C hepatīta kvalitatīvā analīze

2017. gada 8. marts, 12:29 Ekspertu raksti: Nova Vladislavovna Izvčikova 0 10 547

Polimerāzes ķēdes reakcijas kvalitatīvā analīze - C hepatīta PCR nosaka HCV klātbūtni vai neesamību organismā. Laboratorijas apstākļos tiek pētīta RNS struktūra, kas ietver vīrusu. Vīrusa C atklāšanas gadījumā nepieciešams veikt ārstēšanas kursu, jo novārtā atstātās aknu stāvoklis radīs smagas sekas. Pēc reģenerācijas tiek veikta augstas kvalitātes PCR, lai apstiprinātu antivielu neesamību. Iecelts un regulāri pārbauda. Tā kā asinsķermenīšu koncentrācija asinīs ir zema, PCR (kvalitatīvs) neko nevar atklāt, jo diagnostikas sistēmai ir savi jutīguma sliekšņi. Sākotnējā slimības stadijā vai vieglā formā PCR veic ultradiagnostika ultra-jutīgās iekārtās.

Kas ir RNS vīruss?

C hepatīta vīrusa (vai C hepatīta vīrusa RNS) termins RNS ir pati aknu slimība. Vīruss C saistās ar veselīgu ķermeņa šūnu, iekļūstot tajā. Laika gaitā, izplatoties visā ķermenī, ir nepieciešams tikai nokļūt asinīs. Rezultātā patogēns iekļūst aknās, drošina savas šūnas un darbojas smagi. Aknu šūnas (hepatocīti) darbojas tās ietekmē, mainās, un no tā viņi mirst. Jo ilgāk vīruss C ir aknās, jo lielāks ir šūnu skaits. Laika gaitā attīstās bīstamas slimības, kas izraisa ļaundabīgu deģenerāciju un nāvi.

Aknu infekcija ar šāda veida vīrusu var izpausties ārēji. Daudzus gadus vai gadu desmitus inficētā persona jūtas pilnīgi veselīga, un tikai nejauša pārbaude visbiežāk atklāj patoloģiju. Ziedojot asinis hepatīta gadījumā, tiek pārbaudīta daļa no RNS (ribonukleīnskābes) ķēdes, kas ir daļa no cilvēka gēna (DNS). Laboratorijas testu rezultātus nevajadzētu izmantot pašapstrādei, jo tas ir tikai indikators. Precīzu attēlu un turpmāko diagnozi labāk nosaka ārsts.

Kad tas ir izdarīts: pētījuma indikācijas

Apstiprinot HCV, tiek veikta PCR analīze (polimerāzes ķēdes reakcija). PĶR pētījumi palīdz atrast RNS struktūras izraisītāju un izrakstīt efektīvu terapiju. Iecelts šādos gadījumos:

• aknu iekaisuma pazīmju noteikšana;
• skrīninga pētījumi profilaksei;
• kontaktu pārbaude;
• jauktas izcelsmes hepatīta diagnoze (galvenā patogēna noteikšana);
• noteikt vīrusa reproduktīvās aktivitātes līmeni hroniskā formā;
• aknu ciroze;
• noteikt noteiktās ārstēšanas efektivitāti.

Pētījuma PCR nosaka ārstu, lai noteiktu hepatīta ārstēšanas kursa efektivitāti.

Ir kvalitatīva un kvantitatīva PCR analīze. Kvantitatīvais PCR parāda RNS procentuālo daudzumu ar vīrusa nesējiem asinīs, un kvalitatīvs norāda uz vīrusu klātbūtni vai neesamību. Pozitīvam kvalitātes rādītājam (C hepatīta RNS klātbūtnei) ir vajadzīgs arī kvantitatīvs pētījums. C hepatīta izraisītāja augsts koncentrācijas līmenis ir saistīts ar tā pārnešanas risku, tas ir, citu infekciju. Zemie numuri ir labāk ārstējami. RNS vīrusu daudzums asinīs nav saistīts ar slimības intensitāti. PCR analīze tiek veikta arī interferona terapijas gadījumā, lai noteiktu ārstēšanas kursa ilgumu un sarežģītību.

C hepatīta augstas kvalitātes PCR analīzes iezīmes

Kvalitatīvai analīzei ir piešķirts polimerāzes ķēdes reakcijas indikators visiem pacientiem, kuriem ir asins C hepatīta antivielas. Ieteicams veikt hepatīta B analīzi, tad pozitīva secinājuma gadījumā un par hepatītu D. Arī kvalitatīvi analizēta reakcija jāveic kopā ar citām asins analīzēm. Analīzēs tiks parādīts pilnīgs vīrusu izplatīšanās attēls.

No testa rezultātiem ir redzams vai negatīvs tikai pozitīvs C hepatīta tests, tas ir, vīrusa klātbūtne vai neesamība. Ja izeja ir "atklāta", tad vīruss ir un joprojām ir aktīvs. Apzīmējums "nav atklāts" norāda uz vīrusa trūkumu vai tā nelielo daudzumu. Ar šo rādītāju jāatceras, ka diagnostisko sistēmu analītiskā jutība ir atšķirīga un ka RNS hepatīts C joprojām var būt asinīs, bet tas nav izpaužas analīzē.

Īpaši jutīga PCR metode atklāj ļoti hepatītu C pat nelielos daudzumos. Tiek izmantots fluorescences hibridizācijas pētījums, kas ir daudzkārt lielāks nekā standarta PCR sistēmas. Šo metodi izmanto vairākos gadījumos:

• iespējamas C hepatīta slēptās formas;
• PCR diagnostika neapstiprināja patogēnu, bet ir antivielas;
• atgūšanas gadījumā;
• lai atklātu agrīnu infekciju.

Atpakaļ uz satura rādītāju

Dekodēšanas analīze

HCV PCR dekodēšana ietekmē galīgo lēmumu, veicot diagnozi, jo īpaši ar ultrametodu. Šā pētījuma galvenais trūkums ir stingri ievērot parauga un materiālu sterilos apstākļus. Neliela novirze dažkārt rāda neprecīzus analītiskus secinājumus, sarežģī diagnozi un turpmāku ārstēšanu. PCR analīze hepatīta RNS noteikšanai ne vienmēr pārliecinoši parāda slimības attēlu, dažreiz ir pieļautas neprecizitātes un abos virzienos.

