ELISA vīrusu hepatīta gadījumā

2017. gada 9. marts, 16:25 Ekspertu raksti: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3,608

Lai atklātu vīrusu hepatītu organismā, zāles plaši izmanto fermentu imunoloģisko analīzi, kuras pamatā ir antigēnu koncentrācijas un tipa noteikšana, izmantojot antivielas un fermentus. To veic pakāpeniski, laboratorijas pētījumos, ar augstu precizitātes rādītāju. Atkarībā no antivielu daudzuma un klases, mainās enzīma krāsa un koncentrācija, kas izmanto ELISA un attiecīgi ārsts diagnosticē slimību.

Kas ir ELISA?

Vīrusu hepatīta klātbūtne pacienta organismā tiek noteikta, izmantojot seroloģisko asins analīzes metodi HCV vīrusa un marķieru (ķermeņu un antivielu) klātbūtnei, norādot to. Enzīmu piesaistīta imunosorbenta pārbaude (ELISA) pārbauda dažādus vīrusus, zemas molekulmasas savienojumus, makromolekulas, to kvalitatīvos un kvantitatīvos rādītājus, izmantojot reakcijas izpausmes to antigēniem. Lai to izdarītu, izmantojiet fermentu kā etiķeti signāla reģistrācijai. To arvien biežāk lieto medicīnā, jo ELISA skaidri atrod labi definētus antigēnus, nesajaucot tos ar citiem, ir augsta jutība pret invāziju vīrusu hepatītā.

Šādas diagnozes trūkums ir nespēja noteikt slimības cēloni, jo metode norāda tikai uz organisma imūnsistēmas reakciju. Analīzes rezultātus ietekmē agrāk veikta vakcinācija. 8 stundas pirms analīzes ieteicams atturēties no ēšanas, nikotīna, alkohola. ELISA testa pamatā ir organisma enzīmu un imūnās atbildes reakcija uz vīrusu. Bioloģiskās molekulas saistās ar šūnu un tās elementiem, mikroorganismiem, atklāj vīrusu, pēc tam strādā pie fermentiem, kas ļauj izteikt imūnreakciju redzamā un izmērāmā parametrā.

Indikācijas analīzei

Vīrusu hepatīts organismā var izraisīt vēzi un aknu cirozi. Savlaicīgas diagnostikas nozīme ir neapstrīdama. Galvenā diagnozes metode ir ELISA tests, kas ar augstu precizitāti nosaka HCV vīrusa (IgM un IgG) klātbūtni un tās mikroelementu aktivitāti. Vīrusu hepatīta caurlaides obligātie testi:

1. Cilvēki ar riska grupām (narkomāni, cilvēki ar AIDS, medicīnas un tiesībaizsardzības iestāžu darbinieki).
2. Cilvēki ar akūtu vai hronisku hepatītu.
3. Grūtnieces un grūtniecības iestāšanās sievietes.

ELISA atzīst slimību jebkurā stadijā. Analīzes rezultāti vidēji ir gatavi 2 dienu laikā.

Kritēriji, kas nosaka analīzes nozīmīgumu

ELISA tests nosaka IgG, IgM, IgA klases antivielu klātbūtni. Diagnosticējot vīrusu hepatītu, ārsts nepievērš uzmanību to tipam, jo ​​jebkura šāda HCV vīrusa izpausme jau norāda uz akūtu vai hronisku slimības stadiju. Slimības sākumposmā IgM līmenis palielinās (5 dienas pēc infekcijas); 15. - 20. dienā IgG antivielas parādās un var palikt cilvēka asinīs ilgu laiku pat pēc izārstēšanas; IgA - parādās pēc 10-14 dienām, samazinās pēc ārstēšanas.

Ja pēc narkotiku lietošanas tiek atklāta IgG un IgA, un to līmenis paliek tādā pašā ātrumā - nesējs ir hronisks hepatīta veids. Svarīgs testa kritērijs būs skaidra pieejamo antivielu klases un to daudzuma definīcija. Pamatojoties uz to, jūs varat zināt ne tikai par slimības klātbūtni, bet arī par tās attīstības stadiju. Šādu elementu atklāšana pacienta asinīs ļauj noteikt pareizu un savlaicīgu ārstēšanu, lai novērstu nopietnākas sekas.

Kā tas tiek darīts?

Piešķirt tiešu, nevis tiešu ELISA testu. Tiešās fāzes:

1. Bioloģiskā materiāla savākšana un ievietošana speciālajos caurumos.
2. 15-30 minūšu laikā antigēni ir pievienoti urbumu virsmai.
3. Antivielu pievienošana šūnām uz atrasto antigēnu. Visi palikuši 1-5 stundas.
4. Noņemiet nesaistītus antigēnus (ielejot urbumu saturu).
5. Izskalojiet akas ar īpašu risinājumu.
6. Pievienot urbumiem fermentu šķīdumu. Atstājiet 30 minūtes - 1 stunda.
7. Kolorimetrijas izmantošana (krāsas noteikšana un akas satura krāsas koncentrācija, salīdzinājums ar rādītājiem, kas ir tieši proporcionāli vīrusa koncentrācijai).

Lietošana netiešās ELISA diagnosticēšanai dos precīzāku rezultātu.

Netiešā ELISA metode notiek ar nenoteiktajām antivielām pret atrastajiem antigēniem un pēc tam tiem pievienoto marķējumu. Pirmkārt, asinis tiek ņemtas no pacienta un 15-30 minūtes izplata caur akām. (antivielas ir fiksētas ar caurumiem). Tad uz tām 1–5 stundas tiek ievadītas nemarķētas antivielas (veidojas antivielu un antigēnu savienojums - imūnkomplekss). Tālāk nepietiekami mikroelementi tiek ielej no akām un mazgāti ar īpašu risinājumu. Nākamajā stadijā laboratorijas tehniķis 15-30 minūšu laikā pievieno iedobēm pazīstamus mikroelementus. (tas saistās ar marķējumu ar marķējumu, veidojot kompleksu "antivielas-antivielas-antigēns"). Noteces un mazgāšanas laikā ar šķīdumu atkal tiek atdalīts ekstra (brīvs). Nākamais ir enzīms, kas 5-30 minūšu laikā maina krāsu. paliek caurumi un krāsu dati tiek salīdzināti ar tabulas indikatoru datiem. Netieša ELISA ir precīzāka.

Ko ELISA parāda vīrusu hepatīta gadījumā?

Imūnanalīze ļauj noteikt infekcijas klātbūtni (visu veidu hepatīta vīrusi, HIV, herpes, sifiliss, citomegalovīruss, masalas, masaliņas, parotīta vīruss, Epstein-Barr vīruss) ir autoimūnu slimību, vēža šūnu marķieris. Norāda reproduktīvo funkciju pārkāpumus (testosterona, prolaktīna, estradiola un progesterona izmaiņas), vairogdziedzera darbības traucējumus, helmintes invāziju, hlamīdijas. Efektīva ureaplasmozes, garo klepu, Dange vīrusa, Rietumilīlas vīrusa, Borrelia atklāšanai. Definīciju saraksts ir augsts, ietver daudzus elementus.

