Ieviešot mūsdienīgas tehnoloģijas medicīnā, pieaug imūnķīmiskās diagnostikas metožu iespējas, kas spēj ātri un precīzi atpazīt slimību, kad citas metodes ir bezspēcīgas. Izpratne par to, ka B hepatīta vīruss var būt organismā ļoti zemā koncentrācijā, pie kuras to nevar noteikt pat ar šādu uzticamu metodi kā PCR, liek apsvērt šīs slimības diagnosticēšanas problēmu un novērtēt imūnanalīzes iespējas.
Šajā materiālā mēs detalizēti analizēsim visu, kas attiecas uz šāda veida laboratorijas pētījumiem. Jūs uzzināsiet, kāda ir fermenta imūnanalīze un kā tā tiek veikta, kāds ir Austrālijas antigēns un kā tas tiek noteikts, ko nesaprotami saīsinājumi Hbs ag, Hbcor, vidēji un to loma analīzes atšifrēšanā, kā arī iegūt daudz noderīgas un interesantas informācijas.
Raksta saturs:
Vispārīga informācija par ELISA
ELISA (saīsināts ELISA) ir laboratorijas diagnostikas metode, kas var atklāt gan antigēnus, gan antivielas no dažādām infekcijām, tostarp B hepatītu. Pašreizējās zināšanas par vīrusa īpašībām un organisma imūnreakcijas īpašībām ļauj ne tikai noteikt infekciju, bet arī identificēt to. vakcinācijas efektivitāti un novērtēt ārstēšanas efektivitāti.
Enzīmu imūnanalīzes būtība
ELISA pamatā ir „antigēna-antivielu” reakcija vai drīzāk tās īpašības.
Atbildot uz svešas vielas (antigēna) invāziju, kas jo īpaši ir vīrusa proteīni, organisms ražo aizsargājošus proteīnus - antivielas. Antivielas nonāk sarežģītā reakcijā ar antigēnu, bloķējot tā darbību.
Mēs runāsim vairāk par zemāk minētajiem antigēniem un antivielām, bet tagad mēs atzīmēsim, ka katram antigēnam ir stingri individuāli vai kā ārsti saka, homologas antivielas. Tādējādi, ja mēs vēlamies noteikt konkrētu antigēnu asinīs, mēs izmantosim diagnostikas tabletes ar antivielām. Ja asinīs ir antigēns, tas reaģēs ar antivielām, kuras var noteikt dažādos veidos. Un otrādi. Ja mēs vēlamies atrast antivielas, tad mums ir nepieciešama tablete ar atbilstošu antigēnu.
Visbiežāk lāču diagnostiskā vērtība ir tikai tās antivielas, ar kurām var diagnosticēt gandrīz jebkuru infekciju. Tomēr B hepatīta vīrusa īpatnība ir tāda, ka galveno lomu diagnozē spēlē viens no antigēniem - Austrālijas antigēns.
Kā ir IFA
Apsveriet tipisku ELISA procedūru konkrētam piemēram, ja vēlaties identificēt antivielas pret patogēnu.
Diagnostikai izmanto tableti ar 96 akām, kas ir iepriekš piesātinātas ar attiecīgo antigēnu. Turklāt procedūra ir šāda:
serumu piemēro visām šūnām;
homologās antivielas reaģē ar antigēnu un piestiprina pie plāksnes;
nomazgāta tablete, noņemot nesavienotās antivielas;
tad šūnās tiek ievadīta fermentatīva etiķete - viela, kas reaģē ar antivielām un izraisa šūnas satura iekrāsošanos.
Tā ir standarta ELISA procedūra ar krāsošanu, ko izmanto, piemēram, imunochromatogrāfijas teststrēmēs.
ELISA neaprobežojas ar antivielu vai patogēna antigēnu kvalitatīvu noteikšanu. Jo vairāk antivielu ir tabletes šūnās, jo intensīvāks ir krāsojums. Salīdzinot tās optisko blīvumu ar vadību, mūsdienu aprīkojums var diezgan precīzi aprēķināt antivielu koncentrāciju uz tilpuma vienību. Tādējādi tiek veikta kvantitatīva ELISA, mērījumu mērvienība, pie kuras visbiežāk ir optiskā blīvuma vienības (EOP).
Imunochemiluminiscences analīze
Šodien ir vairāki desmiti ELISA tipu, no kuriem katrai ir vēlamā darbības joma. Visbiežāk B hepatīta diagnostikā ir imunochemiluminiscējošā analīze.
Šīs analīzes fermentatīvā etiķete nav hromatīni, tāpat kā standarta ELISA, bet īpašas vielas - fosfori, kas izraisa kompleksa spīdumu ultravioletajā gaismā.
Izmantojot īpašu ierīci - luminometru, jūs varat precīzi noteikt emisijas līmeni un līdz ar to vēlamās vielas koncentrāciju.
Izmantojot ELISA metodes, nosaka gandrīz visus B hepatīta vīrusa antigēnus un antivielas pret tiem.
B hepatīta vīrusa antigēni: Hbs, Hbe un Hbc
Termins antigēns (antigēns) nāk no diviem angļu vārdiem: antivielas - antivielas un ģenerators - ražotājs. Tādējādi saskaņā ar antigēnu saprot jebkuru vielu, kas izraisa antivielu veidošanos organismā. Visbiežāk sastopamie antigēni ir proteīnu savienojumi.
Šodien ir zināmi trīs hepatīta B vīrusa antigēni: hbsag, hbc un hbe.
Austrālijas antigēns
Proteīns, kas ir daļa no patogēna hepatīta B ārējā apvalka, tika konstatēts ilgi pirms paša vīrusa atklāšanas. Šis antigēns ieguva savu nosaukumu, jo tas pirmo reizi tika identificēts no Austrālijas vietējiem iedzīvotājiem. Tomēr sākumā olbaltumvielu neuzskatīja par antigēnu, bet vietējo iedzīvotāju vidū tas bija pilnīgi kopīgs asins elements, un mazliet vēlāk tika apzināta tās saistība ar aknu slimībām.
Antigēna ilgstoša saglabāšana asinīs un antivielu trūkums norāda uz HBeAg pozitīva hroniska B hepatīta veidošanās iespēju.
Šodien profesionālajā literatūrā praktiski nav atrasts nosaukums “Austrālijas antigēns”, un to aizstāj starptautiskais saīsinājums - HbsAg (hepatīta b virsmas antigēns - B hepatīta virsmas antigēns). Turklāt jūs varat atrast saīsinājumus hbs antigēnu vai vienkārši hbs. Jebkurš no šiem saīsinājumiem ir pieņemams, un to var papildināt, ierakstot HBV vai HBV - B hepatīta vīrusu (hepatīta b vīruss).
B hepatīta vīrusa virsmas antigēnam ir viena ievērojama iezīme, kas padara to par neaizstājamu diagnostisko marķieri - tā koncentrācija asinīs var sasniegt ļoti augstu līmeni - līdz pusmigramam uz asins mililitru. Tas ir tāpēc, ka tikai neliela daļa jaunu HBsAg, kas veidojas hepatīta B vīrusa vairošanās laikā, nonāk jaunu vīrusu daļiņu membrānu veidošanā, un pārējais - brīvi cirkulē asinīs. Tā rezultātā hbs daļiņu skaits asinīs var pārsniegt virionu skaitu simtiem tūkstošu reižu.
Šī funkcija padara Austrālijas antigēnu par nozīmīgu B hepatīta diagnostikas rādītāju, kas tiek konstatēts asinīs jau 4-6 nedēļas pēc infekcijas. Kā antivielas veido virsmas antigēnu pakāpeniski aizvieto ar tiem. Ja pēc 6 mēnešiem HBsAg saglabājas, tad tas norāda uz infekcijas pāreju uz hronisku formu.
Nesen, kad kļuva iespējams noteikt hbs hbv koncentrāciju, tās loma diagnozē ir palielinājusies vēl vairāk, jo, balstoties uz antigēna līmeni, var atšķirt hronisku B hepatītu (HBV) no veselīga nesēja stāvokļa, kā arī kontrolēt ārstēšanas efektivitāti.