Diagnozējot hepatīta vīrusu, ieteicams izmantot visaptverošu pārbaudi.

Rādītāju norma

Analizējot polimerāzes ķēdes reakciju, pētījuma rezultātos JgM antivielu trūkums pret C hepatītu ir uzskatāms par normu. Vienlaikus seroloģiskās analīzes rezultāti liecina par C vīrusa antivielu klātbūtni, un tas ir arī normālā diapazonā. Kvalitatīvā definīcija neliecina par slimības intensitāti, tā atklāj tikai C hepatīta izraisītāju RNS. Šo analīzi atkārto pēc apstrādes, lai apstiprinātu faktisko reģenerāciju.

Novirzes

Ja ir klāt JGM antivielas pret HCV RNS, tas norāda uz attīstības infekciju. Vienlaikus slimība notiek akūti vai hroniski, kas izpaužas dažādos posmos. Ja tiek reģistrēta antivielu skaita samazināšanās, analīze liecinās, ka ārstēšanas rezultāti tika sasniegti atveseļošanās laikā. Diagnostikā ir ļoti reti viltus pozitīvi konstatējumi. Tās ir sastopamas sievietēm grūtniecības laikā un cilvēkiem ar citām infekcijas slimībām.

C hepatīta asins analīzes un PCR izmaksas

C hepatīts ir iekaisuma patoloģija, kas ietekmē aknu šūnas. Slimība attīstās C hepatīta vīrusa (HVC) iekļūšanas rezultātā cilvēka organismā.

Slimības forma var būt akūta vai hroniska.

Visbiežāk vairumā pacientu nav akūtu patoloģijas simptomu, dažreiz slimība ir saistīta ar sāpīgām vēdera sajūtām, samazinātu veiktspēju, palielinātu nogurumu, apetītes zudumu, tumšu nokrāsu ar urīnu, izkārnījumu krāsas maiņu, ādas dzeltenumu un gļotādu, locītavu sāpes. Šādi simptomi parasti parādās 6-8 nedēļas pēc infekcijas, bet var parādīties pēc sešiem mēnešiem.

Attīstoties šādām parādībām, ir jāsazinās ar medicīnas iestādi un jāveic visaptveroša visa organisma pārbaude. Kā daļu no medicīniskās apskates veic asins analīzi C hepatīta ārstēšanai.

Šodien, izmantojot mūsdienīgas diagnostikas metodes, šo patoloģiju var identificēt attīstības sākumposmā, kas ievērojami palielina slimības pilnīgas izārstēšanās iespējas.

C hepatīta testēšanai ir nepieciešamas šādas cilvēku grupas:

• sievietes bērna nēsāšanas laikā;
• personām ar hepatīta pazīmēm;
• medicīniskais personāls;
• potenciālie orgānu un asins donori;
• narkomāni, HIV inficētas personas, netraucēta intīma dzīve.

Nepieciešamo pētījumu saraksts

Kādi testi jāveic C hepatīta ārstēšanai? Lai precīzi diagnosticētu slimību, noteiktu tās cēloņus un noteiktu aknu parenhīmas stāvokli, ir jāveic šādi pētījumi:

• vispārējie urīna un asins analīžu rezultāti;
• asins bioķīmiskā analīze;
• PCR analīze;
• asins analīzes, lai noteiktu HVC antivielas;
• asins analīzes par pieejamajām antivielām pret savām aknu šūnām;
• aknu biopsija.

C hepatīta asins analīzes atšifrēšanu veic speciālists. Apsveriet katru pētījumu metodi sīkāk, kā arī sapratīsim, kura C hepatīta analīze ir visprecīzākā.

Vispārēja analīze

Veicot pilnu C hepatīta asiņu skaitu, Jūs varat novērtēt pacienta stāvokli. Asins parametru izmaiņas netiek uztvertas kā specifiski hepatīta simptomi, tomēr ar šo slimību pastāv šādi traucējumi:

• samazinās hemoglobīna, trombocītu un leikocītu koncentrācija;
• palielina limfocītu saturu;
• tiek pārkāpts asins recēšana;
• palielinās eritrocītu sedimentācijas ātrums (ESR).

Vispārējā urīna analīze ļauj noteikt tās sastāvā urobelīnu - žults pigmentu, kas notiek urīnā, jo traucēta aknu darbība.

Bioķīmiskā analīze

C hepatīta asins bioķīmiskā analīze ļauj identificēt šādus traucējumus:

• paaugstināts aknu enzīmu līmenis (alanīna transamināze - ALT un aspartāta aminotransferāze - AST), kas iekļūst asinīs, kad tiek bojāti hepatocīti. Normālos apstākļos šie rādītāji vīriešiem nedrīkst būt lielāki par 37 SV / l sievietēm - ne vairāk kā 31 SV / l. Palielināta ALT un AST koncentrācija asimptomātiskā C hepatīta gadījumā bieži ir vienīgā šīs slimības pazīme. Turklāt palielinās glutamila transpeptidāzes sārmainās fosfatāzes līmenis (parasti nepārsniedz 150 SV / l).
• tiek pārsniegts bilirubīna (gan vispārējā, gan tiešā) saturs asinīs. Ja dzeltenā pigmenta līmenis serumā pārsniedz 27-34 µmol / l, rodas dzelte (līdz 80 µmol / l vieglā formā, 86-169 µmol / l vidēji smagi, virs 170 µmol / l smagā formā).
• Samazinās albumīna līmenis, palielinās gamma globulīnu koncentrācija. Gamma globulīni sastāv no imūnglobulīniem - antivielām, kas aizsargā organismu pret slimībām izraisošām vielām.
• paaugstināta triglicerīdu koncentrācija asinīs.

PCR tests

Izmantojot PCR tehniku, ir iespējams diagnosticēt slimības izraisītāju. Veicot šo analīzi, ir iespējams noteikt vīrusu, pat ja tā daudzums ir minimāls. C hepatīta PCR analīze ļauj noteikt esošās infekcijas asinīs jau pēc 5 dienām no infekcijas brīža, ti, ilgi pirms antivielu parādīšanās.