Rezultātu apstiprināšana

HCV vīrusa antigēna noteikšana ar ELISA palīdzību nodrošina 98% precizitāti. To izmanto arī, lai atkārtoti pārbaudītu bioloģiskos materiālus ar izplūdušiem iepriekšējiem rādītājiem. IgM antigēnu klātbūtne nav akūta hepatīta indikators un prasa papildu pētījumus. Atkārtojot ELISA testu, rezultāti sakrīt ar 90–100%. Minimālu neatbilstību gadījumos vidējā vērtība tiek uzskatīta par indikatoru. Lai ārstiem nodrošinātu maksimālu precizitāti, paralēli ieteikt veikt bioķīmisko asins analīzi. Lai pārbaudītu rezultātus pēc imūnanalīzes, jūs varat izmantot citas diagnostikas metodes.

Vīrusu hepatīta izpēte ar metodi

ELISA vīrusu hepatīta diagnostikā. Enzīmu imūnanalīzes iespējas

Vīrusu hepatīta specifiskā laboratoriskā diagnoze balstās uz imūnķīmisko un molekulāro bioloģisko pētījumu metožu izmantošanu. Galvenās imūnķīmiskās metodes ir radioizotops vai radioimūns (RIA) un imūnanalīze (ELISA). Imūnķīmiskās diagnostikas metodes balstās uz antigēna - antivielas - specifisko mijiedarbību ar vēlāku kompleksa identifikāciju, izmantojot speciālas etiķetes. Visbiežāk sastopamais fermentu imunoloģiskais tests.

Pirmie ziņojumi par fermentu imūnanalīzes izmantošanu. kā vielu noteikšanas metodi 1971. gadā vienlaikus publicēja divas pētniecības grupas - B. Van Weemen, A. Schuurs un E. Engvall, P. Perlmann. Enzīmu imūnanalīzes pamatā ir šāds princips: cietajā fāzē, kurā galvenokārt tiek izmantota polistirola tabletes urbumu virsma, ir fiksēts infekcijas ierosinātāja vai antivielas (bieži vien antivielu maisījums) antigēns, lai konstatētu antigēnus. Šo antigēnu vai antivielas, kas ir fiksētas uz cietās fāzes, sauc par imūnsistēmu.

Imūnsorbenta un testa seruma inkubācijas rezultātā konstatējama līdzekļa klātbūtnē tie ir saistīti ar antigēna-antivielu kompleksu. Pēc mazgāšanas procedūras, kuras laikā tiek noņemti nesaistītie antigēni un antivielas, tiek veikta inkubācija ar konjugātu. Kā konjugāts HBsAg noteikšanai tiek izmantoti anti-HBs, lai konstatētu C hepatīta vīrusa antivielas - antivielas pret cilvēka imūnglobulīniem (antivīrusu konjugāts), kas marķētas ar mārrutku peroksidāzi. Šīs inkubācijas rezultātā notiek saistība ar jau esošajiem antigēnu kompleksiem - papildus ievadītā konjugāta antivielas. Pēc nesaistītā konjugāta (mazgāšanas) noņemšanas substrāts tiek ievadīts akās. Izmantojot peroksidāzes konjugātu, ūdeņraža peroksīdu izmanto kā substrātu kombinācijā ar indikatoru, ko visbiežāk izmanto kā ortofenilēndiamīnu (OPD) vai tetrametilbenzidīnu (TMB). Rezultāts tiek novērtēts fotometriski.

Enzīmu imūnanalīzes metodes analītisko iespēju kvalitāti un uzticamību raksturo vairāki kritēriji, kas ietver jutīgumu, specifiskumu, precizitāti un reproducējamību.

Jutīgums ir minimālais vielas daudzums, ko var noteikt ar fermentu imūnanalīzi. Šajā gadījumā šīs metodes jutīguma zemākā robeža ir testa vielas koncentrācija paraugā, kas atbilst mazākajam pozitīvajam noteikšanas rezultātam, kas statistiski būtiski atšķiras no apzināti negatīvu paraugu rādītājiem. IFTS jutīgums ir atkarīgs no vairākiem apstākļiem, kas saistīti gan ar testēšanas sistēmas konstrukciju (imūnsorbenta afinitāti, ekstrakcijas un buferu sistēmu kvalitāti), gan reģistrācijas metodes izšķirtspēju un precizitāti.

Specifiskums - spēja precīzi noteikt komponentus, kuru noteikšanai šis enzīma imūnanalīze ir izstrādāta. ELISA specifiku lielā mērā nosaka antivielu vai antigēnu (tas ir, imunosorbenta sastāvā izmantotā kompozīcija) krusteniskā reakcija ar tuvu saistītiem savienojumiem, kā arī inkubācijas barotnes sastāvs (matricas efekts).

Pareizība - viena un tā paša kontrolparauga atkārtotu noteikšanu rezultātu vidējās vērtības atbilstība izmērītā parametra patiesajai vērtībai. ELISA noteikšanas precizitāte ir atkarīga no testa sistēmas un kontroles parauga kvalitātes. Labām imunoloģisko analīžu sistēmām pareizības rādītāji ir robežās no 90 līdz 110%. Biomedicīnas pētījumu īpatnība ELISA ir neiespējamība noteikt precīzu vērtību, tāpēc vairāku ekspertu laboratoriju vidējais lielums tiek uzskatīts par patieso vērtību. Precizitātes statistiskais kritērijs ir vidējais aritmētiskais un tā novirzes no patiesās vērtības pakāpe, kas izteikta procentos.

Atkārtojamība - testa sistēmas spēja uzrādīt tādas pašas vērtības ar atkārtotiem viena parauga pētījumiem. Atkārtojamība ir atkarīga gan no nejaušām kļūdām (kļūdām) reakcijas procedūras laikā, gan uz testēšanas sistēmu kvalitāti un rezultātu reģistrēšanas metodes precizitāti. Uzskata, ka viena un tā paša uzņēmuma tādu pašu kontroles paraugu reproducējamība dažādās laboratorijās nedrīkst pārsniegt 15% variācijas koeficienta vērtību.

Vīrusu hepatīta marķieru noteikšanai ir vairākas specifiskas ELISA shēmas: a) tieša imūnanalīze; b) netieša imūnanalīze; c) konkurētspējīga inhibīcija; c) “lamatas” vai “uztveršanas” metode.

No molekulārajām bioloģiskajām metodēm vīrusu hepatīta diagnosticēšanai biežāk tiek izmantota polimerāzes ķēdes reakcija un hibridizācija. Šīs metodes, jo īpaši PCR, ļauj noteikt ļoti mazus specifiskā vīrusa DNS vai RNS daudzumus un līdz ar to arī tiesneša replikāciju un dažos gadījumos replikācijas aktivitāti.

C hepatīta asins analīzes

C hepatīts ir viena no visbiežāk sastopamajām aknu slimībām, kas rodas, inficējoties ar C hepatīta vīrusu (HCV), kas nonāk organismā galvenokārt tad, kad tas nonāk saskarē ar inficētās personas asinīm. Pastāv hronisks un akūts C hepatīts: 70–80% pacientu ar akūtu C hepatītu nav slimības simptomu, tikai dažos gadījumos pēc kāda laika pēc infekcijas ir slimības izpausmes, kas izpaužas kā nogurums, sāpes vēderā, apetītes zudums, tumšums urīns, vemšana, slikta dūša, vieglākas izkārnījumi, dzelte, locītavu sāpes. Parasti simptomi parādās 6-7 nedēļas pēc infekcijas, bet slimības pazīmju parādīšanās ilgums svārstās no 2 nedēļām līdz sešiem mēnešiem. Ja parādās iepriekš minētie simptomi, Jums ir jākonsultējas ar infekcijas slimību ārstiem un jāpārbauda C hepatīta asins analīze. Hepatīta diagnostika, ko veic savlaicīgi, var atklāt slimību agrīnā stadijā un ievērojami palielināt atveseļošanās iespējas.