Core antigēni
Vīrusa kodolā - nukleokapsids - ir proteīni, kas kontrolē HBcoreAg un HBeAg vīrusa reprodukciju.
HBcoreAg, ko var saukt arī par HBCore antigēnu, hbc vai kodolu antigēnu, var atrast tikai aknu audos tieši hepatocītu kodolos. Šis antigēns asinīs nav konstatēts un tam nav diagnostikas vērtības.
Hepatīta vīrusa struktūra
HBeAg (HBe, HBprecoreAg) - gluži pretēji, ir svarīga loma diagnostikā. HBeAg un HBcoreAg ir tuvi radinieki. Tie ir ļoti līdzīgi struktūrai un atšķiras galvenokārt molekulu telpiskajā stāvoklī. Atšķirībā no HBcore, HBe nav daļa no nukleokapsidas sienas un brīvi cirkulē asinīs.
HBe loma infekcijas procesā nav pietiekami skaidra, tomēr tās uzvedības īpatnības un to saistība ar infekcijas procesa gaitu jau ir pietiekami izpētītas. HBeAg norāda uz aktīvo vīrusa reprodukciju un ļauj droši noteikt hroniskas CHB - HBeAg-pozitīvās vai HBeAg-negatīvās fāzes fāzi.
HBe var konstatēt asinīs jau akūtas hepatīta B vīrusa (HBV) inkubācijas periodā, bet augsta HBeAg koncentrācija 3 nedēļas visticamāk norāda uz hroniska procesa draudiem. HBe koncentrācija ir tieši saistīta ar Dane daļiņu saturu (tā sauktās B hepatīta vīrusa daļiņas) - jo lielāks ir HBe daudzums, jo augstāka ir HBV DNS koncentrācija asinīs.
HBeAg ir galvenais infekcijas slimības marķieris. HBeAg pozitīvo pacientu asinis ir daudz lipīgākas nekā HBeAg negatīvas. Piemēram, grūtniecēm, kas ir pozitīvas attiecībā uz HBe un Hbs, infekcijas pārnešanas iespējamība bērnam sasniedz 50%, savukārt šāda notikuma varbūtība ir negatīva HBe, bet pozitīvo māmiņu HBS ir 10-30%.
Hbe nosaka hroniskā hepatīta gaitu. HBeAg pozitīvajam hroniskajam B hepatītam ir daudz nelabvēlīgāka prognoze attiecībā uz cirozes attīstību.
Tas, iespējams, ir viss, kas jums jāzina par HBV antigēniem, un mēs pāriet uz otro B hepatīta marķieru grupu - antivielas.
B hepatīta būtība un diagnoze
Tiklīdz stadija pārvērtīsies dzelte, veselie un gļotādas sāļi kļūst dzelteni, veselības stāvoklis strauji pasliktinās. Ir svarīgi uzsvērt, ka aknas aug lielumā un izvirzās no krasta arkas. Ādas krāsošana dzeltenā krāsā notiek pakāpeniski. Aknu enzīmu daudzums asinīs palielinās, un timola paraugs nemainās.
Slimības diagnosticēšana: pamatmetodes un koncepcijas
B hepatīta diagnostika tiek veikta vairākos veidos:
1. Vispirms ārstam jāveic anamnēze un jāveic rūpīga personas izpēte. Apsekojuma laikā liels uzsvars tiek likts uz šādiem momentiem:
- vai narkotiku vai citu intravenozo līdzekļu ievadīšana;
- vai bija asins pārliešana;
- vai tika veiktas ķirurģiskas iejaukšanās;
- vai bija bojājums ādas integritātei;
- kādas ir seksuālās attiecības;
- vai pacientam bija kontakts ar B hepatītu vai tā nesēju.
Ja kāds no šiem elementiem noticis, tas tiek norādīts, cik ilgi. Parasti infekcija notiek, sazinoties ar 6 nedēļām līdz sešiem mēnešiem pirms pirmo hepatīta simptomu rašanās.
2. B hepatīta laboratoriskā diagnostika, antigēnu un B hepatīta antivielu analīzes ELISA analīzei. Šāda veida pārbaudes mērķis ir identificēt 3 antigēnus:
- HBsAg (antigēns, kas atrodas virspusēji), t
- HBcAg (atrodas iekšpusē)
- HBeAg (savienots ar iepriekšējo antigēnu). Slimību raksturo šo antigēnu agrīna atklāšana asinīs.
Cilvēki, kas cieš no B hepatīta un satur šos antigēnus asinīs, ir ļoti lipīgi. Viņi spēj inficēt citus cilvēkus. Ja HBsAg nav cilvēka asinīs, tas norāda, ka viņš ir vesels. Ja cilvēks ir slims, ķermenis sāk izdalīt antivielas pret esošajiem antigēniem.
3. B hepatīta diagnostika, izmantojot PCR metodi, kas paredzēta, lai atklātu HBV DNS asinsrites sistēmā. Ja rezultāts ir pozitīvs, tad personai ir hepatīts. HBV DNS analīzi sauc par kvalitatīvu. Ir arī kvantitatīva PCR. Kvantitatīvais PCR dod iespēju identificēt slodzi ar hepatīta vīrusa klātbūtni. Kas ir vīrusu slodze? Tas ir HBV DNS kopiju skaits 1 ml asins. Hepatīta kvantitatīvā analīze parāda vīrusa aktivitāti.
4. Asins tests bioķīmijai. Šī analīze ietver aknu radīto enzīmu skaita noteikšanu. Šādi fermenti ietver ALT, AST. Tās atrodas aknu šūnās - hepatocītos. Ja aknu šūnas ir bojātas, fermenti tiek atbrīvoti un nonāk asinīs. Pozitīva analīze tiek apsvērta tikai tad, ja aknu enzīmu skaits pārsniedz normu. Aptauja norāda, vai aknās un to aktivitātēs ir iekaisuma procesi.
5. Ultraskaņas pārbaude, elastometrija utt. Var veikt hepatīta diagnostiku un metodes, kas nav laboratorijas. Ultraskaņas izmantošana pārbauda vēdera orgānus. Ultraskaņa sniedz skaidru priekšstatu par jebkādu iekaisuma procesu aknās un to traukos. Efektīva aknu elastometrijas vadīšana. Elastometrijas metode dod priekšstatu par fibrozes pakāpi aknu audos.
6. Svarīgākā analīze ir B hepatīta antigēnu klātbūtne sarkano asinsķermenīšu masā, ja tie pastāv, tas norāda uz infekcijas klātbūtni cilvēka organismā.
7. Hepatīta diagnostikas laboratorijas veids ietver antigēnu un antivielu noteikšanu eritrocītu masā. Visbiežāk HBsAg izpaužas asinsrites sistēmā pat hepatīta inkubācijas periodā. Persona nezina par viņa slimības attīstību, un asinīs jau notiek izmaiņas. Aknu hepatīta gadījumā HBsAg pazūd no asinīm. Parasti HBsAg neatrodas ledus perioda pirmajā mēnesī, un antivielas pret šo antigēnu sāk skaitīt asinsrites sistēmā 90 dienas pēc inficēšanās.
Pozitīvs antivielu tests nenozīmē, ka cilvēkam ir hepatīts. Iespējams, ka viņš iepriekš bija cietis no hepatīta bez D-līdzekļa. Ja pēc ārstēšanas pacienta asinīs nav HBsAg, bet ir antivielas, tas liecina par labu prognozi, kas norāda, ka pacients atgūstas. Ja pacientam ir hronisks vai smags hepatīts, tad antivielas var parādīties jau no ledus perioda pirmajām dienām.