Ja C hepatīta asins analīzes rezultāts ar PCR ir pozitīvs, tas norāda uz aktīvas infekcijas klātbūtni organismā. Izmantojot šo metodi, jūs varat veikt kvalitatīvu un kvantitatīvu HVC RNS izpēti.

C hepatīta PCR kvalitatīvās analīzes laikā cilvēka organismā ir iespējams konstatēt esošo vīrusu.

Šī diagnostikas procedūra tiek veikta, ja asinīs tiek atklāts anti-HVC.

C hepatīta analīzes atšifrēšana satur informāciju, ka infekcija ir atklāta vai nav atklāta organismā. Parasti asinīs nav patoloģisku vielu.

Ja C hepatīta tests ir pozitīvs, tas nozīmē, ka patogēns nepārtraukti sadala un inficē aknu šūnas.

Šīs analīzes rezultāti var būt neuzticami, tas ir iespējams šādos gadījumos:

• izmantoto piesārņoto biomateriālu;
• heparīna klātbūtnē asinīs;
• ķīmisko vai olbaltumvielu (inhibitoru) klātbūtnē pētītajā biomateriālā, kas ietekmē PCR elementus.

C hepatīta kvantitatīvā analīze sniedz informāciju par vīrusa daudzumu asinīs, tas ir, nosaka vīrusu slodzi. Ar šo jēdzienu saprot HVC RNS daudzumu asinīs (piemēram, 1 ml). C hepatīta kvantitatīvās analīzes interpretācijā šī vērtība tiek izteikta digitālā ekvivalentā, mērot SV / ml.

Pirms terapeitiskiem pasākumiem tiek ņemta asins PCR attiecībā uz C hepatītu. Pēc analīzes veic 1, 4, 12 un 24 nedēļas. Pētījums 12. nedēļā ir indikatīvs un tiek veikts, lai novērtētu terapeitisko procedūru efektivitāti.

Ja C hepatīta tests grūtniecības laikā ir pozitīvs un vīrusa slodzes vērtības ir pārsniegtas, patogēnu pārnešanas risks no slimo mātes uz bērnu palielinās vairākas reizes. Arī ar paaugstinātu vīrusu slodzi ir grūti īstenot terapeitiskos pasākumus.

Saskaņā ar C hepatīta testu aprakstu, ja vīrusa slodzes vērtības pārsniedz 800 000 SV / ml, tad tas ir augsts. Ja skaitļi ir mazāki par 400 000 SV / ml, vīrusu slodzes līmenis tiek uzskatīts par zemu.

C hepatīta analīze ar PCR tiek uzskatīta par visprecīzāko, un tai ir vairākas priekšrocības salīdzinājumā ar citām pētniecības iespējām, proti:

• slimības izraisītāja tieša diagnoze. Veicot tradicionālos pētījumus, nosaka proteīnu marķieru klātbūtne, kas ir patogēnu atkritumi. Tas tikai norāda, ka infekcija ir asinīs. Testējot C hepatītu, izmantojot PCR, ir iespējams noteikt bīstamās patoloģijas patogēna veidu.
• tehnikas specifiku. Šīs procedūras laikā biomateriālā tiek noteikts unikāls DNS reģions, kas atbilst tikai vienam patogēna veidam. Tas samazina viltotu rezultātu iespējamību.
• augsta jutība. Veicot PCR analīzi, varat noteikt minimālo vīrusa daudzumu. Tas ir svarīgi, ja tiek identificētas nosacīti patogēnas vielas, kas rada draudus tikai tad, ja to līmenis palielinās.
• Izmantojot šo metodi vienā biomateriāla paraugā, uzreiz var noteikt vairākus patogēnus.
• var atklāt slēptās infekcijas. Turklāt analīze ļauj diagnosticēt patogēnos mikroorganismus, kas dzīvo šūnu iekšienē un kuriem ir augsts antigēnu mainīgums.

Ja testa rezultāti ir pozitīvi, tad biomateriālā atrodami vīrusa pēdas, tad tīklā ir infekcija organismā.

Negatīva C hepatīta PCR analīze liecina, ka biomateriālā nav infekcijas pēdu.

Imunoloģiskais pētījums

Šī metode ļauj identificēt antivielas pret visiem hepatīta vīrusa veidiem, kā arī antivielas pret Jūsu ķermeņa aknu šūnām, kuru izskats veicina autoimūnu hepatītu.

Pētījuma laikā iegūtie rezultāti ir nozīmīgi 3 mēnešus, pēc tam Jums vajadzētu atkārtoti ziedot C hepatītu.

Ir iespējams veikt arī eksprespētījumu, izmantojot īpašas teststrēmeles. Šī analīze ļauj noteikt antivielas pret C vīrusu asinīs un siekalās, ko var veikt neatkarīgi, mājās.

Aknu biopsija

Lai veiktu šo analīzi, tiek veikts aknu parenhīmas elements un veikta iegūto biomateriālu histoloģiskā pārbaude. Tas ļauj novērtēt ķermeņa stāvokli: identificēt iekaisuma, nekrotiskos fokusus, fibrozes stadiju utt.

Šodien tiek izmantoti testi, kas aizstāj histoloģisko analīzi aknu parenhīmai.

Lai novērtētu aknu bojājumu stadiju un iekaisuma procesa intensitāti, tiek izmantoti specifiski venozās asins biomarkeri. Izmantojot Fibrotest, varat novērtēt šķiedru audu augšanas pakāpi.

Veicot Actitest, jūs varat iegūt informāciju par patoloģisko procesu intensitāti aknu parenhīmā. Steatototesta lietošana var diagnosticēt aknu taukaudus un novērtēt šī procesa apjomu. Fibromax sastāv no visiem iepriekšminētajiem testiem un var ietvert dažus citus pētījumus.

Sagatavošanās pētījumam

Kādi testi tiek veikti attiecībā uz C hepatītu un kā mēs esam noskaidrojuši šo vai šāda veida pētījumus. Tikpat svarīgi ir zināt, kā sagatavoties analīzei.