Kad ir plānots C hepatīta tests

Situācijas, kad ir nepieciešams C hepatīta tests:

• grūtniecības un ģimenes plānošanas laikā;
• pacientiem ar hroniska vai akūta hepatīta simptomiem;
• persona ir pakļauta riskam. Tie ir medicīnas darbinieki, personas cietumā, tiesībsargājošie darbinieki, cilvēki, kas lieto narkotikas, ir liels skaits seksuālo partneru, ir AIDS, ir hemodialīze un citi.

Sagatavošanās C hepatīta analīzei

Speciāls preparāts C hepatīta analīzei nav nepieciešams. Analīzei asinis tiek ņemtas no vēnas tukšā dūšā, tajā pašā laikā pēc pēdējās ēdienreizes jāiet vismaz astoņas stundas.

C hepatīta ELISA testi

Pirmā analīze, kas parasti paredzēta C hepatīta - ELISA testa diagnostikai (ar imūnsistēmu saistītā enzīma analīze). C hepatīta ELISA testi ļauj noteikt C hepatīta vīrusa (anti-HCVAb) antivielu klātbūtni asinīs. Ja ELISA testa rezultāts ir pozitīvs, tad tas norāda uz organisma kontaktu ar C hepatīta vīrusu, bet 40% cilvēku, kuriem ir pozitīva ELISA, vīrusu nespēj noteikt asinīs. Šo parādību sauc par viltus pozitīvu rezultātu. Arī ar ELISA palīdzību pārbauda donora asinis.

RIBA C hepatīta ārstēšanai

Lai apstiprinātu pozitīvu ELISA rezultātu, tiek izmantota C hepatīta RIBA analīze. Rekombinantā imunoblotēšanas metode (RIBA) ir precīzāks pētījums par C hepatīta vīrusa antivielu klātbūtni C hepatīta vīrusa klātbūtne organismā arī nenosaka pozitīvu rezultātu, bet tikai apstiprina antivielu klātbūtni.

C hepatīta PCR testi

Lai noteiktu hepatīta C vīrusu klātbūtni asinīs (HCV RNS) un diagnosticētu, visbiežāk analīzi izmanto polimerāzes ķēdes reakcijas (PCR) metode. Šis pētījums ļauj ar augstu precizitāti noteikt pat neliela vīrusa daudzuma klātbūtni asinīs. C hepatīta PCR analīze var atklāt vīrusa klātbūtni jau 5 dienas pēc infekcijas, ilgi pirms antivielu parādīšanās. Ja PCR analīzes rezultāts ir pozitīvs, tas nozīmē aktīvas infekcijas klātbūtni.

Ir šādas PCR analīzes variācijas:

• kvantitatīvā PCR, kas ļauj noteikt ne tikai vīrusa klātbūtnes faktu, bet arī vīrusa slodzi (vīrusa daudzumu). Šis indikators ir ļoti svarīgs, lai noteiktu ārstēšanas efektivitāti;
• genotipa noteikšana, kas nosaka C hepatīta vīrusa genotipu, kas ir svarīgi, lai noteiktu ārstēšanas ilgumu un taktiku. Ir vairāk nekā 10 hepatīta C vīrusa genotipu, bet klīniskajā praksē pietiek ar pieciem no visbiežāk sastopamajiem veidiem: 1a, 1b, 2,3a / 3b.

Veic kvantitatīvu PCR analīzi:

• ar kvalitatīvu pozitīvu testu C hepatīta vīrusa RNS klātbūtnei serumā;
• precīzu ārstēšanas efektivitātes novērtējumu;
• noteikt pacienta ārstēšanas taktiku.

Nav tiešas saiknes starp C hepatīta smagumu un vīrusa daudzumu asinīs. Vīrusa koncentrācija ietekmē slimības inficētspēju, ti, jo lielāks ir vīrusa daudzums pacienta asinīs, jo lielāks ir vīrusa pārnešanas risks, piemēram, ar seksuālo kontaktu vai no mātes uz bērnu. Arī ārstēšanas efektivitāte ir atkarīga no vīrusa koncentrācijas. Terapijas laikā labvēlīgs faktors ir zema vīrusu slodze, un ļoti augsts ir nelabvēlīgs.

Tiek veikta genotipēšanas analīze:

• ar kvalitatīvu pozitīvu testu C hepatīta vīrusa RNS klātbūtnei serumā;
• precīzu ārstēšanas efektivitātes novērtējumu;
• noteikt pacienta ārstēšanas taktiku;
• prognozēt infekcijas procesa hronizāciju;
• lai noteiktu slimības progresēšanu.

Vīrusa genotipa noteikšana ir ļoti svarīga, lai noteiktu ārstēšanas ilgumu, kas ir svarīgi, jo interferonam ir plašs blakusparādību klāsts un zema pacienta tolerance.

C hepatīta dekodēšanas analīze

Parasti vīrusa RNS, antivielas pret tiem un antigēni nav pilnīgi. Antivielu klātbūtne asinīs norāda uz hroniska vai akūta hepatīta C klātbūtni vai atveseļošanās periodu. Ja asinīs ir HCV RNS, ko nosaka ar PCR analīzi, tas norāda uz vīrusa klātbūtni asinīs.

Ar nepareizu testēšanas metodi, transportēšanu un asins novirzēm, PCR analīze dažkārt var radīt viltus pozitīvus rezultātus. ELISA un RIBA analīzes slimības sākumposmā, kad organisms vēl nav devis pietiekamu antivielu daudzumu, var būt kļūdaini negatīvs rezultāts.

Ja, veicot C hepatīta testa atšifrēšanu, tiek iegūti pozitīvi rezultāti, ir nepieciešams sazināties ar infekcijas slimības ārstu un gastroenterologu turpmākai diagnostikai un ārstēšanai.

Segmentēti neitrofili samazinās

Bērna trombocīti ir normāli, paaugstināti, pazemināti

Vairogdziedzera stimulējošais hormons TGT

Hepatīta diagnostika

Nevar nekavējoties noteikt hepatīta klātbūtni organismā, jo slimības inkubācijas periods var ilgt līdz četrām nedēļām. Kad parādās pirmās slimības pazīmes, skartajā organismā rodas radikālas izmaiņas asins sastāva sastāvā: bioķīmiskā analīze liecina par nopietnu veselības problēmu un patogēnas vīrusa klātbūtni. Tomēr, lai veiktu galīgo diagnozi, nepietiek ar asins nodošanu hepatītam, kā arī detalizētu hepatīta diagnozi.

Laboratoriskā hepatīta diagnoze

Ir vēlams to veikt pēc inkubācijas perioda beigām, lai ārsts ar vislielāko precizitāti varētu noteikt organismā esošo aknu slimību. Pretējā gadījumā noteiktā ārstēšana nedos vēlamo terapeitisko efektu un pat saasinās dominējošo klīnisko attēlu.