Uzticams ekvivalents ir anti-HBc IgM asinīs. Tie ir atklāti pirmsvēža perioda beigās. Tie ir klāt visu acīmredzamo izpausmju periodu. Ja analīzē ir anti-HBc IgM, tad tas nozīmē, ka vīruss turpina vairoties. Pēc reģenerācijas sākuma anti-HBc IgM pazūd. Slimības akūtā fāze var izraisīt anti-HBc IgG testu. Tie tiks atklāti visas personas dzīves laikā.
Kad hepatīta (īpaši autoimūnās) inkubācijas periods ir beidzies, HBeAg sāk parādīties asinīs. Viņi informē par aktīvo dalīšanos un infekciozo daļiņu palielināšanos. Tiklīdz sākas icteric periods, NVAAg pazūd. To aizstāj ar anti-HBe. Anti-HBe norāda, ka infekcijas aktivitāte ir samazināta un drīzumā atveseļojas. Bet vīrusa reproducēšana neapstājas!
Akūts hepatīts var kļūt hronisks. Par to runās identificēti asinīs HВеАg. Ja tas ir klāt, tas nozīmē, ka varbūtība pārveidot procesu hroniskā formā ir augsta. HeVag klātbūtne norāda uz ļoti lipīgu pacientu.
Jāatceras, ka B hepatīta laboratoriskā diagnoze, kas dod negatīvu rezultātu HBsAg, neizslēdz pašas diagnozes. Svarīgs būtisks elements ir anti-HBc IgM klātbūtne asinīs. Šīs antivielas apstiprinās slimību ar precizitāti. Ja asins analīzē nav anti-HBc IgM, tas var liecināt par HBV klātbūtni, un šo antivielu klātbūtne norāda uz infekcijas pastiprināšanos.
B hepatīta DNS noteikšana
Vissvarīgākais pētījums, lai noteiktu vīrusa DNS klātbūtni, ir PCR. Analīze norāda uz infekcijas procesa darbību. Ar šo metodi jūs varat uzzināt par slimības prognozi.
Ja hepatīts ir labvēlīgāks, tad HBV DNS pazūd no asinīm infekcijas sākumposmā. Laboratorijas diagnoze PCR veidā sniedz datus par ārstēšanas kvalitāti (vai konkrētas zāles ietekmē).
Lai saprastu, kādas taktikas būtu jārīkojas terapeitisko pasākumu iecelšanai, ir nepieciešams veikt kvantitatīvu PCR metodi. Kvantitatīvais PCR nodrošina pozitīvu reakciju no terapijas.
Diagnostikas pamats
Lai veiktu atbilstošu diagnozi, būs nepieciešamas šādas pārbaudes:
- Ikdienas pārbaude, palpācija.
- Aknu ultraskaņa.
- Asins bioķīmiskā analīze (atkārtoti veikta).
- HBsAg, HBeAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, anti-HBc kopējais, HBV DNS pētījums.
- HBV un HCV marķieri (vīrusu hepatīts ir izslēgts).
- Aknu punkcija.
- Aknu biopsija. Ar speciālas adatas palīdzību vēdera siena tiek caurdurta un neliela daļa aknu tiek izņemta histoloģiskai izmeklēšanai (gabals nav lielāks par pusi grama). Biopsija ir jaunākā hepatīta testēšanas metode. Pateicoties viņai, jūs varat precīzi runāt par infekcijas procesa aktivitāti, aknu fibrozi. Biopsija ir ķirurģiska procedūra. Tas var izraisīt komplikācijas, tāpēc to bieži neizmanto diagnostikai.
- Fibroelastogrāfija. To var izmantot, lai novērtētu aknu audu blīvumu. Šī metode ir līdzīga ultraskaņai. Pētījumā tiek izmantots īpašs sensors, kas uz ādas ir uzstādīts aknu projekcijas vietā.
- Fibrotest. Tas pamatojas uz noteiktu asins skaitļu skaitīšanu.
Hronisks B hepatīts
Hroniska B hepatīta ieņēmumu fāze:
1. fāze - vīrusa replikācija. Vīruss vairojas ar palielinātu aktivitāti.
2. posms - integrācija. Vīruss pārtrauc reizināšanu. Vīrusu genoms sāk integrēties normālu aknu šūnu, hepatocītu, DNS.
Lai noteiktu vīrusa progresēšanas ātrumu, ir svarīgi saprast procesa smagumu, iznākumu, aknu šūnu traucējumu pakāpi. Hroniskā hepatīta laboratoriskā diagnostika balstās uz:
Ja hepatīts HBeAg-pozitīvs (pozitīva analīze), tad eritrocītu masā būs:
- vaislas posmā - HBsAg, HBeAg, anti-HBc IgM, anti-HBc (kopējais), HBV DNS;
- hepatocītu ievietošanas posmā DNS - HBsAg, anti-HBe, anti-HBc (kopējais), HBV DNS.
Ja hepatīts ir seronegatīvs, tad asins masā būs HBsAg, anti-HBe, anti-HBc IgM, anti-HBc, HBV DNS. Turklāt viņu klātbūtne nekādā veidā nav atkarīga no infekcijas procesa stadijas.
Diferenciālā diagnostika
Veicot diagnozi, ārstam ir pienākums diferencēt B hepatītu ar citām slimībām - A, C, E, D hepatītu. Galīgo diagnozi var izdarīt tikai pēc tam, kad asins masā ir noteikti konkrēti katram hepatīta šūnām raksturīgi marķieri.
Hepatīts ir jānošķir ar citām svarīgām slimībām: akūtas elpceļu vīrusu infekcijas, žultsakmeņi, saindēšanās ar pārtiku, zarnu infekcija, vēdera orgānu ķirurģiskā patoloģija un daudzas citas slimības.
Autoimūns hepatīts
Attiecībā uz autoimūnu hepatītu diagnoze ietver šādus svarīgākos izmeklējumus:
- Sarkano asins šūnu masas (OAK) analīze. Paskaidrojums: autoimūns hepatīts, samazināts leikocītu, trombocītu skaits un paaugstināts ROE līmenis novēro asins anēmiju (normocītisku). Tomēr var sagaidīt augstāku anēmijas pakāpi.
- Urīns. Urīna analīzes atšifrēšana: satur proteīnus, sarkanās asins šūnas, bilirubīnu.
- Asins tests bioķīmijai. Ļoti būtiska analīze. Interpretācija: palielināts bilirubīna daudzums, palielināts argināzes līmenis, albumīna samazinājums, γ-globulīnu palielināšanās un timola tests. Samazināts zemūdens tests. Dažus indikatorus var palielināt par 2 vai vairāk reizes. Tas ir pozitīvs tests attiecībā uz autoimūnu hepatītu.
- Imunoloģiskā analīze. Dekodēšana: samazinās T-limfocītu slāpētāji, eritrocītu masā parādās lupus šūnas, palielinās imūnglobulīnu skaits, antivielas pret eritrocītiem.
Pozitīvu hepatīta testu var noteikt, izmantojot seroloģisko pētījumu metodi. Autoimūns hepatīts ir neviendabīga slimība.
ELISA vīrusu hepatīta gadījumā
2017. gada 9. marts, 16:25 Ekspertu raksti: Nova Vladislavovna Izvochkova 0 3,608
Lai atklātu vīrusu hepatītu organismā, zāles plaši izmanto fermentu imunoloģisko analīzi, kuras pamatā ir antigēnu koncentrācijas un tipa noteikšana, izmantojot antivielas un fermentus. To veic pakāpeniski, laboratorijas pētījumos, ar augstu precizitātes rādītāju. Atkarībā no antivielu daudzuma un klases, mainās enzīma krāsa un koncentrācija, kas izmanto ELISA un attiecīgi ārsts diagnosticē slimību.
Kas ir ELISA?
Vīrusu hepatīta klātbūtne pacienta organismā tiek noteikta, izmantojot seroloģisko asins analīzes metodi HCV vīrusa un marķieru (ķermeņu un antivielu) klātbūtnei, norādot to. Enzīmu piesaistīta imunosorbenta pārbaude (ELISA) pārbauda dažādus vīrusus, zemas molekulmasas savienojumus, makromolekulas, to kvalitatīvos un kvantitatīvos rādītājus, izmantojot reakcijas izpausmes to antigēniem. Lai to izdarītu, izmantojiet fermentu kā etiķeti signāla reģistrācijai. To arvien biežāk lieto medicīnā, jo ELISA skaidri atrod labi definētus antigēnus, nesajaucot tos ar citiem, ir augsta jutība pret invāziju vīrusu hepatītā.