Lai iegūtu ticamus rezultātus, ieteicams ievērot šādas prasības:

• C hepatīta testi jāveic rīt, tukšā dūšā. Pēdējā laikā pārtika jālieto vismaz 8 stundas pirms pētījuma.
• Biomateriālu var savākt dienas laikā vai vakarā. Šajā gadījumā ir svarīgi, lai starp pēdējo maltīti un analīzi būtu vismaz 5-6 stundas.
• pirms asins nodošanas C hepatītam, tēja, kafija, sula vai citi dzērieni jāiznīcina, atļauts tikai ūdens.
• 48 stundas pirms pētījuma ir jāizslēdz tauku, ceptu pārtikas produktu un alkohola saturošu dzērienu lietošana.
• vismaz stundu pirms analīzes jums ir jāatturas no smēķēšanas.
• analīzi nevajadzētu veikt tūlīt pēc ultraskaņas, instrumentālās, rentgena pārbaudes, masāžas sesijas vai fizioterapijas.
• vienu dienu pirms pētījuma īstenošanas nepieciešams izslēgt narkotiku lietošanu un intensīvu fizisko aktivitāti. Emocionālais stress ir arī kontrindicēts.
• Pirms pētījuma veikšanas mierīgā stāvoklī ieteicams pavadīt 15 minūtes.

Veicot asins savākšanas procedūru

Kur iegūt C hepatīta testu? Biomateriāls tiek ņemts tālākai izmeklēšanai medicīnas iestādes laboratorijā vai pacienta mājās.

Asinis no vēnas tiek ņemtas šādi:

• izmantojot īpašu tūbiņu, kas ietīts ap pacienta apakšdelmu, venozās asins plūsma tiek pārtraukta. Pateicoties šādām manipulācijām, vēnas tiks piepildītas ar asinīm un būs redzamākas, kas ievērojami atvieglos adatas ievietošanu.
• āda, kurā adata tiks ievietota, uzmanīgi apstrādā ar spirtu vai alkoholu saturošu šķidrumu.
• Adatu maigi ievieto vēnā, pēc tam piestiprina mēģeni, kas īpaši paredzēta asins savākšanai.
• Tūlīt pēc tam, kad adata ir ievietota vēnā, saspiešanas siksnas tiek noņemtas no pacienta rokas.
• pēc tam, kad ir savākta analīzei nepieciešamā asins daudzums, adatu viegli noņem no vēnas.
• Injekcijas vietai jānovieto sterils vates tampons vai marle, kas samitrināta ar spirtu.
• Lai izvairītos no hematomas rašanās, tampons ar nelielu piepūli jāpiestiprina pret adatas ievietošanas zonu, saliekt rokas pie elkoņa locītavas un turiet to šādā stāvoklī vairākas minūtes. Šādas darbības palīdzēs arī ātrāk apturēt asinis.

Ja iekšējās lietošanas tehnika ir laba, šī procedūra ir pilnīgi droša un nerada sāpīgas sajūtas.

Retos gadījumos pēc asins savākšanas vēnas var uzbriest. Šo parādību sauc par "flebītu". Kompresija (nav karsta) palīdzēs atrisināt problēmu, tā jālieto uzbriedušām ādas vietām vairākas reizes dienā.

Dažas problēmas var rasties arī tad, ja ir asiņošanas traucējumi. Aspirīna, varfarīna un citu asins šķīdinātāju lietošana var izraisīt asiņošanu. Tāpēc pirms analīzes veikšanas ir jāatsakās veikt jebkādas zāles. Ja ārstēšanu nevar atcelt, par to jāinformē speciālists.

Datumi un cenas

Cik daudz tiek pārbaudīts attiecībā uz C hepatītu? Hepatīta asins analīzes rezultāti var būt gatavi dažu stundu laikā un pēc dažām dienām (parasti ne vairāk kā 8 dienas). Rezultātu sagatavošanas ilgums ir atkarīgs no vīrusa veida un izvēlētās analīzes metodes. Ātrāk ir pētījums ar PCR metodi. Šajā gadījumā rezultāti būs gatavi tikai dažu stundu laikā.

Cik maksā C hepatīta testa izmaksas? Atkarībā no klīnikas un pētījuma sarežģītības, procedūras cena var svārstīties no 400 līdz 11 000 rubļu.

Jums jāapzinās, ka HVC antivielu veidošanos var aizņemt vairākas nedēļas. Tāpēc patoloģijas attīstības sākumposmā pētījuma rezultāts var būt viltus negatīvs.

Turklāt neuzticamu datu iegūšana ir iespējama ar sliktas kvalitātes analīzi un iegūto biomateriālu transportēšanas nosacījumu pārkāpumu (paraugi jāpiegādā laboratorijā ne vairāk kā 2 stundas pēc asins paraugu ņemšanas).

Ja pētījuma rezultāts ir pozitīvs, nekavējoties sazinieties ar infekcijas slimību ārstu. Speciālists veiks papildu pārbaudi un noteiks atbilstošu ārstēšanu.

C hepatīta PCR diagnostika

C hepatīts ir aknu šūnu iekaisums, kas rodas, inficējoties ar HCV vīrusu (C hepatīts), saskaroties ar inficētās personas asinīm. Flavivīrusa HCV ģenētisko kodu vada RNS (ribonuclenic acid) molekula, kas atrodas vīrusa struktūrā. Šī dzīvībai bīstamā parādība atšķiras ar noslēpumu patoloģijas sākumposmā. Laika intervāls starp infekciju un simptomu rašanos (imūnsistēmas reakcija) var būt no viena mēneša līdz sešiem mēnešiem. Parasti slimība ir hroniska un to ir grūti izārstēt.

Mūsdienu medicīna ļauj diagnosticēt patoloģiju ar nelieliem aknu bojājumiem. Visizplatītākās un efektīvākās diagnostikas metodes ietver PCR analīzi. Šajā rakstā apsveriet, kas tas ir un kādi ir tā veidi.

Kas ir pētījums

C hepatīta PCR analīze ir laboratoriska izmeklēšana, kas atklāj ribaviru, kas ir ribonuklēnskābes (RNS) ģenētiskais materiāls. Tas nosaka RNS molekulu skaitu asinīs, bioloģiskā materiāla kvalitāti, HCV vīrusa ģenētisko tipu.

C hepatīta PCR metode ļauj konstatēt minimālo flavīrusa daudzumu pirms antivielu veidošanās, parasti pēc inficēšanās.

Pētījumu bieži dēvē par RNS analīzi, jo tā atklāj flavavīrusa ribonukleīnskābes daļiņas ar izmēru 30-60 nm.

