģija ir aprakstīta V.G. Kolba, V.Samšņikova referāta grāmatā; Rokasgrāmata ed. A. A. Pokrovskis; metodiskie norādījumi ed. V. V. Mensikovs un citi.
Noteiktu enzīmu vērtība aknu slimību diagnostikā. Aknu fermenti, tāpat kā citi orgāni, ir sadalīti orgānu specifikā un nav specifiski. Aknām specifiskie orgāni ir ornitīna karbamila transferāze, glutamāta dehidrogenāze, fosfofruktaldolāze, histidāze, sorbīta dehidrogenāze. Turklāt piekto izoenzīmu laktāta dehidrogenāzi uzskata par specifisku.
Aknu šūnas ir bagātas ar fermentiem. Kaitējums hepatocītiem izraisa ievērojamu daudzumu intracelulāro fermentu un to uzkrāšanos asinīs. Šajā sakarā citu orgānu un audu šūnās atrastie transamināzes, aldolāzes un fermenti ir ieguvuši diagnostisko vērtību. Novērtējiet to aktivitāti asinīs, salīdzinot ar slimības klīniskajām pazīmēm.
Aldolāzes - ogļhidrātu aerobās sadalīšanas mehānismos iesaistīto fermentu grupas nosaukums. Seruma aldolāze katalizē fruktozes-1,6-difosfāta atgriezenisko sadalīšanos divos fosfo-triozes-fosfogliceraldehīda un dioksiacetona monofosfātos. Aldolāzes aktivitāte serumā ir paaugstināta akūtas epidēmijas hepatīta un, mazākā mērā, akūta toksiska hepatīta gadījumā. Akūtā vīrusu hepatīta gadījumā 90% pacientu novēro fruktozes difosfāta aldolāzes aktivitāti 5–20 reizes. Tās palielināšanās notiek 3-15 dienas pirms citu slimības klīnisko pazīmju parādīšanās. Pēc 5 dienām no dzelte perioda sākuma aldolāzes aktivitāte samazinās. Aldolāzes aktivitātes palielināšanās ir vērojama arī akūtu hepatīta anicterisko formu gadījumā. Pacientiem ar hroniskiem iekaisuma procesiem aknās aldolāzes aktivitāte nedaudz palielinās un nelielā skaitā no tiem.
Aldolāzes aktivitātes pētījums serumā tiek veikts saskaņā ar V.I. Tovarnitsky, E.N. Voluyskaya metodi. Veseliem cilvēkiem šī fermenta aktivitāte nepārsniedz 3-8 vienības.
Aminotransferāzes (transamināzes) bieži lieto, lai diagnosticētu iekaisuma aknu slimības. Aminotransferāzes cilvēka organismā veic transaminācijas procesus (aminoskābju amino grupu reversā pārnešana uz keto skābēm). Pētījums par aspartāta aminotransferāzes (AST) un alanīna aminotransferāzes (ALT) aktivitāti ir ļoti svarīgs. Šie fermenti ir plaši izplatīti dažādos orgānos un audos - aknās, miokardā, skeleta muskuļos, nierēs utt. Aminotransferāžu aktivitātes palielināšanās iegūst diagnostisko vērtību salīdzinājumā ar slimības klīniskajām pazīmēm.
Pētījums tiek veikts saskaņā ar Reitmana un Fraenkela metodi. AST standarts ir 0,1–0,45 mmol / (h • l) (8–40 vienības), AlT ir 0,1–0,68 mmol / (h • l) (5–30 vienības).. Pašlaik substrāta daudzums molos, ko katalizē 1 l testa šķidruma 1 stundu inkubācijas stundā 37 ° C temperatūrā (mmol / (h • l)), tiek izmantots kā fermentu aktivitātes vienība. - D / 88 attiecībā uz AlT-D2 / 88, kur D ir fermenta aktivitātes indikators, kas izteikts vecajā dimensijā (vienībās), 88 ir konversijas koeficients, kas skaitliski ir vienāds ar piruvīnskābes molekulmasu.
Epidēmiskā hepatīta gadījumā aminotransferāžu aktivitāte palielinās ar lielu konsistenci un agrīnā stadijā, pat pirms dzelte. Ar toksisku hepatītu un hroniskas aminotransferāžu aktivitātes pastiprināšanās palielinās par 3-5 reizes. Aknu cirozes izmaiņas nav tik regulāras.