A hepatīta diagnostika

Parasti A hepatīta diagnoze sākas ar detalizētu pacienta nopratināšanu un vairāku testu iecelšanu, kas jāveic pēc iespējas ātrāk. Tas ir:

• bioķīmisko asins analīzi;
• pilnīgs asins skaits;
• PCR metode;
• ELISA;
• koagulogramma.

Ja attīstās Botkin slimība, tad pēc bioķīmisko asins analīžu rezultātiem tiek novērota nenormāla bilirubīna, AlAT un AsAT lēkme, timola paraugs. Turklāt tiek ražoti specifiski anti-HAV IgM, kas ir neapstrīdams fakts par A hepatīta klātbūtni.
Kopumā asins analīzi nosaka leikocītu samazināšanās, lēciens ESR un limfocitoze. Tomēr visdrošākais ir PCR metode, kas nosaka patogēna vīrusa RNS rādītāju.
Turklāt ārsts pēta slimības simptomus, pēc tam var veikt galīgo diagnozi un izlauzties līdz efektīvākajai terapijai. Nepieciešamība pēc instrumentālās pārbaudes ir ļoti reta. Pēc veiksmīgas konservatīvas ārstēšanas pacienta hospitalizācijas un karantīnas apstākļos galīgā atveseļošanās gaida, un A hepatīts neatkārtojas vēlreiz.

B hepatīta diagnostika

Lai noteiktu B hepatīta vīrusa klātbūtni, tas ir iespējams arī saskaņā ar laboratorisko pārbaužu rezultātiem, un tāpēc pirmais ir nepieciešams, lai ziedotu asinis hepatīta ārstēšanai. Pēc patogēno vīrusu ir trīs galvenie antigēni - HBsAg, HBcAg un HBeAg, kuriem organismā rodas antivielas. Šī klīniskā attēla galvenā iezīme ir ELISA - ELISA, kas tikai atklāj specifiskus B hepatīta marķierus.
Tūlīt jāprecizē, ka antigēns HBsAg parādās asinīs pat pirms pirmajiem hepatīta simptomiem un ir ticami noteikts ledus periodā. Tomēr negatīvs tests neizslēdz B hepatīta klātbūtni, un tāpēc nepieciešams izmantot tikpat efektīvu polimerāzes ķēdes reakcijas (PCR) metodi.
Ja Jums ir aizdomas, ka B hepatīts ir obligāts, ir bioķīmisks asinsanalīze, ko ieteicams iziet pirmajā vietā. Veicot aknu biopsiju un peritoneālo orgānu ultraskaņu, tiek apspriests atsevišķi, bet, kad slimības vēsture ir ļoti skaidra, klīniskās pārbaudes metodes nav nepieciešamas.

Aknu ehogramma autoimūnā hepatītā hroniska hepatīta stadijā

C hepatīta diagnostika

Lai veiktu šo diagnozi, nepietiek ar asins nodošanu hepatītam, jo ​​vīruss var dominēt ķermenī latentā formā. Un tomēr galvenās laboratorijas pārbaudes ir visas iepriekš minētās analīzes, kā arī aknu biopsijas papildu rezultāti. Šī bioloģiskā materiāla mikroskopiskā pārbaude (mūsu gadījumā - aknu audu gabals) nosaka patoloģiskā procesa un audu fibrozes apmēru. Materiālu paraugu ņemšana notiek vietējā anestēzijā, šādas procedūras sarežģījumi medicīnas praksē ir ļoti reti.
Ja ir aizdomas par C hepatītu, galvenā klīniskās pārbaudes metode ir peritoneālo orgānu ultraskaņa. Iemesls ir vienkāršs: slimība bieži izpaužas kā redzes pārmaiņas skartajās aknās, tās struktūras un lieluma izmaiņas. Tādā veidā jūs varat noteikt:

• aknu, liesas, aizkuņģa dziedzera un žultspūšļa lielums;
• patoloģiskas izmaiņas šajos orgānos;
• vispārējā asins plūsma peritoneālās orgānos;
• optimāla vieta aknu biopsijas veikšanai.

Šī klīniskās pārbaudes metode nosaka visas orgāna fokusa patoloģijas mikroskopiskā līmenī. Ja aknas ir attēlotas pelēkā mērogā, nepieciešama tūlītēja biopsija, jo pelēkā krāsa vizualizē “cilvēka filtra” audus.

Hepatīta profilakse

Tā kā slimība neparādās uzreiz, tas ir tālu no visiem klīniskajiem attēliem, kas tiek veikti nekavējoties. Pacientam vienkārši nav zināms par patogēna vīrusa esamību organismā, kas savukārt strauji izplatās asinsritē un inficē veselas aknu šūnas.
Lai izvairītos no šāda traģiska likteņa, ieteicams ievērot visus preventīvos pasākumus. Šāda modrība ievērojami samazinās saslimstības risku un saglabās jūs no nopietnām veselības problēmām nākotnē. Tālāk ir izklāstīti profilakses pamatnoteikumi:

• nomazgājiet rokas pēc ielas;
• pakļaut augstas kvalitātes svaigiem dārzeņiem un augļiem;
• veikt visas profilaktiskās vakcinācijas, kas norādītas gada kalendāra plānā;
• selektīva attieksme pret seksuālajiem partneriem;
• izvairīties no saskares ar slimiem cilvēkiem;
• izmantot tikai vienreizējās lietošanas šļirces un būt īpaši modriem asins pārliešanas stacijās.

Tāpat ieteicams regulāri (reizi sešos mēnešos) nodot asinis hepatīta ārstēšanai, lai pārliecinātos, ka vīruss neietekmē organismā, un neinficē vienreiz veselas aknu šūnas. Ja diagnoze ir noteikta, tai nekavējoties jākļūst par ārsta kontu un jāievēro visi speciālista ieteikumi.

Publikācijas autors:
Syropyatov Sergejs Nikolaevich
Izglītība: Rostovas Valsts medicīnas universitāte (Rostovas Valsts medicīnas universitāte), Gastroenteroloģijas un endoskopijas katedra.
Gastroenterologs
Medicīnas zinātņu doktors

ELISA metode hepatīta noteikšanai

Mūsdienu medicīna ir pazīstama ar daudzām aknu slimībām. HCV (vīrusu hepatīts C) ir viens no visbiežāk sastopamajiem un bīstamākajiem, jo ​​šī infekcija bieži attīstās asimptomātiski un izraisa kritiskas komplikācijas, pat nāvi. Tāpēc ļoti svarīga ir slimības laicīga diagnostika, kas tiek veikta, izmantojot dažādas metodes, tostarp ar imūnsistēmu saistītu imūnosorbentu analīzi (ELISA), lai noteiktu antivielas pret vīrusu asinīs.

Paziņojums par HCV infekciju hepatīta diagnosticēšanai

Laboratorijas diagnostikā C hepatīta (HCV infekcija) noteikšanai izmanto divu veidu metodes:

1. Seroloģisks, pamatojoties uz C hepatīta vīrusa antivielu (anti-HCV) noteikšanu, ko sauc arī par ELISA (ar enzīmu saistītu imunosorbentu analīzi). Tā mērķis ir noteikt anti-HCV (IgM un IgG marķierus), ko izmanto skrīningam un C hepatīta diagnosticēšanai. Abus šos marķierus var noteikt asinīs (plazmā) dažādās kombinācijās, kas prasa pienācīgu klīnisko interpretāciju. Lai apstiprinātu anti-HCV klātbūtni, tiek veikts RIBA (rekombinantā imunoblota) tests.
2. Molekulārā bioloģiskā, kuras mērķis ir noteikt RNS vīrusu. HCV RNS tests ir noteikts šādām pacientu kategorijām:
   • ar identificētu anti-HCV;
   • bez atklāta anti-HCV, bet ar konstatētiem epidemioloģiskiem un klīniskiem datiem, kas prasa izslēgt akūtu HCV formu.