Šādas diagnozes trūkums ir nespēja noteikt slimības cēloni, jo metode norāda tikai uz organisma imūnsistēmas reakciju. Analīzes rezultātus ietekmē agrāk veikta vakcinācija. 8 stundas pirms analīzes ieteicams atturēties no ēšanas, nikotīna, alkohola. ELISA testa pamatā ir organisma enzīmu un imūnās atbildes reakcija uz vīrusu. Bioloģiskās molekulas saistās ar šūnu un tās elementiem, mikroorganismiem, atklāj vīrusu, pēc tam strādā pie fermentiem, kas ļauj izteikt imūnreakciju redzamā un izmērāmā parametrā.
Indikācijas analīzei
Vīrusu hepatīts organismā var izraisīt vēzi un aknu cirozi. Savlaicīgas diagnostikas nozīme ir neapstrīdama. Galvenā diagnozes metode ir ELISA tests, kas ar augstu precizitāti nosaka HCV vīrusa (IgM un IgG) klātbūtni un tās mikroelementu aktivitāti. Vīrusu hepatīta caurlaides obligātie testi:
- Cilvēki ar riska grupām (narkomāni, cilvēki ar AIDS, medicīnas un tiesībaizsardzības iestāžu darbinieki).
- Cilvēki ar akūtu vai hronisku hepatītu.
- Grūtnieces un grūtniecības iestāšanās sievietes.
ELISA atzīst slimību jebkurā stadijā. Analīzes rezultāti vidēji ir gatavi 2 dienu laikā.
Kritēriji, kas nosaka analīzes nozīmīgumu
ELISA tests nosaka IgG, IgM, IgA klases antivielu klātbūtni. Diagnosticējot vīrusu hepatītu, ārsts nepievērš uzmanību to tipam, jo jebkura šāda HCV vīrusa izpausme jau norāda uz akūtu vai hronisku slimības stadiju. Slimības sākumposmā IgM līmenis palielinās (5 dienas pēc infekcijas); 15. - 20. dienā IgG antivielas parādās un var palikt cilvēka asinīs ilgu laiku pat pēc izārstēšanas; IgA - parādās pēc 10-14 dienām, samazinās pēc ārstēšanas.
Ja pēc narkotiku lietošanas tiek atklāta IgG un IgA, un to līmenis paliek tādā pašā ātrumā - nesējs ir hronisks hepatīta veids. Svarīgs testa kritērijs būs skaidra pieejamo antivielu klases un to daudzuma definīcija. Pamatojoties uz to, jūs varat zināt ne tikai par slimības klātbūtni, bet arī par tās attīstības stadiju. Šādu elementu atklāšana pacienta asinīs ļauj noteikt pareizu un savlaicīgu ārstēšanu, lai novērstu nopietnākas sekas.
Kā tas tiek darīts?
Piešķirt tiešu, nevis tiešu ELISA testu. Tiešās fāzes:
- Bioloģiskā materiāla savākšana un ievietošana speciālajos caurumos.
- 15-30 minūšu laikā antigēni ir pievienoti urbumu virsmai.
- Antivielu pievienošana šūnām uz atrasto antigēnu. Visi palikuši 1-5 stundas.
- Noņemiet nesaistītus antigēnus (ielejot urbumu saturu).
- Izskalojiet akas ar īpašu risinājumu.
- Pievienot urbumiem fermentu šķīdumu. Atstājiet 30 minūtes - 1 stunda.
- Kolorimetrijas izmantošana (krāsas noteikšana un akas satura krāsas koncentrācija, salīdzinājums ar rādītājiem, kas ir tieši proporcionāli vīrusa koncentrācijai).
Netiešā ELISA metode notiek ar nenoteiktajām antivielām pret atrastajiem antigēniem un pēc tam tiem pievienoto marķējumu. Pirmkārt, asinis tiek ņemtas no pacienta un 15-30 minūtes izplata caur akām. (antivielas ir fiksētas ar caurumiem). Tad uz tām 1–5 stundas tiek ievadītas nemarķētas antivielas (veidojas antivielu un antigēnu savienojums - imūnkomplekss). Tālāk nepietiekami mikroelementi tiek ielej no akām un mazgāti ar īpašu risinājumu. Nākamajā stadijā laboratorijas tehniķis 15-30 minūšu laikā pievieno iedobēm pazīstamus mikroelementus. (tas saistās ar marķējumu ar marķējumu, veidojot kompleksu "antivielas-antivielas-antigēns"). Noteces un mazgāšanas laikā ar šķīdumu atkal tiek atdalīts ekstra (brīvs). Nākamais ir enzīms, kas 5-30 minūšu laikā maina krāsu. paliek caurumi un krāsu dati tiek salīdzināti ar tabulas indikatoru datiem. Netieša ELISA ir precīzāka.
Ko ELISA parāda vīrusu hepatīta gadījumā?
Imūnanalīze ļauj noteikt infekcijas klātbūtni (visu veidu hepatīta vīrusi, HIV, herpes, sifiliss, citomegalovīruss, masalas, masaliņas, parotīta vīruss, Epstein-Barr vīruss) ir autoimūnu slimību, vēža šūnu marķieris. Norāda reproduktīvo funkciju pārkāpumus (testosterona, prolaktīna, estradiola un progesterona izmaiņas), vairogdziedzera darbības traucējumus, helmintes invāziju, hlamīdijas. Efektīva ureaplasmozes, garo klepu, Dange vīrusa, Rietumilīlas vīrusa, Borrelia atklāšanai. Definīciju saraksts ir augsts, ietver daudzus elementus.
Rezultātu apstiprināšana
HCV vīrusa antigēna noteikšana ar ELISA palīdzību nodrošina 98% precizitāti. To izmanto arī, lai atkārtoti pārbaudītu bioloģiskos materiālus ar izplūdušiem iepriekšējiem rādītājiem. IgM antigēnu klātbūtne nav akūta hepatīta indikators un prasa papildu pētījumus. Atkārtojot ELISA testu, rezultāti sakrīt ar 90–100%. Minimālu neatbilstību gadījumos vidējā vērtība tiek uzskatīta par indikatoru. Lai ārstiem nodrošinātu maksimālu precizitāti, paralēli ieteikt veikt bioķīmisko asins analīzi. Lai pārbaudītu rezultātus pēc imūnanalīzes, jūs varat izmantot citas diagnostikas metodes.
B hepatīta vīrusa pētījumi (ELISA un PCR) t
B hepatīta vīrusa antigēns (HBsAg)
B hepatīta virsmas antigēns serumā parasti nav sastopams.
B hepatīta virsmas antigēna (HBsAg) noteikšana serumā apstiprina akūtu vai hronisku B hepatīta vīrusa infekciju.
Akūtas slimības gadījumā HBsAg tiek konstatēts serumā inkubācijas perioda pēdējo 1-2 nedēļu laikā un klīniskā perioda pirmajās 2-3 nedēļās. HBsAg cirkulācija asinīs var būt ierobežota līdz dažām dienām, tāpēc jums jācenšas savlaicīgi pārbaudīt pacientus. ELISA metode ļauj noteikt HBsAg vairāk nekā 90% pacientu. Gandrīz 5% pacientu visjutīgākās pētījuma metodes HBsAg nenovēro, šādos gadījumos vīrusu hepatīta B etioloģiju apstiprina anti-HBcAg JgM vai PCR klātbūtne.
HBsAg koncentrācijai serumā visos hepatīta B smaguma līmeņos slimības augstumā ir ievērojams svārstību diapazons, tomēr ir zināms modelis: akūtā periodā pastāv pretēja attiecība starp HBsAg koncentrāciju serumā un slimības smagumu.