Laktāta dehidrogenāze (LDH) ir glikolītisks enzīms, kas atgriezeniski katalizē 1-laktāta oksidēšanos uz piruvīnskābi. LDH gadījumā nikotīnamīda dinukleotīds ir nepieciešams kā ūdeņraža akceptors. Serumā konstatēja piecus LDH izoenzīmus. LDH, konstatēts miokardā, LDH5 - aknās. Urīnviela inhibē fermenta piekto daļu, un šī fermenta īpašība atvieglo tā noteikšanu.
Seruma LDH nosaka Sevel un Tovarek metode. Kopējās seruma LDH aktivitātes normālās vērtības ir 0,8–4,0 mmol piruvīnskābes uz vienu litru seruma uz 1 stundu inkubācijas 37 ° C temperatūrā. Urea-LDH veido 54-75% no kopējā LDH.
To izmanto arī klīniskajās laboratorijās LDH noteikšanai ar asins seruma elektroforēzes metodi poliakrilamīda gēlā. LDH noteikšanas metodi var atrast V.G. Kolba, V.S. Kamyshnikova atsauces grāmatā. Vīrusu hepatīta gadījumā LDH4 un LDH5 aktivitāte visiem pacientiem palielinās pirmajās 10 dienās, tā pieauguma pakāpe ir atkarīga no slimības smaguma pakāpes.
Kolīnesterāzes atrodas eritrocītos (acetilkolinesterāzi) un serumā (acilhidrolāzes acilholīns). Abi fermenti sašķeļ holīna esterus uz holīnu un atbilstošajām skābēm un atšķiras pēc to specifiskuma. Acetilholīnesterāze hidrolizē tikai acetilholīnu (iepriekš sauc par īsto holīnesterāzi). Seruma holīnesterāze spēj sadalīties kopā ar acetilholīnu un butirilholīnu (un 2 reizes ātrāk nekā acetilholīns). Tāpēc tas ir pazīstams arī kā butirilholīnesterāze vai viltus seruma holīnesterāze. To sintezē aknās, tā aktivitāte tiek izmantota kā aknu funkcionālās spējas pazīme.
Seruma holīnesterāzes aktivitāti nosaka acetilholīna hlorīda hidrolīzes pakāpe ar etiķskābi un holīnu. Atbrīvoto etiķskābes daudzumu nosaka buferšķīduma krāsas izmaiņas skābuma rādītāja klātbūtnē uz FEC. Standarts ir 160–340 mmol / (h • l). Aknu slimību (hepatīts, ciroze) gadījumā seruma holīnesterāzes sintēze samazinās. Pacientiem ar obstruktīvu dzelti pazeminās holīnesterāzes aktivitāte tikai tad, ja parādās smagas aknu bojājumu pazīmes. Hipoproteinēmijā, kachexijā, saindēšanā ar organofosfātu indēm, muskuļu relaksantiem novērota tās aktivitātes samazināšanās. Dažos gadījumos (hipertensija, dzemdes fibroīdi, peptiska čūla uc) novēro holīnesterāzes aktivitātes palielināšanos.
Gamma-glutamiltranspeptidāze (G-GTP) izjauc hromogēno substrātu gamma-glutamil-4-nitronilīdu un atvieglo gamma-glutamila atlikuma pārnešanu uz akceptora dipeptīda glicilglicīnu. Atbrīvots 4-nitroanilīns tiek noteikts ar fotokalorimetrisko metodi pie 410 nm pēc fermentatīvās reakcijas pārtraukšanas ar etiķskābi.
GGTG ir atrodams visos cilvēka orgānos un audos. Šī enzīma aktivitāte nierēs, aknās, aizkuņģa dziedzeris, liesā, smadzenēs ir visaugstākā (aptuveni 220 mmol / h • l), citos orgānos (sirds, skeleta muskuļos, plaušās, zarnās) - daudz zemāka (0,1 - 18 mmol / l Lielākā G-GTP aktivitāte novērota žults un urīnā, tā aktivitāte serumā ir 4-6 reizes mazāka nekā urīnā, bet sarkanās asinsķermenēs šis enzīms nav sastopams G-GTP aktivitāte veseliem vīriešiem ir 0,9–6,3 mmol / (h • l), sievietēm - 0,6–3,96 mmol / (h • l), G-GTP aktivitāte palielinās aknu cirozes gadījumā 90% pacientu ar t Valsts, in hroniska hepatīta - 75% hroniskā cholangiohepatitis -. Gandrīz visiem pacientiem fermenta aktivizēts etanols noteikšana T-GTF ir jutīgs tests diagnostikā alkohola-toksisks aknu slimībām..