Vīrusa RNS var konstatēt asinīs jau 14 dienas pēc inficēšanās, ti, pirms anti-HCV parādīšanās, kas parādās pirmajos 2-3 mēnešos.

Lai noteiktu galīgo diagnozes apstiprinājumu (īpaši, ja konstatēts tikai viens no diviem HCV infekcijas marķieriem), eksperti iesaka, ka pēc noteikta laika jāveic atkārtoti anti-HCV un HCV RNS testi.

Hepatīta noteikšana ar ELISA palīdzību

Tiek atklāta vīrusu hepatīta agrīna diagnostika, jo īpaši asimptomātiska, anicteriska forma serumā, vīrusu proteīnu (antigēnu) vai to antivielu klātbūtne (ko ražo imūnsistēma, kad vīrusi iekļūst organismā), izmantojot ar fermentu saistītu imunosorbentu analīzi (ELISA). Tā ir universāla imunoloģiskās diagnostikas metode, tās būtība ir "antigēna antivielu" mijiedarbības pētījums. To plaši izmanto daudzās pasaules valstīs.

Hepatīta noteikšana ar ELISA palīdzību ļauj ne tikai noteikt precīzu diagnozi, bet arī novērtēt slimības raksturu, kā arī izvēlēties kompetentu un efektīvu ārstēšanu, izmantojot tradicionālās zāles (interferonu, ribavirīnu), tiešas iedarbības zāles (Sofosbuvir, Daclatasvir) un to ģenēriskos produktus Indijas un Ķīnas ražošanā.

Kad vien iespējams, ELISA vīrusu hepatīta diagnozi papildina ar PCR (polimerāzes ķēdes reakcija), kas ļauj noteikt hepatīta vīrusu klātbūtni RNS.

Cik precīza ir imūnanalīzes metode

Saskaņā ar ekspertu aplēsēm ELISA metodes precizitāte ir 95%, tas ir, 95 no 100 pacientiem, kuri lieto fermentu imūnanalīzi, HCV antivielu - IgM un IgG - klātbūtni un daudzumu var noteikt asinīs. Ja rezultāts ir pozitīvs, ir iespējams diagnosticēt HCV kontaktu ar ķermeni (nevis pašu vīrusu, proti, antivielu klātbūtni asinīs, kas var būt jau nodotas slimības rezultāts).

Tomēr, neskatoties uz to, ka imūnosorbenta asins analīzes (ELISA) jutība ir augsta, 40% pacientu ar pozitīvu rezultātu vīruss var nebūt atklāts, kas liecina par apšaubāmu vai viltus pozitīvu rezultātu.

Lai apstiprinātu ELISA rezultātu pareizību, RIBA metode (rekombinantā imunoblotēšana) tiek izmantota, lai precīzāk izpētītu HCV antivielu noteikšanu.

Anti NCV kodols

Efektīvi pētījumi, lai noteiktu antivielu klātbūtni pret hepatīta vīrusiem, ietver anti-HCV kodolu, ko izmanto kā apstiprinošu testu, kad iegūti „neskaidri” rezultāti.

Ja anti-HCV kodols tiek konstatēts serumā atšķaidījumā 1: 1000, iespējams, tiks konstatēts pozitīvs rezultāts, tas ir, slimība ir klāt.

Ja paraugi atšķaidījumā 1: 1000 ir negatīvi, tad atšķaidījumā 1: 200 ir pozitīvi pētījumi par vīrusu RNS klātbūtni. Šajā gadījumā, visticamāk, nav HCV infekcijas.

Ir svarīgi saprast, ka hronisku HCV formu gadījumā pastāvīgi tiek konstatētas antivielas, un vīrusa izvadīšanas laikā (izņemšana no organisma šūnām) tās saglabājas 4-8 gadus vai ilgāk. Tāpēc anti-HCV klātbūtne ne vienmēr norāda uz ķermeņa infekciju un neļauj izdarīt objektīvus secinājumus par procesa aktivitāti, lai iegūtu precīzus datus par vīrusu slodzi, aknu bojājumu pakāpi, infekcijas ilgumu un atšķirību starp akūtu un hronisku slimības formu, ieteicams izmantot dažādu HCV antivielu spektra definīciju. peptīdi. Ir svarīgi arī ievērot to kvantitatīvo un kvalitatīvo dinamiku.

ELISA analīze - no HbsAg skrīninga līdz sarežģītai diagnostikai

Ieviešot mūsdienīgas tehnoloģijas medicīnā, pieaug imūnķīmiskās diagnostikas metožu iespējas, kas spēj ātri un precīzi atpazīt slimību, kad citas metodes ir bezspēcīgas. Izpratne par to, ka B hepatīta vīruss var būt organismā ļoti zemā koncentrācijā, pie kuras to nevar noteikt pat ar šādu uzticamu metodi kā PCR, liek apsvērt šīs slimības diagnosticēšanas problēmu un novērtēt imūnanalīzes iespējas.

Šajā materiālā mēs detalizēti analizēsim visu, kas attiecas uz šāda veida laboratorijas pētījumiem. Jūs uzzināsiet, kāda ir fermenta imūnanalīze un kā tā tiek veikta, kāds ir Austrālijas antigēns un kā tas tiek noteikts, ko nesaprotami saīsinājumi Hbs ag, Hbcor, vidēji un to loma analīzes atšifrēšanā, kā arī iegūt daudz noderīgas un interesantas informācijas.

Raksta saturs:

Vispārīga informācija par ELISA

ELISA (saīsināts ELISA) ir laboratorijas diagnostikas metode, kas var atklāt gan antigēnus, gan antivielas no dažādām infekcijām, tostarp B hepatītu. Pašreizējās zināšanas par vīrusa īpašībām un organisma imūnreakcijas īpašībām ļauj ne tikai noteikt infekciju, bet arī identificēt to. vakcinācijas efektivitāti un novērtēt ārstēšanas efektivitāti.

Enzīmu imūnanalīzes būtība

ELISA pamatā ir „antigēna-antivielu” reakcija vai drīzāk tās īpašības.

Atbildot uz svešas vielas (antigēna) invāziju, kas jo īpaši ir vīrusa proteīni, organisms ražo aizsargājošus proteīnus - antivielas. Antivielas nonāk sarežģītā reakcijā ar antigēnu, bloķējot tā darbību.

Mēs runāsim vairāk par zemāk minētajiem antigēniem un antivielām, bet tagad mēs atzīmēsim, ka katram antigēnam ir stingri individuāli vai kā ārsti saka, homologas antivielas. Tādējādi, ja mēs vēlamies noteikt konkrētu antigēnu asinīs, mēs izmantosim diagnostikas tabletes ar antivielām. Ja asinīs ir antigēns, tas reaģēs ar antivielām, kuras var noteikt dažādos veidos. Un otrādi. Ja mēs vēlamies atrast antivielas, tad mums ir nepieciešama tablete ar atbilstošu antigēnu.