Augstas HBsAg koncentrācijas ir biežākas vieglas un vidēji smagas slimības formas. Smagās un ļaundabīgās formās HBsAg koncentrācija asinīs bieži ir zema, un 20% pacientu ar smagu formu un 30% ar ļaundabīgu antigēnu asinīs vispār nevar noteikt. Pacientiem ar HBsAg antivielām šajā fonā tiek uzskatīta nelabvēlīga diagnostikas zīme; tas ir noteikts B hepatīta ļaundabīgās formās.
Akūtā B hepatīta gaitā HBsAg koncentrācija asinīs pakāpeniski samazinās līdz šī antigēna pilnīgai izzušanai. Vairumā pacientu HBsAg pazūd 3 mēnešu laikā pēc akūtas infekcijas sākuma.
HBsAg koncentrācijas samazināšanās par vairāk nekā 50% līdz akūtā perioda 3. nedēļas beigām parasti norāda uz infekcijas procesa ciešu pabeigšanu. Parasti pacientiem ar augstu HBsAg koncentrāciju slimības augstumā to konstatē asinīs vairākus mēnešus.
Pacientiem ar zemu HBsAg koncentrāciju pazūd daudz agrāk (dažreiz vairākas dienas pēc slimības sākuma). Kopumā HBsAg noteikšanas laiks ir no vairākām dienām līdz 4-5 mēnešiem. Maksimālais HBsAg noteikšanas periods ar vienmērīgu akūtā B hepatīta kursu nepārsniedz 6 mēnešus pēc slimības sākuma.
HBsAg var atrast veselos cilvēkos, parasti profilaktiskos vai nejaušos pētījumos. Šādos gadījumos tiek pētīti citi vīrusu hepatīta B, anti-HBcAg JgM, anti-HBcAg JgG, anti HBeAg marķieri un pētīta aknu darbība.
Negatīvu rezultātu gadījumā ir nepieciešami atkārtoti HBsAg pētījumi.
Ja atkārtotas asins analīzes ilgāk par 3 mēnešiem atklāj HBsAg, šis pacients ir klasificēts kā hronisks slimnieks ar vīrusu B hepatītu.
HBsAg klātbūtne ir diezgan izplatīta. Pasaulē ir vairāk nekā 300 miljoni pārvadātāju, un mūsu valstī ir aptuveni 10 miljoni pārvadātāju.
HBsAg cirkulācijas pārtraukšana ar turpmāko serokonversiju (anti-HBs veidošanās) vienmēr norāda uz organisma sanāciju.
Asins analīzi HBsAg klātbūtnei izmanto šādos nolūkos:
- inkubācijas periods;
- akūta slimība;
- agrīna atveseļošanās;
- pastāvīgs hronisks hepatīts;
- aknu ciroze;
riska grupu pacientu pārbaudei un identificēšanai:
Pētījumu rezultātu novērtēšana
Pētījuma rezultāti ir izteikti kvalitatīvi - pozitīvi vai negatīvi. Negatīvs rezultāts norāda uz HBsAg seruma neesamību. Pozitīvs rezultāts - HBsAg identificēšana norāda uz akūtu vīrusu hepatīta B inkubāciju vai akūtu periodu, kā arī hronisku vīrusu hepatītu B.
Antivielas pret B hepatīta vīrusa JgG kodolantigēnu (anti-HBcAg JgG)
Parasti serumā nav anti-HBcAg seruma.
Pacientiem ar anti-HBcAg JgG parādās akūtajā B hepatīta periodā un saglabājas visa mūža garumā. Anti-HBcAg JgG ir vadošais pārnestā HBV marķieris.
Lai noteiktu diagnozi, izmanto anti-HBcAg JgG asins analīzes:
Pētījumu rezultātu novērtēšana
Pētījuma rezultāti ir izteikti kvalitatīvi - pozitīvi vai negatīvi. Negatīvs rezultāts norāda uz seruma anti-HBcAg JgG trūkumu. Pozitīvs rezultāts - anti-HBcAg JgG identificēšana norāda uz akūtu infekciju, atveseļošanos vai iepriekš inficētu B hepatītu.
B hepatīta vīrusa "e" antigēns (HBeAg)
Parasti HBeAg serumā nav.
HBeAg var atrast lielākajā daļā pacientu ar akūtu vīrusu hepatītu B. Tas parasti pazūd asinīs pirms HBs antigēna. Augsts HBeAg līmenis slimības pirmajās nedēļās vai tā atklāšana ilgāk par 8 nedēļām dod iemeslu aizdomām par hronisku infekciju.
Šis antigēns bieži tiek atklāts hroniskā vīrusa etioloģijas hepatītā. Īpaša interese par HBeAg definīciju ir fakts, ka tās noteikšana raksturo infekcijas procesa aktīvo replikācijas fāzi. Ir pierādīts, ka augstās HBeAg koncentrācijas atbilst augstai DNS polimerāzes aktivitātei un raksturo vīrusa aktīvo replikāciju.
HBeAg klātbūtne asinīs norāda uz tā augsto inficētspēju, t.i. aktīvās hepatīta B infekcijas klātbūtne pārbaudāmajā organismā un tiek atklāta tikai HBs antigēna klātbūtnē asinīs. Pacientiem ar hronisku aktīvu hepatītu pretvīrusu zāles lieto tikai tad, ja asinīs tiek konstatēts HBeAg. HBeAg - antigēns - B hepatīta vīrusa akūtas fāzes un replikācijas marķieris.
Lai diagnosticētu HBe antigēna klātbūtni, izmanto asins analīzi:
Pētījumu rezultātu novērtēšana
Pētījuma rezultāti ir izteikti kvalitatīvi - pozitīvi vai negatīvi. Negatīvs rezultāts norāda uz HBeAg seruma neesamību. Pozitīvs rezultāts - HBeAg noteikšana norāda uz akūta vīrusa hepatīta B inkubāciju vai akūtu periodu vai nepārtrauktu vīrusa replikāciju un pacienta infekciozitāti.
Antivielas pret B hepatīta vīrusa antigēnu "e" (anti-HBeAg)
Anti-HBeAg serumā parasti nav. Anti-HBeAg antivielu parādīšanās parasti liecina par B hepatīta vīrusa intensīvu izņemšanu no ķermeņa un nelielu pacienta infekciju.
Šīs antivielas parādās akūtā periodā un saglabājas līdz 5 gadiem pēc infekcijas. Hroniska ilgstoša hepatīta gadījumā anti-HBeAg ir atrodams pacienta asinīs kopā ar HBsAg. Serokonversija, t.i. HBeAg pāreja pret anti-HBeAg, ar hronisku aktīvu hepatītu, biežāk prognozējami labvēlīga, bet tā pati serokonversija nepalielina smago cirozes aknu transformācijas prognozi.
Vīrusu hepatīta B diagnosticēšanai sekojošos gadījumos izmanto asins analīzes, lai noteiktu anti-HBeAg klātbūtni:
Pētījumu rezultātu novērtēšana
Pētījuma rezultāti ir izteikti kvalitatīvi - pozitīvi vai negatīvi. Negatīvs rezultāts liecina, ka serumā nav antivielu pret HBeAg. Pozitīvs rezultāts ir antivielu noteikšana pret HBeAg, kas var norādīt uz akūta vīrusa hepatīta B sākuma stadiju, akūtu infekcijas periodu, atveseļošanās agrīno stadiju, atveseļošanos, nesen pārnesto B hepatītu vai pastāvīgu B hepatītu.
Hroniska B hepatīta klātbūtnes kritēriji ir:
B hepatīta vīrusa noteikšana pēc PCR (kvalitatīvi) t
B hepatīta vīruss parasti nav klāt.
B hepatīta vīrusa kvalitatīvā noteikšana, izmantojot PCR metodi, ļauj apstiprināt vīrusa klātbūtni pacienta organismā un tādējādi nosaka slimības etioloģiju.