Sārmains fosfatāze ir viena no hidrolāzēm, kas fermentē organiskos savienojumus, fosforskābes esteri un likvidē tās atliekas. Tas ir aktīvs vidē ar pH 8,6–10,1, un tas ir spēcīgi aktivizēts magnija jonu ietekmē. Sārmainā fosfatāze ir atrodama visos cilvēka audos un orgānos. Īpaši daudz kaulaudu, aknu parenhīmas, nieru, prostatas dziedzeru, citu dziedzeru, zarnu gļotādas. Sārmainās fosfatāzes saturs bērniem ir 1,5-3 reizes lielāks nekā pieaugušajiem.
Agara gēla elektroforēze tika izmantota piecu sārmainu fosfatāzes izoenzīmu izolēšanai. Pirmais no tiem tiek uzskatīts par specifisku aknām, otrais - kaulu audiem, piektais - žultsceļiem. Enzīmu izdalās no aknām ar žulti.
Sārmainās fosfatāzes aktivitāte tiek konstatēta, izmantojot nātrija beta-glicerofosfātu, kas tiek hidrolizēts, atbrīvojoties no neorganiskā fosfora. Pēdējais ir fermentu aktivitātes kritērijs. Enzīmu nosaka serumā saskaņā ar Bodanska metodi. Parasti sārmainās fosfatāzes aktivitāte ir 0,5-1,3 mmol neorganiskā fosfora uz 1 litru seruma 1 stundu inkubējot 37 ° C temperatūrā.
Sārmainās fosfatāzes aktivitātes palielināšanās notiek galvenokārt divās valstīs: kaulu slimības ar osteoblastu proliferāciju un slimībām, kas saistītas ar holestāzi. Pastiprināta sārmainās fosfatāzes aktivitāte novērojama šādās kaulu slimībās: hiperparatireoze (Recklinghausen slimība), kaulu sarkoma, deformējoša osteoze vai šķiedrveida osteodistrofija (Pageta slimība) un citas osteoporozes formas. akmens, audzējs, limfmezgli žultsceļa vēzī, kuņģī, pacientiem ar aknu un žults ceļu iekaisuma slimībām, aizkuņģa dziedzeris, limfogranulomatoze uc Viņš nomira nepārtraukti pieaug sārmainās fosfatāzes aktivitātes novēroti audzēji aknās, hroniska hepatīta un cirozes, akūta hepatīta, dzeltes gan bez un ar dzelti. Enzīmu aktivitāte palielinās, ja iestājas dzelte mehāniskā sastāvdaļa (holangīts, kopējā aknu kanāla saspiešana ar reģionālajiem limfmezgliem, reģenerējošo aknu mezgli tās vārtu rajonā). Līdz ar to sārmainās fosfatāzes aktivitātes palielināšanās pacientu ar dzelti asinīs norāda uz tā mehānisko raksturu.
Aknu darbības tests
Ar aknu sakāvi ne visas tās funkcijas tiek traucētas, ne vienlaicīgi un ne vienādi. Turklāt aknām ir ievērojamas rezerves iespējas: pietiekami, lai saglabātu 20% no funkcionējošās aknu parenhīmas, lai saglabātu organisma darbību. Aknu reģeneratīvā spēja ir tikpat liela. Tāpēc zināms aknu funkcionalitātes samazinājums neietekmē pacienta stāvokli, jo aknas pat šajos apstākļos nodrošina nepieciešamo vitāli svarīgo procesu līmeni.
Lielākā daļa funkcionālo pārbaužu (ne tikai aknu, bet arī citu orgānu) būtība ir tāda, ka testa orgāns ir tik ļoti pieprasīts, lai slimais orgāns nevarētu ar tām tikt galā (slodzes metode). Starp paraugiem, ar kuriem pārbauda aknu funkcijas, daži atspoguļo šīs orgāna specifisko aktivitāti, piemēram, pigmenta, neitralizējošās, proteīnu veidojošās funkcijas; citi paraugi tikai daļēji atklāj aknu funkciju, jo tās dalība šāda veida vielmaiņā nav izolēta, bet ir saistīta ar citu orgānu lomu. Tie ietver, piemēram, ogļhidrātu, ūdens, tauku vielmaiņas paraugus.