Visbiežāk lāču diagnostiskā vērtība ir tikai tās antivielas, ar kurām var diagnosticēt gandrīz jebkuru infekciju. Tomēr B hepatīta vīrusa īpatnība ir tāda, ka galveno lomu diagnozē spēlē viens no antigēniem - Austrālijas antigēns.

Kā ir IFA

Apsveriet tipisku ELISA procedūru konkrētam piemēram, ja vēlaties identificēt antivielas pret patogēnu.

Diagnostikai izmanto tableti ar 96 akām, kas ir iepriekš piesātinātas ar attiecīgo antigēnu. Turklāt procedūra ir šāda:

serumu piemēro visām šūnām;

homologās antivielas reaģē ar antigēnu un piestiprina pie plāksnes;

nomazgāta tablete, noņemot nesavienotās antivielas;

tad šūnās tiek ievadīta fermentatīva etiķete - viela, kas reaģē ar antivielām un izraisa šūnas satura iekrāsošanos.

Tā ir standarta ELISA procedūra ar krāsošanu, ko izmanto, piemēram, imunochromatogrāfijas teststrēmēs.

ELISA neaprobežojas ar antivielu vai patogēna antigēnu kvalitatīvu noteikšanu. Jo vairāk antivielu ir tabletes šūnās, jo intensīvāks ir krāsojums. Salīdzinot tās optisko blīvumu ar vadību, mūsdienu aprīkojums var diezgan precīzi aprēķināt antivielu koncentrāciju uz tilpuma vienību. Tādējādi tiek veikta kvantitatīva ELISA, mērījumu mērvienība, pie kuras visbiežāk ir optiskā blīvuma vienības (EOP).

Imunochemiluminiscences analīze

Šodien ir vairāki desmiti ELISA tipu, no kuriem katrai ir vēlamā darbības joma. Visbiežāk B hepatīta diagnostikā ir imunochemiluminiscējošā analīze.

Šīs analīzes fermentatīvā etiķete nav hromatīni, tāpat kā standarta ELISA, bet īpašas vielas - fosfori, kas izraisa kompleksa spīdumu ultravioletajā gaismā.

Izmantojot īpašu ierīci - luminometru, jūs varat precīzi noteikt emisijas līmeni un līdz ar to vēlamās vielas koncentrāciju.

Izmantojot ELISA metodes, nosaka gandrīz visus B hepatīta vīrusa antigēnus un antivielas pret tiem.

B hepatīta vīrusa antigēni: Hbs, Hbe un Hbc

Termins antigēns (antigēns) nāk no diviem angļu vārdiem: antivielas - antivielas un ģenerators - ražotājs. Tādējādi saskaņā ar antigēnu saprot jebkuru vielu, kas izraisa antivielu veidošanos organismā. Visbiežāk sastopamie antigēni ir proteīnu savienojumi.

Šodien ir zināmi trīs hepatīta B vīrusa antigēni: hbsag, hbc un hbe.

Austrālijas antigēns

Proteīns, kas ir daļa no patogēna hepatīta B ārējā apvalka, tika konstatēts ilgi pirms paša vīrusa atklāšanas. Šis antigēns ieguva savu nosaukumu, jo tas pirmo reizi tika identificēts no Austrālijas vietējiem iedzīvotājiem. Tomēr sākumā olbaltumvielu neuzskatīja par antigēnu, bet vietējo iedzīvotāju vidū tas bija pilnīgi kopīgs asins elements, un mazliet vēlāk tika apzināta tās saistība ar aknu slimībām.

Antigēna ilgstoša saglabāšana asinīs un antivielu trūkums norāda uz HBeAg pozitīva hroniska B hepatīta veidošanās iespēju.

Šodien profesionālajā literatūrā praktiski nav atrasts nosaukums “Austrālijas antigēns”, un to aizstāj starptautiskais saīsinājums - HbsAg (hepatīta b virsmas antigēns - B hepatīta virsmas antigēns). Turklāt jūs varat atrast saīsinājumus hbs antigēnu vai vienkārši hbs. Jebkurš no šiem saīsinājumiem ir pieņemams, un to var papildināt, ierakstot HBV vai HBV - B hepatīta vīrusu (hepatīta b vīruss).

B hepatīta vīrusa virsmas antigēnam ir viena ievērojama iezīme, kas padara to par neaizstājamu diagnostisko marķieri - tā koncentrācija asinīs var sasniegt ļoti augstu līmeni - līdz pusmigramam uz asins mililitru. Tas ir tāpēc, ka tikai neliela daļa jaunu HBsAg, kas veidojas hepatīta B vīrusa vairošanās laikā, nonāk jaunu vīrusu daļiņu membrānu veidošanā, un pārējais - brīvi cirkulē asinīs. Tā rezultātā hbs daļiņu skaits asinīs var pārsniegt virionu skaitu simtiem tūkstošu reižu.

Šī funkcija padara Austrālijas antigēnu par nozīmīgu B hepatīta diagnostikas rādītāju, kas tiek konstatēts asinīs jau 4-6 nedēļas pēc infekcijas. Kā antivielas veido virsmas antigēnu pakāpeniski aizvieto ar tiem. Ja pēc 6 mēnešiem HBsAg saglabājas, tad tas norāda uz infekcijas pāreju uz hronisku formu.

Nesen, kad kļuva iespējams noteikt hbs hbv koncentrāciju, tās loma diagnozē ir palielinājusies vēl vairāk, jo, balstoties uz antigēna līmeni, var atšķirt hronisku B hepatītu (HBV) no veselīga nesēja stāvokļa, kā arī kontrolēt ārstēšanas efektivitāti.

Core antigēni

Vīrusa kodolā - nukleokapsids - ir proteīni, kas kontrolē HBcoreAg un HBeAg vīrusa reprodukciju.

HBcoreAg, ko var saukt arī par HBCore antigēnu, hbc vai kodolu antigēnu, var atrast tikai aknu audos tieši hepatocītu kodolos. Šis antigēns asinīs nav konstatēts un tam nav diagnostikas vērtības.

Hepatīta vīrusa struktūra

HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - gluži pretēji, ir svarīga loma diagnostikā. HBeAg un HBcoreAg ir tuvi radinieki. Tie ir ļoti līdzīgi struktūrai un atšķiras galvenokārt molekulu telpiskajā stāvoklī. Atšķirībā no HBcore, HBe nav daļa no nukleokapsidas sienas un brīvi cirkulē asinīs.

HBe loma infekcijas procesā nav pietiekami skaidra, tomēr tās uzvedības īpatnības un to saistība ar infekcijas procesa gaitu jau ir pietiekami izpētītas. HBeAg norāda uz aktīvo vīrusa reprodukciju un ļauj droši noteikt hroniskas CHB - HBeAg-pozitīvās vai HBeAg-negatīvās fāzes fāzi.

HBe var konstatēt asinīs jau akūtas hepatīta B vīrusa (HBV) inkubācijas periodā, bet augsta HBeAg koncentrācija 3 nedēļas visticamāk norāda uz hroniska procesa draudiem. HBe koncentrācija ir tieši saistīta ar Dane daļiņu saturu (tā sauktās B hepatīta vīrusa daļiņas) - jo lielāks ir HBe daudzums, jo augstāka ir HBV DNS koncentrācija asinīs.