Šis pētījums sniedz noderīgu informāciju par akūta vīrusa hepatīta B diagnostiku slimības inkubācijas un agrīnās attīstības stadijās, kad pacienta galvenie seroloģiskie marķieri asinīs var nebūt. Vīrusa DNS serumu konstatē 50% pacientu bez HBeAg. PCR metodes analītiskā jutība nav mazāka par 80 vīrusu daļiņām 5 μl, pēdējais DNS noteikšanas paraugs, specifiskums - 98%.
Šī metode ir svarīga, lai diagnosticētu un uzraudzītu hronisku HBV gaitu. Aptuveni 5-10% cirozes un citu hronisku aknu slimību gadījumu izraisa hronisks B hepatīta vīrusa nesējs, un šādu slimību aktivitātes marķieri ir HBeAg un B hepatīta vīrusa DNS klātbūtne asinīs.
PCR metode ļauj noteikt kvalitatīvi un kvantitatīvi hepatīta B vīrusa DNS asinīs. Noteiktais fragments abos gadījumos ir B hepatīta vīrusa strukturālo proteīnu gēna unikālā DNS secība.
B hepatīta vīrusa DNS noteikšana biomateriālā, izmantojot PCR, ir nepieciešama, lai:
B hepatīta DNS izzušana no asinīm ir terapijas efektivitātes pazīme
B hepatīta vīrusa noteikšana pēc PCR (kvantitatīvs)
Šī metode sniedz svarīgu informāciju par slimības attīstības intensitāti, ārstēšanas efektivitāti un rezistenci pret aktīvajām zālēm.
Lai diagnosticētu vīrusu hepatītu, izmantojot PCR serumā, tiek izmantotas testēšanas sistēmas, kuru jutība paraugā ir 50-100 kopiju, kas ļauj noteikt vīrusu 5 x 10 ^ 3 -10 ^ 4 kopiju / ml koncentrācijā. Vīrusu hepatīta B PCR noteikti ir nepieciešams, lai spriestu par vīrusu replikāciju.
Vīrusa DNS serumu konstatē 50% pacientu bez HBeAg. Asins serums, limfocīti un hepatobiopija var kalpot kā materiāls B hepatīta vīrusa DNS noteikšanai.
- Virēmijas līmeņa novērtējums ir šāds:
- mazāk nekā 2,10 ^ 5 kopijas / ml (mazāk nekā 2,10 ^ 5 SV / ml) - zema virēmija;
- no 2,10 ^ 5 kopijām / ml (2,10 ^ 5 SV / ml) līdz 2,10 ^ 6 kopijām / ml (8,10 ^ 5 SV / ml) - vidēja virēmija;
- vairāk nekā 2,10 ^ 6 kopijas / ml - augsta virēmija.
Pastāv saistība starp akūta vīrusa hepatīta B iznākumu un HBV DNS koncentrāciju pacienta asinīs. Ar zemu virēmijas līmeni infekcijas hronizācijas process ir tuvu nullei, vidēji process tiek hronizēts 25-30% pacientu, un ar augstu virēmijas līmeni akūts B hepatīts visbiežāk kļūst hronisks.
Hroniskas HBV interferona alfa terapijas indikācijas jāuzskata par aktīvas vīrusu replikācijas marķieru klātbūtni (HBV HBV, HBeAg un HBV DNS noteikšana asins serumā pēdējo 6 mēnešu laikā).
Ārstēšanas efektivitātes novērtēšanas kritēriji ir HBEAg un HBV DNS izzušana asinīs, ko parasti papildina transamināžu līmeņa normalizācija un slimības ilgstoša remisija, HBV DNS izzūd no asinīm līdz 5. ārstēšanas mēnesim 80% pacientu. Virēmijas līmeņa samazināšana par 85% vai vairāk līdz trešajai dienai no ārstēšanas sākuma, salīdzinot ar sākotnējo, ir ātrs un diezgan precīzs kritērijs terapijas efektivitātes prognozēšanai.
Vīrusu hepatīta izpēte ar metodi
ELISA vīrusu hepatīta diagnostikā. Enzīmu imūnanalīzes iespējas
Vīrusu hepatīta specifiskā laboratoriskā diagnoze balstās uz imūnķīmisko un molekulāro bioloģisko pētījumu metožu izmantošanu. Galvenās imūnķīmiskās metodes ir radioizotops vai radioimūns (RIA) un imūnanalīze (ELISA). Imūnķīmiskās diagnostikas metodes balstās uz antigēna - antivielas - specifisko mijiedarbību ar vēlāku kompleksa identifikāciju, izmantojot speciālas etiķetes. Visbiežāk sastopamais fermentu imunoloģiskais tests.
Pirmie ziņojumi par fermentu imūnanalīzes izmantošanu. kā vielu noteikšanas metodi 1971. gadā vienlaikus publicēja divas pētniecības grupas - B. Van Weemen, A. Schuurs un E. Engvall, P. Perlmann. Enzīmu imūnanalīzes pamatā ir šāds princips: cietajā fāzē, kurā galvenokārt tiek izmantota polistirola tabletes urbumu virsma, ir fiksēts infekcijas ierosinātāja vai antivielas (bieži vien antivielu maisījums) antigēns, lai konstatētu antigēnus. Šo antigēnu vai antivielas, kas ir fiksētas uz cietās fāzes, sauc par imūnsistēmu.
Imūnsorbenta un testa seruma inkubācijas rezultātā konstatējama līdzekļa klātbūtnē tie ir saistīti ar antigēna-antivielu kompleksu. Pēc mazgāšanas procedūras, kuras laikā tiek noņemti nesaistītie antigēni un antivielas, tiek veikta inkubācija ar konjugātu. Kā konjugāts HBsAg noteikšanai tiek izmantoti anti-HBs, lai konstatētu C hepatīta vīrusa antivielas - antivielas pret cilvēka imūnglobulīniem (antivīrusu konjugāts), kas marķētas ar mārrutku peroksidāzi. Šīs inkubācijas rezultātā notiek saistība ar jau esošajiem antigēnu kompleksiem - papildus ievadītā konjugāta antivielas. Pēc nesaistītā konjugāta (mazgāšanas) noņemšanas substrāts tiek ievadīts akās. Izmantojot peroksidāzes konjugātu, ūdeņraža peroksīdu izmanto kā substrātu kombinācijā ar indikatoru, ko visbiežāk izmanto kā ortofenilēndiamīnu (OPD) vai tetrametilbenzidīnu (TMB). Rezultāts tiek novērtēts fotometriski.
Enzīmu imūnanalīzes metodes analītisko iespēju kvalitāti un uzticamību raksturo vairāki kritēriji, kas ietver jutīgumu, specifiskumu, precizitāti un reproducējamību.
Jutīgums ir minimālais vielas daudzums, ko var noteikt ar fermentu imūnanalīzi. Šajā gadījumā šīs metodes jutīguma zemākā robeža ir testa vielas koncentrācija paraugā, kas atbilst mazākajam pozitīvajam noteikšanas rezultātam, kas statistiski būtiski atšķiras no apzināti negatīvu paraugu rādītājiem. IFTS jutīgums ir atkarīgs no vairākiem apstākļiem, kas saistīti gan ar testēšanas sistēmas konstrukciju (imūnsorbenta afinitāti, ekstrakcijas un buferu sistēmu kvalitāti), gan reģistrācijas metodes izšķirtspēju un precizitāti.
Specifiskums - spēja precīzi noteikt komponentus, kuru noteikšanai šis enzīma imūnanalīze ir izstrādāta. ELISA specifiku lielā mērā nosaka antivielu vai antigēnu (tas ir, imunosorbenta sastāvā izmantotā kompozīcija) krusteniskā reakcija ar tuvu saistītiem savienojumiem, kā arī inkubācijas barotnes sastāvs (matricas efekts).