Att. 117. Bilirubīna izolācijas shēma normā (/) un dažāda veida dzelte: hemolītisks (2), parenhīms (J) un mehānisks <4).
Pigmentu vielmaiņas izpēte Pigmenta metabolisma atspoguļojums aknās ir bilirubīna saturs asinīs (kā arī ekskrementos un urīnā) un tā reģenerācijas produkti. Pigmentu vielmaiņas traucējumu identificēšana dod priekšstatu par hepatocītu funkcionālo stāvokli, kā arī palīdz atšķirt dažāda veida dzelte.
Bilirubīna veidošanās notiek kaulu smadzeņu retikuloendoteliālajās šūnās, limfmezglos, bet galvenokārt liesā, kā arī aknu stellāta retikuloendoteliālajās šūnās (117. att.). Bilirubīns veidojas no hemoglobīna, kas izdalās sarkano asins šūnu fizioloģiskās sadalīšanās laikā; tajā pašā laikā hemoglobīns sadalās globīna un dzelzs saturošā hemīna proteīna korpusā. Retikuloendoteliālās sistēmas šūnās brīvais bilirubīns veidojas no atbrīvotās hēmas, kas cirkulē asinīs nestabilās attiecībās ar albumīna proteīnu. Brīvā bilirubīna saturs asinīs ir 8,55-20,52 μmol / l (0,5-1,2 mg%). Lielākā daļa tās nonāk aknās, kur tā tiek atbrīvota no asociācijas ar albumīnu, un, piedaloties aknu enzīmiem, apvienojas ar glikuronskābi, veidojot ūdenī šķīstošu savienojumu, bily-rubinglukuronīdu (mono- un diglukuronīdu vai saistīto bilirubīnu), kas izdalās žults traktā.
Līdz ar to aknas ir iesaistītas bilirubīna apmaiņā, veicot šādas funkcijas: 1) bilirubīna veidošanos stellāta retikuloendoteliālās šūnās; 2) brīvā bilirubīna slazdošana no asinīm; 3) bilirubīna savienojuma veidošana ar glikuronskābi; 4) glikuronīda sekrēcijas bilirubēšana žulti (saistošs bilirubīns).
XX gadsimta sākumā. Van den Berg pamanīja atšķirīgu pacientu, kam ir dzelte, sajaukšanos ar sulfodiazoreaktu un ar dažādu etioloģiju dzelte. Kamēr pacienta ar obstruktīvu dzelti serums pēc diazoreaktīvās vielas pievienošanas uzreiz kļuva sarkans, šī pacienta ar hemolītisko dzelti seruma krāsas izmaiņas notika tikai pēc tam, kad tam pievienoja alkoholu. Pirmajā gadījumā reakcija tika saukta par tiešu, otrā - netieša. Izrādījās, ka netieša reakcija tiek veikta, izmantojot brīvo bilirubīnu, un tieša reakcija, izmantojot bilirubējošo glikuronīdu (konjugētu, t.i., saistītu bilirubīnu). Atkarībā no viena vai divu glikuronskābes molekulu pievienošanas bilirubīna molekulai veidojas mono- vai diglukuronīda bilirubīns.
Veselu cilvēku asinīs ir tikai brīvs pigments. Slimībās, kas saistītas ar žults saistītā bilirubīna normālas izvadīšanas pārkāpumu vai izkropļojumu, tā nonāk asinsritē, un pēc tam abos pigmentos cirkulē tās (tās var noteikt atsevišķi).
Kvalitatīvs Van den Berg paraugs sniedz indikatīvu informāciju: ja izrādās netiešs, mēs varam pieņemt, ka asinīs ir tikai brīvais bilirubīns; ja izrādās tiešs, tad nav zināms, kādā proporcijā abi pigmenti ir - pozitīva tieša reakcija maskē jebkura brīvā bilirubīna daudzuma klātbūtni. Pašlaik tie galvenokārt izmanto bilirubīna frakciju atsevišķu kvantitatīvu noteikšanu. Lielākajā daļā šajā nolūkā veikto pētījumu izmanto tādus pašus diazo reaģentus kā kvalitatīvajam paraugam (diazo reaģents I: 5 g sulfanilskābes un 15 ml stipras sālsskābes izšķīdina destilētā ūdenī un tilpumu noregulē līdz 1 l ar destilētu ūdeni; diazoreact II: 0,5% nātrija nitrīta šķīdums, diazo maisījums: 10 ml diazoreaktīva I + 0,25 ml diazoreaktīvā II).