HBeAg ir galvenais infekcijas slimības marķieris. HBeAg pozitīvo pacientu asinis ir daudz lipīgākas nekā HBeAg negatīvas. Piemēram, grūtniecēm, kas ir pozitīvas attiecībā uz HBe un Hbs, infekcijas pārnešanas iespējamība bērnam sasniedz 50%, savukārt šāda notikuma varbūtība ir negatīva HBe, bet pozitīvo māmiņu HBS ir 10-30%.

Hbe nosaka hroniskā hepatīta gaitu. HBeAg pozitīvajam hroniskajam B hepatītam ir daudz nelabvēlīgāka prognoze attiecībā uz cirozes attīstību.

Tas, iespējams, ir viss, kas jums jāzina par HBV antigēniem, un mēs pāriet uz otro B hepatīta marķieru grupu - antivielas.

Ko nozīmē C hepatīta pozitīvais vai negatīvais IVN rezultāts?

Lai precīzi noteiktu hepatīta veidu pēc sākotnējās diagnozes, lai prognozētu slimības gaitu, lai noteiktu tās attīstības stadiju, tiek izmantoti dažādi seroloģiskie pētījumi. Visprecīzākos datus iegūst pēc fermenta imūnanalīzes. Izmantojot ELISA hepatītu C, diagnosticēts 95% gadījumu. Šī analīze ļauj noteikt C hepatīta antivīrusa antivielas (HCV antivīruss) un novērtēt ne tikai patoloģiskā procesa aktivitātes pakāpi, bet arī pretvīrusu terapijas efektivitāti, ko noteicis ārsts un kas tiek veikts viņa kontrolē.

Kad ir nepieciešami pētījumi un to īpatnības

C hepatīts ir visbīstamākais šīs slimības veids, jo tam ir ilgs latents (latents) periods un bīstamas sekas. Lai izvairītos no pareizas un savlaicīgas diagnozes parādīšanās un attīstības, viena no informatīvākajām metodēm ir atzīta imūnanalīze.

Ir iespējams apstiprināt HCV infekcijas klātbūtni pacienta asinīs, izmantojot seroloģiskos marķierus, un analīze, kas balstās uz strukturālo un ne-strukturālo vīrusu peptīdu kompleksu, ļauj iegūt visprecīzākos un uzticamākos datus par antivielu esamību. Veseliem cilvēkiem nav C hepatīta vīrusa antivielu pacienta asinīs, un to atklāšana liecina par patogēna klātbūtni un patoloģiska procesa attīstību.

Pētījuma gaitā eksperti identificē kopējās IgM un IgG klases antivielas, kas ir tieši saistītas ar HCV strukturālajiem un nestrukturālajiem proteīniem. Veicot šo pētījumu, mēs varam identificēt pacientus, kas inficēti ar C hepatīta vīrusu slimības agrīnā stadijā, un kopējā antivielu klātbūtne pacienta asinīs norāda uz slimības vai iepriekšējās infekcijas rašanos.

Slimības sākumu norāda IgM klases antivielu klātbūtne, un C tipa hepatītu var noteikt pēc konstatētajām IgG klases antivielām. Tie kļūst par atveseļošanās apstiprinājumu (slimības beigu stadiju), un šim laikam ir raksturīga skarto orgānu anatomiskā un funkcionālā atveseļošanās.

Savlaicīga ELISA (ELISA) ļauj noteikt patoloģisko procesu agrīnā attīstības stadijā, diagnosticēt slimību ar augstu precizitāti un palielināt ātras atveseļošanās iespējas. ELISA tests ļauj noteikt ne tikai vīrusa klātbūtni, bet arī konkrētu kopējo antivīrusu antivielu skaitu.

1. Sievietēm grūtniecības stāvoklī, reģistrējoties pirmsdzemdību klīnikā.
2. Pacienti, kuriem ir akūta vai hroniska hepatīta simptomi.
3. Medicīnas speciālisti, kas pastāvīgi saskaras ar bioloģiskiem materiāliem.
4. Pacienti ar AIDS diagnozi.
5. Narkotiku atkarīgie iedzīvotāji.
6. Pacienti ar alkoholismu un tiem, kas vada asociējošu dzīvesveidu.

Nosūtīšana uz ELISA testu (fermentu imunoloģisko analīzi) un saņemt tiesībaizsardzības iestāžu darbiniekus vai sabiedrisko pakalpojumu darbiniekus. Vajadzība pēc ELISA notiek, ja jums ir aizdomas par aknu funkcionalitātes pārkāpumu vai, saņemot apšaubāmus datus par orgāna stāvokli pēc ultraskaņas. Ārsts var dot pacientam ELISA asins analīzes pieprasījumu, ja pēdējam ir jāveic sarežģīta ķirurģiska iejaukšanās. Ja sieviete (īpaši vecāka par 30 gadiem) plāno grūtniecību, un asins analīzē konstatētas paaugstinātas bilirubīna vai transferāzes (ALT, AST) vērtības.

Ir konstatētas specifiskas antivīrusu IgG antivielas jau vairākus gadus. To koncentrācija pakāpeniski samazinās, kas apstiprina pozitīvo dinamiku. Šajā gadījumā hroniska C hepatīta gadījumā kopējā anti-HCV antivielu skaits nemainās. Precīza diagnoze ir balstīta uz IgM antivielu līmeņa noteikšanu.

C hepatīta gaita ir atkarīga no vīrusa, kas izraisīja slimības attīstību, genotipa. Ir zināmas 11 modernas zāļu šķirnes. Visgrūtākajās situācijās ir iespējama infekcija ar vairākiem vīrusa genotipiem, un viens no tiem vienmēr izrādās dominējošs. Tikai precīza diagnoze palīdzēs izvēlēties efektīvākās zāles efektīvai terapijai, izvēlēties to devu un noteikt terapeitisko iejaukšanās ilgumu.

Pētījumu rezultātu novērtēšana

Lai diagnosticētu iespējamo C hepatītu un iegūtu indikatīvu informāciju par patogēna daudzumu un kvalitāti, tiek veikts ar fermentiem saistīts imūnsorbenta tests (ELISA), kura laikā speciālisti saņem apstiprinājumu par vīrusa klātbūtni organismā un var novērtēt tā darbību.

Izmantojot šo pētījumu, mēs varam izdarīt secinājumus par:

• vīrusu slodze;
• risks saslimt ar hronisku procesu;
• HCV RNS molekulas reprodukcijas (replikācijas) aktivitāte;
• patoloģiskā procesa ilgums;
• aknu bojājuma pakāpe.

Novērtēta arī slimības riska hroniska pakāpe. Identificēti, izmantojot ELISA antivīrusu HCV antivielas, norāda uz vīrusu replikāciju. Galīgie rezultāti prasa apstiprinājumu ar precīzākiem pētījumiem.

Fermenta imūnanalīzes rezultāta kvalitatīvais novērtējums ir izteikts kā pozitīvs vai negatīvs rezultāts. ELISA ļauj noteikt C hepatītu slimības agrīnā attīstības stadijā, kā arī slimības gaitā anicteriskā veidā.