Pareizība - viena un tā paša kontrolparauga atkārtotu noteikšanu rezultātu vidējās vērtības atbilstība izmērītā parametra patiesajai vērtībai. ELISA noteikšanas precizitāte ir atkarīga no testa sistēmas un kontroles parauga kvalitātes. Labām imunoloģisko analīžu sistēmām pareizības rādītāji ir robežās no 90 līdz 110%. Biomedicīnas pētījumu īpatnība ELISA ir neiespējamība noteikt precīzu vērtību, tāpēc vairāku ekspertu laboratoriju vidējais lielums tiek uzskatīts par patieso vērtību. Precizitātes statistiskais kritērijs ir vidējais aritmētiskais un tā novirzes no patiesās vērtības pakāpe, kas izteikta procentos.
Atkārtojamība - testa sistēmas spēja uzrādīt tādas pašas vērtības ar atkārtotiem viena parauga pētījumiem. Atkārtojamība ir atkarīga gan no nejaušām kļūdām (kļūdām) reakcijas procedūras laikā, gan uz testēšanas sistēmu kvalitāti un rezultātu reģistrēšanas metodes precizitāti. Uzskata, ka viena un tā paša uzņēmuma tādu pašu kontroles paraugu reproducējamība dažādās laboratorijās nedrīkst pārsniegt 15% variācijas koeficienta vērtību.
Vīrusu hepatīta marķieru noteikšanai ir vairākas specifiskas ELISA shēmas: a) tieša imūnanalīze; b) netieša imūnanalīze; c) konkurētspējīga inhibīcija; c) “lamatas” vai “uztveršanas” metode.
No molekulārajām bioloģiskajām metodēm vīrusu hepatīta diagnosticēšanai biežāk tiek izmantota polimerāzes ķēdes reakcija un hibridizācija. Šīs metodes, jo īpaši PCR, ļauj noteikt ļoti mazus specifiskā vīrusa DNS vai RNS daudzumus un līdz ar to arī tiesneša replikāciju un dažos gadījumos replikācijas aktivitāti.
C hepatīta asins analīzes
C hepatīts ir viena no visbiežāk sastopamajām aknu slimībām, kas rodas, inficējoties ar C hepatīta vīrusu (HCV), kas nonāk organismā galvenokārt tad, kad tas nonāk saskarē ar inficētās personas asinīm. Pastāv hronisks un akūts C hepatīts: 70–80% pacientu ar akūtu C hepatītu nav slimības simptomu, tikai dažos gadījumos pēc kāda laika pēc infekcijas ir slimības izpausmes, kas izpaužas kā nogurums, sāpes vēderā, apetītes zudums, tumšums urīns, vemšana, slikta dūša, vieglākas izkārnījumi, dzelte, locītavu sāpes. Parasti simptomi parādās 6-7 nedēļas pēc infekcijas, bet slimības pazīmju parādīšanās ilgums svārstās no 2 nedēļām līdz sešiem mēnešiem. Ja parādās iepriekš minētie simptomi, Jums ir jākonsultējas ar infekcijas slimību ārstiem un jāpārbauda C hepatīta asins analīze. Hepatīta diagnostika, ko veic savlaicīgi, var atklāt slimību agrīnā stadijā un ievērojami palielināt atveseļošanās iespējas.
Kad ir plānots C hepatīta tests
Situācijas, kad ir nepieciešams C hepatīta tests:
- grūtniecības un ģimenes plānošanas laikā;
- pacientiem ar hroniska vai akūta hepatīta simptomiem;
- persona ir pakļauta riskam. Tie ir medicīnas darbinieki, personas cietumā, tiesībsargājošie darbinieki, cilvēki, kas lieto narkotikas, ir liels skaits seksuālo partneru, ir AIDS, ir hemodialīze un citi.
Sagatavošanās C hepatīta analīzei
Speciāls preparāts C hepatīta analīzei nav nepieciešams. Analīzei asinis tiek ņemtas no vēnas tukšā dūšā, tajā pašā laikā pēc pēdējās ēdienreizes jāiet vismaz astoņas stundas.
C hepatīta ELISA testi
Pirmā analīze, kas parasti paredzēta C hepatīta - ELISA testa diagnostikai (ar imūnsistēmu saistītā enzīma analīze). C hepatīta ELISA testi ļauj noteikt C hepatīta vīrusa (anti-HCVAb) antivielu klātbūtni asinīs. Ja ELISA testa rezultāts ir pozitīvs, tad tas norāda uz organisma kontaktu ar C hepatīta vīrusu, bet 40% cilvēku, kuriem ir pozitīva ELISA, vīrusu nespēj noteikt asinīs. Šo parādību sauc par viltus pozitīvu rezultātu. Arī ar ELISA palīdzību pārbauda donora asinis.
RIBA C hepatīta ārstēšanai
Lai apstiprinātu pozitīvu ELISA rezultātu, tiek izmantota C hepatīta RIBA analīze. Rekombinantā imunoblotēšanas metode (RIBA) ir precīzāks pētījums par C hepatīta vīrusa antivielu klātbūtni C hepatīta vīrusa klātbūtne organismā arī nenosaka pozitīvu rezultātu, bet tikai apstiprina antivielu klātbūtni.
C hepatīta PCR testi
Lai noteiktu hepatīta C vīrusu klātbūtni asinīs (HCV RNS) un diagnosticētu, visbiežāk analīzi izmanto polimerāzes ķēdes reakcijas (PCR) metode. Šis pētījums ļauj ar augstu precizitāti noteikt pat neliela vīrusa daudzuma klātbūtni asinīs. C hepatīta PCR analīze var atklāt vīrusa klātbūtni jau 5 dienas pēc infekcijas, ilgi pirms antivielu parādīšanās. Ja PCR analīzes rezultāts ir pozitīvs, tas nozīmē aktīvas infekcijas klātbūtni.
Ir šādas PCR analīzes variācijas:
- kvantitatīvā PCR, kas ļauj noteikt ne tikai vīrusa klātbūtnes faktu, bet arī vīrusa slodzi (vīrusa daudzumu). Šis indikators ir ļoti svarīgs, lai noteiktu ārstēšanas efektivitāti;
- genotipa noteikšana, kas nosaka C hepatīta vīrusa genotipu, kas ir svarīgi, lai noteiktu ārstēšanas ilgumu un taktiku. Ir vairāk nekā 10 hepatīta C vīrusa genotipu, bet klīniskajā praksē pietiek ar pieciem no visbiežāk sastopamajiem veidiem: 1a, 1b, 2,3a / 3b.
Veic kvantitatīvu PCR analīzi:
- ar kvalitatīvu pozitīvu testu C hepatīta vīrusa RNS klātbūtnei serumā;
- precīzu ārstēšanas efektivitātes novērtējumu;
- noteikt pacienta ārstēšanas taktiku.
Nav tiešas saiknes starp C hepatīta smagumu un vīrusa daudzumu asinīs. Vīrusa koncentrācija ietekmē slimības inficētspēju, ti, jo lielāks ir vīrusa daudzums pacienta asinīs, jo lielāks ir vīrusa pārnešanas risks, piemēram, ar seksuālo kontaktu vai no mātes uz bērnu. Arī ārstēšanas efektivitāte ir atkarīga no vīrusa koncentrācijas. Terapijas laikā labvēlīgs faktors ir zema vīrusu slodze, un ļoti augsts ir nelabvēlīgs.
Tiek veikta genotipēšanas analīze:
- ar kvalitatīvu pozitīvu testu C hepatīta vīrusa RNS klātbūtnei serumā;
- precīzu ārstēšanas efektivitātes novērtējumu;
- noteikt pacienta ārstēšanas taktiku;
- prognozēt infekcijas procesa hronizāciju;
- lai noteiktu slimības progresēšanu.
Vīrusa genotipa noteikšana ir ļoti svarīga, lai noteiktu ārstēšanas ilgumu, kas ir svarīgi, jo interferonam ir plašs blakusparādību klāsts un zema pacienta tolerance.