Kvalitatīvais tests: 0,5 ml seruma ielej 0,25 ml diazo maisījuma. Ja seruma apsārtums ir mazāks par 1 minūti, reakcija tiek uzskatīta par tiešu ātru un norāda uz saistīto bilirubīna koncentrāciju serumā. Ja apsārtums parādās lēni (1–10 minūšu laikā), kas rodas tad, kad brīvajam ir pievienots salīdzinoši neliels saistītā bilirubīna daudzums, reakcija tiek uzskatīta par tiešu aizkavēšanos. Ja apsārtums nav ilgāks par 10 minūtēm, tiešo reakciju uzskata par negatīvu. Ja vēlaties pārliecināties, ka šāda seruma dzeltenā krāsa ir atkarīga no bilirubīna, tam pievieno dubultu spirta daudzumu, filtrē un filtrātam pievieno diazo maisījumu, kā rezultātā šķidrums kļūst sārts (netieša reakcija). Bilirubīna frakciju kvantitatīvai noteikšanai ir daudzas metodes. Daži no tiem ir balstīti uz faktu, ka brīvo bilirubīnu ietekmē tādas vielas kā kofeīns, ko izmanto visbiežāk lietotajā Endrashik metodē, metilspirts uc, kas darbojas kā katalizators, paātrinātājs, iegūst spēju reaģēt ar diazoreactu. Pirmajā seruma daļā, ko apstrādā ar akseleratoru, ir iespējams noteikt abu frakciju kopējo saturu. Citā porcijā, nepievienojot paātrinātāju, nosaka tikai saistīto pigmentu. Atņemot saistīto frakciju no kopējā bilirubīna daudzuma, viņi atpazīs brīvo frakciju. Citas metodes bilirubīna frakciju (ķīmiskās, hromatogrāfiskās) atsevišķai noteikšanai ir sarežģītākas.
Brīvais bilirubīns, kas nešķīst ūdenī, netiek izvadīts caur nierēm; pēc saistīšanās ar glikuronskābi tas kļūst ūdenī šķīstošs, kad tas uzkrājas asinīs - ar subhepatisku un aknu dzelti, tas tiek konstatēts urīnā. Žultsceļos izdalās tikai saistīts bilirubīns (bilirubinglukuronīds). Lielos žultsvados un žultspūšļa (īpaši iekaisuma procesos tajos) un zarnās tālāk nelielā bilirubīna daļa tiek atjaunota urobilinogēnā vielā, kas resorbējas augšējā tievajās zarnās un iekļūst aknās ar portāla vēnas asinīm. Veselas aknas to pilnībā nozvejotas un oksidējas, bet slimais orgāns nespēj veikt šo funkciju, urobilinogēns nokļūst asinīs un izdalās urīnā kā urobilīns. Urobilinūrija ir ļoti smalka un agrīna funkcionālās aknu mazspējas pazīme. Pārējais, lielākā daļa bilirubīna zarnās tiek atjaunota līdz stercobilinogēnam. Lielākā daļa no tā izdalās ekskrementos, pārvēršoties taisnajā zarnā un no tā (gaismā un gaisā) stercobilin, dodot fekālijām normālu krāsu. Neliela daļa no sterkobilinogēna, kas absorbēta resnās zarnas apakšējās daļās caur hemorrhoidālo vēnu, apejot aknas, nonāk vispārējā asinsritē un izdalās caur nierēm. Parastais urīns vienmēr satur stercobilinogēna pēdas, kas gaismas un gaisa iedarbībā pārvēršas par sterkobilīnu.
Lielākā daļa reakciju, kas atklāj bilirubīna samazināšanas produktus urīnā, dod līdzīgus rezultātus gan urobilīnam, gan stercobilīnam, lai gan šīs divas vielas atšķiras gan ar ķīmisko struktūru, gan fizikālajām īpašībām. To atdalīšanas metodes ir samērā sarežģītas. Tādēļ laboratorijas praksē tās tiek atvērtas un apzīmētas kā urobilinoīdi (urobilīna ķermeņi).