Pētījums tiek veikts šādi: tukšā dūšā pacients dod asinis no vēnas, ko pēc tam pārbauda ar dažādām metodēm:

• Reālā laika PCR tiek veikts slēgtā automatizētā veidā un tam ir zemāks RNS vīrusa noteikšanas limits, kas vienāds ar 15 SV / ml;
• COBAS AMPLICOR ar jutību 50-100 SV / ml.

Jo augstāks ir diagnostikas metodes jutīguma slieksnis, jo lielākas ir iespējas atrast zemāko vīrusa saturu pētāmajā bioloģiskajā materiālā.

Kāda veida analīzes izmanto

Analīzi, kas veiksmīgi izmantota jau vairākus gadu desmitus, sauc par PCR hepatītu, un to var viegli un ātri noteikt. Medicīnā ir divas reakcijas metodes, kas būtiski atšķiras viena no otras:

• kvalitatīvā metode atklāj konkrēta vīrusa ģenētiskā avota klātbūtni bioloģiskajā materiālā;
• kvantitatīvā analīze nosaka ģenētiskā materiāla skaitu, kas ļauj noteikt patoloģijas stadiju vai novērtēt terapeitiskā kursa efektivitāti;
• genotipa noteikšana nosaka organisma klātbūtnes veidu.

Kopumā asins analīzes palīdz noteikt virēmijas raksturu un patogēna ģenētisko tipu. Parasti pētījumi tiek veikti 1 reizi atkarībā no diagnostikas sistēmas jutības pakāpes. Ja nepieciešams, atkārtotu pārbaudi veic, izmantojot ultrasensīvu reaģentu.

Augstas kvalitātes PCR

Kas ir augstas kvalitātes PCR RNS C hepatītam? Reakcijas būtība ir hepatīta RNS sekvences klātbūtnē, un reakcija ir iespējama tikai ar līdzīgu etimoloģiju saturošu vīrusu proteīnu klātbūtnē ELISA. Salīdzināšanas procesā tiek konstatēta slodze un iespējamais aknu zonas bojājums.

Šīs metodes īpatnība ir spēja noteikt pat atsevišķa gēna klātbūtni.

Jāatzīmē, ka pēc PCR un ELISA testu rezultātu saņemšanas pacientam ir nepieciešama atbilstoša ārstēšana neatkarīgi no tā, kāds bija galīgais imunoloģiskās analīzes rezultāts. Pozitīvs norāda uz infekciju, un PCR negatīvs norāda uz samazinātu vīrusu daļiņu skaitu attiecībā pret jutības līmeni.

Ir vairāki apstākļi, kas ietekmē negatīva PCR un ELISA ražošanu:

• piemērotu materiālu savākšanas apstākļu trūkums;
• iegūtā analīze satur piesārņojumu;
• ja pacientam tiek veikta agrīna heparīna injicēšana.

Pacientam nav jāievēro daži noteikumi par asins paraugu ņemšanu PCR analīzei, šajā gadījumā šīs analīzes kvalitāte ir atkarīga no medicīnas speciālista, kas veic procedūru. Spēja noteikt slimības klātbūtni (īpaši akūtā formā) parādās dažu nedēļu laikā pēc infekcijas.

Kvantitatīvā analīze

Vīrusu slodzes noteikšanai tieši pirms turpmākās terapijas veidošanās un ķermeņa reakcijas ieteicams veikt kvantitatīvu testu. Asins paraugu ņemšanas process tiek veikts līdzīgi kā ar augstas kvalitātes PCR un ELISA, vienīgais nosacījums ir pacienta smēķēšanas trūkums pirms procedūras.

Attiecībā uz datiem, kas iegūti, pētot datus, palielināto slodzi raksturo rādītāji no 800000 SV / ml, zems - 400000 SV / ml. Vīrusa klātbūtne pacienta organismā ir norādīta ar PCR hepatīta gadījumā nav negatīvs kvalitatīvs tests.

Šāda veida pētījumi ļauj noteikt, cik bīstams pacients ir ap viņu apkārtējiem cilvēkiem. Piemēram, augsta līmeņa noteikšana norāda uz paaugstinātu pacienta inficētspēju. Turklāt analīzes rezultāti palīdz formulēt turpmāko visefektīvāko ārstēšanu un noteikt, cik liela ir esošā terapija.

Ātrā negatīvā reakcija uz testiem liecina par izvēlētās tehnikas panākumiem, un lēni norāda uz nepieciešamību veikt pielāgojumus un izmantot daudzpusīgu apstrādi.

Analīzes procedūras veikšanas process ir atkarīgs no konkrētās slimības norises dienas. Pirmā noteikšana tiek veikta pirmajā dienā pēc pacienta uzņemšanas slimnīcā, tad procedūra tiek atkārtota 4, 12 un 24 nedēļās pēc zāļu lietošanas.

Tādējādi kvantitatīvā analīze parāda, kura ārstēšana ir visefektīvākā, pieejamā terapijas ilgums un pacienta briesmas attiecībā pret citiem cilvēkiem.

Genotipēšana

Materiālu analīzes pētījumā ir svarīgi noteikt vīrusa genotipa precizitāti, kas notiek. Pašlaik ir 11 C hepatīta vīrusa šķirnes, kas savukārt ietver noteiktas pasugas.

Visas šīs sugas atšķirīgi reaģē uz dažādām ārstēšanas metodēm, un atsevišķas šķirnes ir absolūti izturīgas pret daudzām zālēm.

Genotips ļauj noteikt un parādīt aknu stāvokli. Nav nekas neparasts, ka rezultāti ir „nav tipizēti”, kas nozīmē, ka ar šo testu sistēmu vīruss pacienta asinīs netiek konstatēts. To var noteikt, ja konkrētais genotips neatbilst šai zonai. Šādā situācijā analīze tiek veikta atkārtoti, un materiāla izpētei tiek izmantota jutīgāka sistēma.