Analīzei ir noteiktas priekšrocības, tostarp:

1. Kvalitatīvo un kvantitatīvo rādītāju precizitāte.
2. Minimālais studiju laiks.
3. Pakāpeniska pārbaude.

Enzīmu imūnanalīze ir viens no lieliem precizitātes pētījumiem, bet, neraugoties uz visām priekšrocībām, dažos gadījumos tas neļauj identificēt cilvēka organismā esošo patogēnu.

Pētījumiem laboratorijas asistents ņem pacienta vēnu asinis un ievieto to īpašos konteineros. Pēc noteikta laika antigēni (svešķermeņi) ir piestiprināti pie kuģa sienām. Speciālists ievada imūnglobulīnus (antivielas) traukā un meklē imūnreakciju.

Iegūtie rezultāti tiek salīdzināti ar speciāli apkopotas tabulas datiem. Rezultāts tiek novērtēts kā:

Pozitīvs, norādot uz akūta slimības formu, ja asins analīzes laikā tiek noteiktas IgA, IgG, IgM klases antivielas.

Negatīvs - nav konstatēti visi trīs antivielu veidi.

Viltus pozitīvs ELISA rezultāts ir pozitīvs, bet nav apstiprināts pēc PCR (polimerāzes ķēdes reakcija).

Neapšaubāmi - marķieri asinīs nav konstatēti C hepatīta klātbūtnē. Tas ir iespējams ar pārāk agru diagnozi. Nepieciešama atkārtota analīze pēc 2-3 nedēļām. Lai iegūtu precīzu diagnozi, veiciet PCR analīzi.

Pacientiem, kuri lieto zāles, kurām ir inhibējošs efekts uz organisma aizsardzības sistēmu, ir iespējams veikt kļūdaini negatīvu analīzes rezultātu.

Gan viltus pozitīvus, gan viltus negatīvus analīzes rezultātus ir iespējams veikt vairāku iemeslu dēļ. Pirmkārt, tā ir minimālā vīrusu slodze slimības attīstības sākumposmā. Tikpat svarīgi ir pacienta imūnsistēmas stāvoklis un viņa ķermeņa individuālās īpašības. Pētījuma rezultāti būtiski ietekmē imūnsupresantu zāļu lietošanu.

Ja pacientam ir grūtniecības stāvoklī esoša sieviete, nav iespējams pilnīgi pārliecināties par fermenta imūnanalīzes rezultātu precizitāti. Nepareizi rezultāti ir iespējami gadījumos, kad analīzi veic pacientiem, kuri cieš no autoimūnām slimībām, onkoloģiskām slimībām ar labdabīgiem audzējiem.

Papildu pētījumi tiek veikti, ja pacientam nesen ir bijusi nopietna infekcijas slimība, viņam ir diagnosticēts vielmaiņas traucējumi vai endokrīnās sistēmas darbības traucējumi. Ja asins sastāvs paaugstina heparīna līmeni vai ievērojami samazina mikroelementu līmeni.

Analīzes precizitāti var palielināt, ievērojot spēkā esošos noteikumus par sagatavošanu tās piegādei:

1. Asinis tiek ziedotas tikai tukšā dūšā. Pēdējā maltīte ir atļauta vismaz 8-10 stundas pirms materiāla savākšanas.
2. Vakarā pirms analīzes ir jāatsakās ēst taukainus, ceptus, pikantus, kūpinātus produktus un ēdienus.
3. Par alkohola lietošanu nevar runāt.
4. Labāk ir atmest smēķēšanu dienā pirms asins ziedošanas.

Enzīmu piesaistīto imunosorbentu testu var veikt tikai tiem pacientiem, kuri pašlaik necieš no katarālas, iekaisuma vai infekcijas slimībām, un nav sūdzējušies par nevēlēšanos.

Norādīto noteikumu un prasību pārkāpums noved pie tā, ka analīzes rezultāts tiek vērtēts kā nepatiess. Šī situācija attīstās 15-20% gadījumu. Tomēr, lai iegūtu pilnīgu pārliecību, ārsti nosūta pacientus papildu pārbaudei, kuras laikā viņiem ir nepieciešams ziedot asinis PCR.

Polimerāzes ķēdes reakcija

Diagnoze nav iespējama tikai, pamatojoties uz ELISA analīzes rezultātiem. Antivielu klātbūtne nav pierādījums par patogēna vīrusa klātbūtni organismā pētījuma laikā. Kļūdaina pārbaude var izraisīt pacienta nervu sabrukumu vai pat akūtu reakciju. Diagnostika, kas pamatojas uz ELISA rezultātiem, nav precīza. Ir nepieciešami papildu pētījumi, kuru rezultāti sniegs ārstu galīgo spriedumu.

Ir svarīgi atcerēties, ka viltus pozitīvs testa rezultāts ir iespējams cilvēkiem, kuri pašlaik cieš no citām infekcijas slimībām, bet viņu imūnsistēma nav pareizi reaģējusi uz patogēnu vai vīrusu iekļūšanu organismā.

C hepatīta diagnosticēšana ļauj veikt vairākus laboratorijas testus, kas ir īpaša vieta, kur ir imūnsistēma, kas saistīta ar fermentiem (ELISA). Rādītāju kvalitatīvais novērtējums ir definēts kā pozitīvs vai negatīvs rezultāts. B hepatīta vīrusa trūkums pacienta asinīs ir norma, bet dažos gadījumos pēc pētījuma eksperti norāda, ka bioloģiskā materiālā ir konstatētas nenozīmīgas dažu RNS fragmentu (ribonukleīnskābes) koncentrācijas. Identificējiet tos, izmantojot PCR (polimerāzes ķēdes reakcija).

Šī asins analīze ļauj identificēt C hepatīta izraisītāju slimības attīstības agrīnā stadijā un veikt diagnozi ar augstu precizitāti. Pētījuma pamatā ir fakts, ka vīrusiem ir DNS molekulas (B hepatīts) vai RNS (C hepatīts).

PCR analīzes laikā, izmantojot īpašu pacientu asins paraugu apstrādi:

• palielināt nukleīnskābes molekulu koncentrāciju;
• noteikt to veidu;
• noteikt patogēna veidu.

Ja cilvēka asinīs ir neliels daudzums patogēnu RNS fragmentu, tie visi tiks atklāti ar PCR. Tas ļauj veikt precīzu diagnozi. Šīs analīzes galvenā atšķirība no visām citām pētniecības metodēm ir 100% precīza diagnoze.

Šo analīzi veic, pētot grūtnieču asinis, kas pieteikušās pirmsdzemdību klīnikā reģistrācijai, ar aizdomas par C hepatītu ar ilgu latenta (latenta) periodu, ar grūtībām veikt precīzu diagnozi, izmantojot ELISA. PCR ir nepieciešams gadījumos, kad pēc fermentu imūnanalīzes ir iegūts apšaubāms rezultāts.

C hepatīta vīruss šajā situācijā ir pacienta ķermenī, bet vēl nav izraisījis slimības straujo attīstību. Tā ir latentā slimības gaita. Analīze tiek veikta diezgan ātri, jo nav nepieciešams audzēt patogēnu, izmantojot barības vielu, lai iegūtu rezultātu. Galvenā atšķirība starp PCR un ar imūnsistēmu saistītu imunosorbentu analīzi (ELISA) ir tāda, ka šajā pētījumā nav tādas viltus pozitīvas vai apšaubāmas sekas.