Urobilīna ķermeņa saturs urīnā palielinās ne tikai tad, kad aknu funkcija ir nepietiekama, bet arī palielinās hemolīze. Šādos gadījumos nozīmīga hemoglobīna daudzuma izdalīšanās dēļ veidojas vairāk bilirubīna un izdalās zarnās. Palielināta sterko-bilīna ražošana izraisa pastiprinātu izdalīšanos ar urīnu. Obstruktīvas dzelte gadījumā, kad žults vispār neietekmē zarnu, ekskrementos nav sterkobilīna, urīnā nav urobilīna. Kad hepatocelulārais dzelte samazina bilirubīna izdalīšanos žulti un samazinās stercobilīna daudzums izkārnījumos, un urobīno organismu skaits urīnā palielinās. To attiecība, kas sasniedz 10: 1–20: 1, ir ievērojami samazināta, sasniedzot 1: 1 smagiem aknu bojājumiem, hemolītiskajās dzelte, sterkobilīna ekskrementu palielināšanās ievērojami pārsniedz urīnizvadkanālu izdalīšanos ar urīnu. To attiecība palielinās līdz 300: 1–500: 1. Bilirubīna reģenerācijas produktu daudzums izkārnījumos un urīnā ir daudz nozīmīgāks, lai diferencētu dzelte nekā absolūtā vērtība.
Ogļhidrātu metabolisma izpēte. Aknu šūnās, piedaloties enzīmu sistēmām, notiek glikogēna sintēze, tās nogulsnēšanās un glikogenolīze, kā arī glikoneogenēze. Glikozes saglabāšana asinīs papildus aknām tiek nodrošināta ar citu orgānu un sistēmu darbību - aizkuņģa dziedzeri, hipofīzes-virsnieru sistēmu utt. Šajā sakarā glikozes līmeņa asinīs tukšā dūšā mainās tikai ārkārtīgi smagi aknu bojājumi un atklāj nepietiekamu ogļhidrātu dalību. apmaiņa ir iespējama tikai ar funkcionālu paraugu palīdzību.
Glikozes slodzes tests ir neefektīvs, jo pēdējo saturu asinīs papildus jau minētajiem orgāniem ietekmē arī veģetatīvās nervu sistēmas stāvoklis, glikogēna krājumi aknās un muskuļos utt.
Testam ar galaktozes slodzi ir zināma vērtība (galaktozes neuzsūc audi un orgāni, izņemot aknas, un hormoni neietekmē tā saturu asinīs). Pacientam ir atļauts dzert 40 g galaktozes šķīdumu 200 ml ūdens un noteikt tā izdalīšanos urīnā. Parasti tas notiek ne ilgāk kā 4 stundas un nepārsniedz 3 g. Nieru darbība un zarnu uzsūkšanās var ietekmēt galaktozes izdalīšanos urīnā, tāpēc galaktozes satura noteikšana asinīs ir nozīmīgāka. Ar labu aknu darbību maksimālais galaktozes satura pieaugums tiek novērots pēc 30-60 minūtēm un nepārsniedz 15% no sākotnējā līmeņa; pēdējais tiek sasniegts vēlreiz pēc 2 stundām. Ar sliktu aknu darbību galaktozes līmeņa paaugstināšanās ir augstāka, galaktozes līmeņa pazemināšanās asinīs notiek lēnāk.
Olbaltumvielu metabolisma izpēte Aknu loma olbaltumvielu vielmaiņā ir ļoti augsta: olbaltumvielas tiek sintezētas un nogulsnētas tajā, aminoskābes, pārtikas polipeptīdi un audu olbaltumvielu sadalīšanās produkti nonāk asinsritē.
Šeit tie ir katabolizēti, neitralizē un noņem neizmantotos sadalīšanās produktus. Dažām aminoskābēm deaminācija un transaminācija. Atbrīvotā amonjaka aknās pārvēršas par mazāk toksisku urīnvielu, no ārējām un aknās sintezētām aminoskābēm tā atkal veido savus audu proteīnus, kā arī asins proteīnus; albumīns, globulīni (a un p, zināmā mērā, y), fibrinogēns, protrombīns, heparīns, daži fermenti. Aknās veidojas olbaltumvielu savienojumi ar lipīdiem (lipoproteīni) un ogļhidrāti (glikoproteīni).
Aknu proteīnu veidojošās funkcijas pārkāpumu nosaka, pārbaudot asins plazmas vai seruma proteīnus. Šis pārkāpums skar ne tik daudz kopējo olbaltumvielu daudzumu, jo to frakciju attiecība, kuras izmaiņas - disproteinēmija - novērota lielākajā daļā aknu bojājumu.