Ļoti jutīga metode

Ultrasensitīvā metode ir nepieciešama dažos gadījumos, kad hepatīta diagnozi nevar veikt ar citām metodēm, tajā pašā laikā, kad analīzi izdara ārstējošais ārsts:

• ja Jums ir aizdomas par C hepatīta vīrusa klātbūtni pacientiem, kuriem ir slēpta slimības klase;
• antivielu pret C hepatīta vīrusu klātbūtne, kas nav apstiprināta ar PCR diagnostiku;
• lai noteiktu izvēlētās ārstēšanas metodes efektivitātes kvalitāti un apstiprinātu slimības likvidēšanu.

Šīs metodes jutīgums ir daudz augstāks nekā parasti izmantotais, tomēr šī metode neizslēdz viltus rezultātu iegūšanu, gan pozitīvus, gan negatīvus. Šādā situācijā ir svarīgi kontrolēt procedūras kvalitāti un paša materiāla inficēšanās iespēju.

PCR analīzes skaidrojums

Analīzes dekodēšana tiek veikta, pamatojoties uz iesniegtajiem materiāliem, bet laboratorijas pētījumu rezultāti ietver dažus iepriekš aprakstītos datus.

Transkripts var ietvert pozitīvu PCR polimerāzes ķēdes reakciju un negatīvu ELISA testu, kas nozīmē, ka pacientam asinīs nav C hepatīta pazīmju, bet agrāk viņš ir pārnesis slimības akūtu formu. Parasti, diagnosticējot, speciālisti izmanto PCR testu indikatorus.

Apkopojot visu iepriekš minēto, var secināt, ka analīzes laikā ir svarīgi ievērot visus noteikumus un ieteikumus, lai iegūtie rezultāti būtu pēc iespējas precīzāki, un, pamatojoties uz iegūtajiem datiem, ir iespējams noteikt izmantotās terapijas efektivitāti un turpmākās atgūšanas iespējas.

PCR analīzes veikšana attiecībā uz C hepatītu un rezultātu dekodēšana

C hepatīta PCR analīze ir pētījums, kura galvenais mērķis ir identificēt izraisītāja ģenētisko materiālu. Analīze atklāj slimības izraisītāju, izmantojot polimerāzes ķēdes reakciju. Šai diagnozei ir augsta precizitātes pakāpe, specifiskums, lai noteiktu vīrusu infekcijas neesamību vai klātbūtni.

Diagnozes būtība

Lai veiktu PCR analīzi C hepatīta vīrusa noteikšanai no pacienta, tiek ņemta vēnu asinis, kas potenciāli satur vēlamā vīrusa HCV (ribonukleīnskābi).

C hepatīta PCR tests ietver procedūru pacienta asins daļiņu pievienošanai:

• gruntis (īstermiņa mākslīgi sintezēti nepieciešamā gēna reģioni);
• īpašs enzīms (RNS polimerāze).

Pēc paraugu ņemšanas bioloģiskais materiāls tiek nosūtīts pētniecībai laboratorijā. Vienai daļai asiņu ir nepieciešama tiešai PCR analīzei, otru nosūta testēšanai ar ELISA. Enzīms īsā laikā spēj palielināt patogēna vīrusa ģenētiskā materiāla skaitu. Īpašā aparātā tiek veikti vairāki siltuma un dzesēšanas procesu cikli. Noslēguma posmā iegūtais materiāls tiek salīdzināts ar vīrusa gēniem un izdarīts secinājums par patoloģijas esamību vai neesamību pacienta organismā.

PCR analīzes būtība un vadība laboratorijā. Filmēts Sibīrijas medicīniskajā laboratorijā.

Pētījumu veidi

Ir 3 diagnostikas veidi, kas ļauj noteikt C hepatīta vīrusa klātbūtni cilvēka organismā:

• genotipizēšana;
• kvalitāte;
• kvantitatīva.

Kvalitatīvā metode

C hepatīta diagnosticēšana ar kvalitatīvu metodi ir piemērojama pacientiem, kuriem asins analīzē konstatētas antivielas pret vīrusu. HCV RNS akūtās fāzes klātbūtnē šādi diagnostikas pasākumi var noteikt slimības klātbūtni 1-2 nedēļu laikā pēc inficēšanās. Šajā laikā antivielas pret C hepatītu vēl nav iespējams attīstīt.

Kvantitatīvā metode

Lai noteiktu vīrusa koncentrāciju asins paraugos, tiek izmantota kvantitatīva diagnostikas metode. Šāds virēmijas tests (koncentrācijas pakāpe) ļauj precīzi noteikt vīrusu RNS vienību skaitu. Galarezultāts ir izteikts atbilstošajā apjomā. Ja runājam par kvantitatīvu analīzi, tad rādītājus mēra 1 ml (1 kubs Cm).

Vīrusu slodzes parametrs ir slimības infekciozitātes līmenis, tas ir, tas atspoguļo pacienta "infekcijas" pakāpi. Praksē tas nozīmē, ka jo lielāks ir vīrusa koncentrācijas līmenis asinīs, jo lielākas iespējas pacientam inficēt citus ar C hepatītu. Kvantitatīvā pētījuma metode arī ļauj noteikt ārstēšanas kvalitāti un efektivitāti.

Genotipēšana

Genotipēšana atklāj slimības izraisītāja mutācijas. Pirms ārstēšanas plāna izrakstīšanas nosaka vīrusa genotipu: no tā atkarīga ārstēšanas kvalitāte un ilgums. Piemēram, I tipa slimības ārstēšanā efektivitāte ir 60%, II gadījumā - III tipa - apmēram 80%.

Hepatīta PCR analīzes priekšrocības

Viena no galvenajām procedūras priekšrocībām ir:

1. Iespēja agrīnai diagnostikai. PCR analīze spēj noteikt vīrusa klātbūtni infekcijas agrīnā stadijā.
2. Zems kļūdu rezultāts. Pētītais bioloģiskais resurss ļauj diagnosticēt ģenētiskā materiāla daļu, kas raksturīga tikai vienam vīrusu infekcijas veidam. Šis apstāklis ​​ļauj novērst viltus diagnostikas rezultātus.
3. Augsta jutīguma pakāpe. PCR analīze spēj noteikt vīrusa RNS nelielos daudzumos, kas arī ļauj izsekot latentās infekcijas laikā.