C hepatīta dekodēšanas analīze
Parasti vīrusa RNS, antivielas pret tiem un antigēni nav pilnīgi. Antivielu klātbūtne asinīs norāda uz hroniska vai akūta hepatīta C klātbūtni vai atveseļošanās periodu. Ja asinīs ir HCV RNS, ko nosaka ar PCR analīzi, tas norāda uz vīrusa klātbūtni asinīs.
Ar nepareizu testēšanas metodi, transportēšanu un asins novirzēm, PCR analīze dažkārt var radīt viltus pozitīvus rezultātus. ELISA un RIBA analīzes slimības sākumposmā, kad organisms vēl nav devis pietiekamu antivielu daudzumu, var būt kļūdaini negatīvs rezultāts.
Ja, veicot C hepatīta testa atšifrēšanu, tiek iegūti pozitīvi rezultāti, ir nepieciešams sazināties ar infekcijas slimības ārstu un gastroenterologu turpmākai diagnostikai un ārstēšanai.
Segmentēti neitrofili samazinās
Bērna trombocīti ir normāli, paaugstināti, pazemināti
Vairogdziedzera stimulējošais hormons TGT
Hepatīta diagnostika
Nevar nekavējoties noteikt hepatīta klātbūtni organismā, jo slimības inkubācijas periods var ilgt līdz četrām nedēļām. Kad parādās pirmās slimības pazīmes, skartajā organismā rodas radikālas izmaiņas asins sastāva sastāvā: bioķīmiskā analīze liecina par nopietnu veselības problēmu un patogēnas vīrusa klātbūtni. Tomēr, lai veiktu galīgo diagnozi, nepietiek ar asins nodošanu hepatītam, kā arī detalizētu hepatīta diagnozi.
Laboratoriskā hepatīta diagnoze
Ir vēlams to veikt pēc inkubācijas perioda beigām, lai ārsts ar vislielāko precizitāti varētu noteikt organismā esošo aknu slimību. Pretējā gadījumā noteiktā ārstēšana nedos vēlamo terapeitisko efektu un pat saasinās dominējošo klīnisko attēlu.
A hepatīta diagnostika
Parasti A hepatīta diagnoze sākas ar detalizētu pacienta nopratināšanu un vairāku testu iecelšanu, kas jāveic pēc iespējas ātrāk. Tas ir:
- bioķīmisko asins analīzi;
- pilnīgs asins skaits;
- PCR metode;
- ELISA;
- koagulogramma.
Ja attīstās Botkin slimība, tad pēc bioķīmisko asins analīžu rezultātiem tiek novērota nenormāla bilirubīna, AlAT un AsAT lēkme, timola paraugs. Turklāt tiek ražoti specifiski anti-HAV IgM, kas ir neapstrīdams fakts par A hepatīta klātbūtni.
Kopumā asins analīzi nosaka leikocītu samazināšanās, lēciens ESR un limfocitoze. Tomēr visdrošākais ir PCR metode, kas nosaka patogēna vīrusa RNS rādītāju.
Turklāt ārsts pēta slimības simptomus, pēc tam var veikt galīgo diagnozi un izlauzties līdz efektīvākajai terapijai. Nepieciešamība pēc instrumentālās pārbaudes ir ļoti reta. Pēc veiksmīgas konservatīvas ārstēšanas pacienta hospitalizācijas un karantīnas apstākļos galīgā atveseļošanās gaida, un A hepatīts neatkārtojas vēlreiz.
B hepatīta diagnostika
Lai noteiktu B hepatīta vīrusa klātbūtni, tas ir iespējams arī saskaņā ar laboratorisko pārbaužu rezultātiem, un tāpēc pirmais ir nepieciešams, lai ziedotu asinis hepatīta ārstēšanai. Pēc patogēno vīrusu ir trīs galvenie antigēni - HBsAg, HBcAg un HBeAg, kuriem organismā rodas antivielas. Šī klīniskā attēla galvenā iezīme ir ELISA - ELISA, kas tikai atklāj specifiskus B hepatīta marķierus.
Tūlīt jāprecizē, ka antigēns HBsAg parādās asinīs pat pirms pirmajiem hepatīta simptomiem un ir ticami noteikts ledus periodā. Tomēr negatīvs tests neizslēdz B hepatīta klātbūtni, un tāpēc nepieciešams izmantot tikpat efektīvu polimerāzes ķēdes reakcijas (PCR) metodi.
Ja Jums ir aizdomas, ka B hepatīts ir obligāts, ir bioķīmisks asinsanalīze, ko ieteicams iziet pirmajā vietā. Veicot aknu biopsiju un peritoneālo orgānu ultraskaņu, tiek apspriests atsevišķi, bet, kad slimības vēsture ir ļoti skaidra, klīniskās pārbaudes metodes nav nepieciešamas.
Aknu ehogramma autoimūnā hepatītā hroniska hepatīta stadijā
C hepatīta diagnostika
Lai veiktu šo diagnozi, nepietiek ar asins nodošanu hepatītam, jo vīruss var dominēt ķermenī latentā formā. Un tomēr galvenās laboratorijas pārbaudes ir visas iepriekš minētās analīzes, kā arī aknu biopsijas papildu rezultāti. Šī bioloģiskā materiāla mikroskopiskā pārbaude (mūsu gadījumā - aknu audu gabals) nosaka patoloģiskā procesa un audu fibrozes apmēru. Materiālu paraugu ņemšana notiek vietējā anestēzijā, šādas procedūras sarežģījumi medicīnas praksē ir ļoti reti.
Ja ir aizdomas par C hepatītu, galvenā klīniskās pārbaudes metode ir peritoneālo orgānu ultraskaņa. Iemesls ir vienkāršs: slimība bieži izpaužas kā redzes pārmaiņas skartajās aknās, tās struktūras un lieluma izmaiņas. Tādā veidā jūs varat noteikt:
- aknu, liesas, aizkuņģa dziedzera un žultspūšļa lielums;
- patoloģiskas izmaiņas šajos orgānos;
- vispārējā asins plūsma peritoneālās orgānos;
- optimāla vieta aknu biopsijas veikšanai.
Šī klīniskās pārbaudes metode nosaka visas orgāna fokusa patoloģijas mikroskopiskā līmenī. Ja aknas ir attēlotas pelēkā mērogā, nepieciešama tūlītēja biopsija, jo pelēkā krāsa vizualizē “cilvēka filtra” audus.
Hepatīta profilakse
Tā kā slimība neparādās uzreiz, tas ir tālu no visiem klīniskajiem attēliem, kas tiek veikti nekavējoties. Pacientam vienkārši nav zināms par patogēna vīrusa esamību organismā, kas savukārt strauji izplatās asinsritē un inficē veselas aknu šūnas.
Lai izvairītos no šāda traģiska likteņa, ieteicams ievērot visus preventīvos pasākumus. Šāda modrība ievērojami samazinās saslimstības risku un saglabās jūs no nopietnām veselības problēmām nākotnē. Tālāk ir izklāstīti profilakses pamatnoteikumi:
- nomazgājiet rokas pēc ielas;
- pakļaut augstas kvalitātes svaigiem dārzeņiem un augļiem;
- veikt visas profilaktiskās vakcinācijas, kas norādītas gada kalendāra plānā;
- selektīva attieksme pret seksuālajiem partneriem;
- izvairīties no saskares ar slimiem cilvēkiem;
- izmantot tikai vienreizējās lietošanas šļirces un būt īpaši modriem asins pārliešanas stacijās.
Tāpat ieteicams regulāri (reizi sešos mēnešos) nodot asinis hepatīta ārstēšanai, lai pārliecinātos, ka vīruss neietekmē organismā, un neinficē vienreiz veselas aknu šūnas. Ja diagnoze ir noteikta, tai nekavējoties jākļūst par ārsta kontu un jāievēro visi speciālista ieteikumi.
Publikācijas autors:
Syropyatov Sergejs Nikolaevich
Izglītība: Rostovas Valsts medicīnas universitāte (Rostovas Valsts medicīnas universitāte), Gastroenteroloģijas un endoskopijas katedra.
Gastroenterologs
Medicīnas zinātņu doktors