Elektroforēzes metode uz papīra, kas pašlaik ir plaši izmantota klīniskajā praksē, balstās uz faktu, ka dažādi olbaltumvielas elektriskajā laukā ir atkarīgi no molekulas lieluma, formas, lādiņa un citiem faktoriem dažādos ātrumos pret pozitīvo elektrodu. Elektroforēzes laikā uz papīra dažādas olbaltumvielu frakcijas koncentrējas dažādās papīra sloksnes daļās, kur tās var identificēt ar atbilstošu krāsojumu. Frakciju lielumu nosaka katra no tām krāsas krāsa. Plazmas olbaltumvielas ir sadalītas piecās galvenajās frakcijās - albumīnā; a, - un2-, (5-, kā arī y-globulīni (4. tabula). Elektroforēze citos medijos (agars, cietes gēls utt.) Ļauj sadalīt proteīnus lielākam frakciju skaitam.
Aknu slimību gadījumā visizplatītākais ir albumīna-globulīna attiecības (A / G) samazinājums, galvenokārt sakarā ar samazinājumu
4. tabula. Normāla proteinogramma
Veselība, medicīna, veselīgs dzīvesveids
Kvantitatīvais aknu funkcijas tests
Hroniskas aknu slimības raksturo ilgstoša latentā perioda klātbūtne ar minimāliem nespecifiskiem klīniskiem simptomiem (kompensācijas stadija). Slimības gala stadijā attīstās ascīts, dzelte, encefalopātija un precoma (dekompensācijas stadija). Albumīna un protrombīna līmenis serumā ļauj novērtēt aknu sintētisko funkciju, kas vairumā gadījumu ilgstoši ir normāla. Kvantitatīvs aknu darbības pētījums dinamikas sākumposmā ļauj uzraudzīt ārstēšanas efektivitāti un novērtēt prognozi, bet tam nav diagnostikas vērtības.
Ievietojiet galaktozes testu
Galaktoze ir nekaitīga viela. To var ievadīt intravenozi devā, kas ir pietiekama, lai piesātinātu fermenta sistēmu, kas ir atbildīga par tās izvadīšanu. Galaktozes eliminācijas ātrums ir atkarīgs no tā fosforilācijas ar galakto kināzi. Šādā gadījumā ir jāņem vērā ievadītās devas daļa, kas tiek izvadīta ar ārpustelpu ceļu. Šis tests diezgan precīzi atspoguļo aknu šūnu darbību, bet prasa atkārtotu galaktozes līmeņa noteikšanu 2 stundas.
2.-2. Tabula. Kvantitatīvais aknu funkcijas tests
Mikrosomas (citohroma P450 sistēma)
Glikoproteīns ar galaktozes gala atlikumu
* Ja lietojat mazu devu, varat novērtēt aknu asinsriti.
Elpošanas testi
Aminopirīnu transformē ar N-demetilāciju ar citohroma P450 (kas atrodas hepatocītu mikrosomālā frakcijā) oglekļa dioksīdā. Šī viela savās īpašībās atbilst prasībām attiecībā uz elpošanas pārbaudēm aknu darbības pētījumā. Aminopirīns tiek marķēts ar 14 C radioaktīvo izotopu un ievadīts perorāli. Izelpotā gaisa paraugus savāc ar divu stundu intervāliem. Koncentrācija 14 C izelpotā CO2 korelē ar plazmas radioaktivitātes samazināšanās ātrumu. Paraugs atspoguļo atlikušo funkcionējošo mikrosomu un dzīvotspējīgā aknu audu masu. Rezultāti, kas iegūti eksperimentos ar žurkām ar aknu cirozes modeli, liecina, ka N-demetilācija samazinās, jo zaudē funkcionējošu hepatocītu masu; tajā pašā laikā funkcionālā aktivitāte uz hepatocītiem paliek nemainīga. Pētījumā ir prognozēta vērtība, kas ļauj kontrolēt ārstēšanas efektivitāti (tās loma diagnozē ir neliela). Aminopirīna testu var izmantot, lai izpētītu zāļu ietekmi uz aknu mikrosomu fermentu darbību.
MARĶĒTA 14 Ar kofeīnu un fenacetīnu var izmantot arī elpošanas testus. Paraugs ar 14 C-galaktozes slodzi ļauj novērtēt citosolā lokalizētos fermentus. Visi elpošanas testi ir sarežģīti un dārgi, tāpēc maz ticams, ka nākotnē tie tiks plaši izmantoti.