Norādes

Nepieciešams veikt C hepatīta PCR testēšanu, ja tas ir pieejams:

• saskarē ar slimiem cilvēkiem, kas var izraisīt infekciju;
• aknu cirozes simptomi (liesas palielināšanās, neraksturīgas izmaiņas aknu lielumā, vēnas plexus atklāšana uz vēdera zem ādas);
• pozitīvi ELISA rezultāti;
• paaugstināta AST un ALT aktivitāte (izpaužas asins bioķīmiskajā analīzē);
• nepieciešamību kontrolēt pretvīrusu terapijas veikšanu;
• ārstēšanas sākumposms, lai noteiktu vīrusu slodzi;
• veikt galīgo terapijas posmu, lai izslēgtu iespējamās atkārtošanās;
• pacientam ir B hepatīts, lai izslēgtu jauktu aknu bojājumu attīstību.

Kā sagatavoties asins ziedošanai PCR pētījumiem

Sagatavošanās PCR analīzei ietver šādus ieteikumus:

• asinis tiek ņemtas no rīta;
• analīze tiek veikta tukšā dūšā, tāpēc ir ieteicams pārtraukt starp pēdējo pārtikas devu 8-10 stundām;
• dažas dienas pirms diagnozes izslēdziet taukainus, pikantus un ceptus ēdienus, alkoholiskos dzērienus un smēķēšanu;
• vienu dienu pirms analīzes vajadzētu atturēties no smagas fiziskas slodzes, izslēgt nodarbības sporta zālē vai peldbaseinā.

Analīzes rezultāti: normas un novirzes

Analīze pati par sevi nav ilgtermiņa, un augsti kvalificēts speciālists hepatologs vai infekcijas slimību speciālists atšifrē C hepatīta PCR rezultātus. Pamatojoties uz analīzes rezultātiem, tiek diagnosticēts pacients.

Lai pareizi izskaidrotu aptaujas rezultātus, tās ņem vērā rādītājus:

• asins bioķīmiskā analīze;
• ultraskaņas dati;
• biopsijas rezultāti.

Kvantitatīvās analīzes interpretācija

Iegūstot PCR kvantitatīvās analīzes rezultātus, ņem vērā šādus rādītājus:

C hepatīta vīrusa PCR analīze

C hepatīts ir nopietna aknu slimība jebkurai personai. Patoloģiju izraisa flavivīruss HCV, kura struktūrā ir klāt RNS molekula, kurā ir vīrusa vispārējais ģenētiskais kods.

Patoloģija var būt dažāda veida, viss tieši atkarīgs no personas vispārējā stāvokļa un katra atsevišķa organisma īpašībām.

Šī struktūra ļauj analizēt PCR, lai noteiktu C hepatīta kategorijas vīrusa klātbūtni organismā.

Tas ļauj laicīgi identificēt vīrusu, kas ir bīstams cilvēkiem, iziet narkotiku ārstēšanas kursu un atjaunot veselību, aizsargājot organismu no aknu iznīcināšanas.

HCV vīruss var izpausties gan akūtā, gan bīstamā veidā un hroniski. Ja cilvēks vienā vai citā laikā ir atklājis šo vīrusu, tam jāpiešķir PCR analīze.

Kāpēc tiek veikta PCR analīze?

Pamatojoties uz analīzes rezultātiem, ārsts varēs sagatavot ārstēšanas shēmu.

C hepatīta PCR laboratoriskā medicīniskā analīze ir pētījums par bioloģisko materiālu, kas ņemts, lai noteiktu flavavīrusu. Pētījums apzīmē polimerāzes ķēdes reakciju.

Tas parāda vīrusa bojājuma kopējo kvantitatīvo vērtību, tā kvalitatīvās īpašības, kā arī ir iespējams noteikt RNS saturošā vīrusa genotipu.

Tas ir svarīgi! Pamatojoties uz šo analīzi, ārsts nosaka metodi, terapijas veidu un ilgumu. Turklāt, veicot analīzi, ir iespējams noteikt vispārējo epidemioloģisko faktoru, tas ir, slimības pārnešanas risku citiem pārvadātājiem.

Mūsdienu medicīnas analīzi sauc arī par RNS analīzi. Iemesls tam ir C hepatīta flavavīruss, ko veido RNS daļiņa, kuras lielums ir aptuveni 30-60 nm. Viens no šīs vīrusa raksturīgajiem raksturlielumiem ir noteikta tendence uz mutāciju.

Katrai klātbūtnei vai genotipam piemīt dažādas pretestības. Šis apstāklis ​​kļūst par pamatu dažādām slimības izpētes un ārstēšanas metodēm, kā arī turpmāka prognoze ar labi vadītu terapiju.

Kā to darīt

Analīzi veic stingri tukšā dūšā, ti, pirms brokastīm tiek dota venozā asinis. Testēšanas metode tiek veikta, izmantojot Real-Time PCR vai ļoti jutīgu, izmantojot mūsdienu standartu diagnostiku, kas tiek veikta reālā laikā.

Apakšējā noteikšanas robeža šajā gadījumā ir 15 SV / ml. Analīze tiek veikta, izmantojot slēgtas automatizētas sistēmas. C hepatītu var noteikt, izmantojot tādus testus kā COBAS AMPLICOR ar kopējo jutības līmeni 50-100 SV / ml.

Tas ir svarīgi! Visu veidu līdzīgi mūsdienu laboratorijas pētījumi tiek veikti, ņemot vērā noteiktu jutības slieksni.

Mēs runājam par reaģenta spēju noteikt reaģenta minimālo spēju noteikt vīrusu pētāmā bioloģiskajā materiālā. Ja organismā nav slimības, pētījuma rezultāts izskatīsies kā “nav atrasts”.

Attēlā parādīta PCR analīzes shēma:

PCR analīzes veidi un to rezultāti

Ja jums ir sīkākās slimības un sāpes sīkdatņu jomā, nekavējoties jākonsultējas ar ārstu, kurš veiks rūpīgu pētījumu. C hepatīta PCR analīze balstās uz trim galvenajiem punktiem:

1. Kvantitatīvā analīze.
2. Kvalitatīvā analīze.
3. Genotipēšana

Veiktie testi sniedz iespēju noteikt un noteikt precīzu virēmijas raksturu un dažādus ģenētiskā plāna simptomus, kas saistīti ar patogēna klātbūtni. Tieši proporcionāli jutīgumam no veiktās diagnostikas sistēmas medicīnisko izpēti var veikt vienu reizi, kā arī dažus apstiprinājumus.