Kofeīna aizvākšana ar siekalu dziedzeriem
Kofeīns (1,3,7-trimethylxanthin) gandrīz pilnībā metabolizējas ar N-demetilāciju aknu mikrosomālajā sistēmā (citohroms P448). Metilksantīni tiek izvadīti ar urīnu. Kofeīna līmeni seruma un siekalu dziedzeros var pētīt ar fermentu imūnanalīzi. Kofeīna izdalīšanās ātrums ar siekalām uz nakti korelē ar tā klīrensu, kā arī ar respiratorā testa rezultātiem ar aminopirīnu. Kofeīna ekskrēcijas pētījums ar siekalu dziedzeriem ir vienkāršs veids, kā novērtēt aknu disfunkciju. Kofeīna klīrensu var ietekmēt dažādi faktori: smēķēšana paātrina kofeīna metabolismu, stimulējot fermentus, dažas zāles, piemēram, cimetidīns, kavē kofeīna sadalīšanos; kofeīna klīrenss samazinās līdz ar vecumu. Atkārtoti nosakot kofeīna klīrensu tajā pašā pacientā, kofeīna devai jābūt vienādai, jo tā klīrenss ir atkarīgs no devas.
Pārbaudiet lidokaīnu
Lidokains tiek metabolizēts ar oksidatīvo N-deetilēšanu ar citohroma P450 palīdzību; tajā pašā laikā veidojas monoetilglicēna-cenoksilidīds (MEGE), kura līmenis atbilst lidokaīna klīrensam. Nosakot MEGE koncentrāciju serumā pēc lidokaīna intravenozas ievadīšanas, var noteikt aknu funkciju. MEGE koncentrācija ir pakļauta ievērojamām svārstībām cilvēkiem ar veselām aknām un pacientiem ar nelielu tās funkcijas pārkāpumu. Aknu cirozes laikā vērojams būtisks šī rādītāja samazinājums, un samazināšanās pakāpe korelē ar slimības prognozi. Veicot diferenciālo diagnozi starp cirozi un nelielu aknu bojājumu, galaktozes eliminācijas un aminopirīna elpošanas testu pētījums ir informatīvāks.
Pārbaudiet ar antipirīnu
Antipirīnam ir ilgs eliminācijas pusperiods, kas pacientiem ar smagiem aknu bojājumiem var pārsniegt 30 stundas, tāpēc pētniecībai nepieciešami asins un siekalu paraugi, kas ierobežo šī parauga izmantošanu diagnostikas nolūkos.
Asialoglikoproteīna receptoru noteikšana
Hepatocīti izraisa asialoglikoproteīnus (ar galaktozes gala atlikumu) no asinsvadu gultnes, jo pastāv hepatocītu sinusoidālā membrāna specifisku receptoru klātbūtne. Kad aknu parenhīma bojājumi, šo receptoru skaits samazinās. To nosaka pēc iezīmētā 99m Tc galaktozila neoglikalbumīna (asialoglikoproteīna analoga) aknās sagūstīšanas pakāpes, ko nosaka, izmantojot standarta scintilācijas kameru pēc vienas asins parauga pārbaudes. Pētījuma rezultāti korelē ar slimības smagumu (ko nosaka bērna kritēriju sistēma), respiratorā testa rezultātus ar aminopirīnu un indocianīna klīrensu. Vidējā cirozes stadijas receptoru koncentrācija ir 0,35 ± 0,07 µmol / l, salīdzinot ar 0,83 ± 0,06 µmol / L kontroles grupā [9]. Līdzīgus rezultātus iegūst, lietojot cilvēka seruma albumīnu, kas marķēts ar 99m Tc-dietilēnriju un npenta-acetāta galaktozilu [5]. Ar akūtu hepatītu receptoru skaits samazinās un atlabšanas periodā atkal palielinās [12]. Neskatoties uz daudzsološajiem rezultātiem, šis pētījums tiek veikts tikai īpašos gadījumos.
Aknu izdalīšanās spēja (bromsulfaleīna tests)
Vecā metode intravenozi injicējamā BS izvadīšanas ātruma izpētei no asinsvadu gultnes ļauj novērtēt hepatocītu absorbciju un ekskrēcijas spēju. Šī metode klīnikā nav piemērota tās sarežģītības, augsto izmaksu un iespējamo sarežģījumu dēļ [4].