Tas jādara, lai precizētu iepriekš iegūtos rezultātus, un šajā gadījumā to izmanto jutīgāks reaģents.

Augstas kvalitātes PCR

PCR kvalitatīva analīze ir vēl viens nosaukums pētījumam, piemēram, polimerāzes ķēdes reakcijai. Ar testa standarta jutību, kas ļauj noteikt vīrusa mikrobu klātbūtni, indikatori būs robežās no 10-500 SV / ml.

Ar negatīvu slimības analīzi analīze parādīs, ka kopējā koncentrācijas pakāpe pacienta asinīs būs mazāka par vispārējo jutības slieksni diagnostikas sistēmai.

Ja kvalitatīvā PCR laikā tika iegūta „neatklāta” atbildes reakcija, turpmākai ārstēšanai jums būs jāzina reaģenta kopējā jutības slieksnis. Attiecībā uz pozitīvo reakciju PCR analīzes laikā to var iegūt jau 4. dienā pēc infekcijas. Standarta proteīna frakcijas līdz konstatētajiem flavavīrusiem var parādīties daudz vēlāk.

Vispārējo PCR analīzes shēmu var attēlot šādi:

Kvantitatīvais PCR

Kvantitatīvais PCR ir īpašs iegūto vīrusu slodzes rādītājs, kas atspoguļo vīrusa RNS koncentrācijas kopējo līmeni cilvēka organismā. Šis indikators parāda vīrusu RNS enzīmu daudzumu, kas atrodas uz kubikcentimetru, kas ņemts no asins vēnas.

Šī pētījuma rezultāti medicīniskās izpētes sistēmā apzīmēti ar vienu mililitru vienībām. Uz sertifikātiem, kas izsniegti rokās, šis rādītājs var izskatīties kā 1,7 miljoni vai 1,700 000 SV / ml.

Kvantitatīvā PCR analīze tiek piešķirta šiem pacientiem pirms pretvīrusu terapijas veikšanas. Otro reizi notiek 12. ārstēšanas nedēļā, kas ļauj pareizi novērtēt C hepatīta terapijas rezultātus. Citiem vārdiem sakot, analīze ļauj noteikt tādus svarīgus parametrus kā:

1. Tiek noteikts inficētspējas līmenis, tas ir, mikrobu pārraides riska pakāpe no inficētās personas uz veselīgu cilvēku. Jo augstāka ir flavavīrusa RNS koncentrācija, jo lielāka ir citas personas infekcijas varbūtība, kas ir svarīga seksuālajās attiecībās.
2. Kopējais efektivitātes līmenis un izvēlētā ārstēšanas metode.
3. Tā ir ideāla iespēja noteikt pretvīrusu terapijas ilgumu un prognozi. Kā likums, jo lielāks slodze, jo ilgāk ārstēšana ilgs.

Ir vērts zināt, ka kvantitatīvā PCR ir atkarīga no konkrētā laboratorijas testa veida un jutīguma sliekšņa. Noteiktā standarta zemākā robeža ir rādītājs, kas nesasniedz 600 000 SV / ml.

Vidējais ir robežās no 600 000 līdz 700 000 SV / ml. Ja rezultāti tika iegūti virs 800 000 SV / ml, ārsts nekavējoties nosaka augstu vielas koncentrācijas līmeni, piemēram, RNS ar sastāvā esošo vīrusu.

Tas ir svarīgi! Tieša saikne starp HCV RNS līmeni un slimības smagumu norāda, ka šis vīruss atrodas kopējā asins sastāvā, un norāda arī uz patoloģijas sarežģītību. Pacientam var būt pietiekami augsta vīrusu slodze. Turklāt šī saikne norāda, ka šūnām ir diezgan nopietni bojājumi.

Genotipēšana

Sakarā ar relatīvi augsto HCV mutācijas aktivitāti dabā, veicot testēšanu, ir iespējams noteikt, kā vīrusa veids ir slims personas asinīs. Mūsdienu medicīnā ir zināmi 11 vīrusa genotipi, piemēram, C hepatīts, kas ietver diezgan lielu skaitu dažādu pasugas vai apakštipu.

1,2 un 3 veidi Krievijā ir pazīstami un bieži sastopami, kopumā genotipēšana ir ļoti svarīgs veiktās analīzes elements. Ar to ārsts saprot patoloģijas rezistences līmeni vai pretestību izvēlētajām zālēm.

Gandrīz vienmēr, pamatojoties uz šo analīzi, tiek veidota turpmākā ārstēšana. Tas ir svarīgi, jo pastāv tādi ārstēšanas noteikumi kā:

C hepatīta PCR analīze

C hepatīts iziet no akūta uz hronisku 80% gadījumu. Patogēnu vīrusu replikācija funkcionālās aknu šūnās izraisa orgānu disfunkciju. Tas ir saistīts ar to, ka parenhīma audi tiek aizstāti ar saistaudu. Rezultātā pacienta vēsture ir papildināta ar asiņošanu kuņģa-zarnu traktā, ķermeņa intoksikāciju, asins recēšanas problēmām. Tāpēc tiek diagnosticētas agrākās patoloģiskās izmaiņas, jo lielākas ir pacienta atgūšanās iespējas. C hepatīta PCR analīze tiek uzskatīta par visprecīzāko pētījumu metodi.

Šo diagnostikas metodi drīkst veikt vairākas dienas pēc inficēšanās. Polimerāzes ķēdes reakcija var droši noteikt vīrusa genotipu un koncentrāciju asinīs. Lai veiktu analīzi, pacientam tiek ņemts bioloģisks materiāls, kurā var būt cēlonis RNS.

C hepatīta PCR tiek veikta trīs posmos:

• Kvalitatīvā analīze - to lieto patogēna ģenētiskā materiāla noteikšanai.
• Kvantitatīvie pētījumi - tādējādi atklāj vīrusu slodzi.
• Genotipēšana - šajā posmā ārsts atpazīs slimības veidu.

Šī metode tika izstrādāta pirms apmēram 30 gadiem. To lieto daudzu infekcijas slimību diagnosticēšanai. PCR ļauj atklāt unikālu ģenētisko materiālu. Lai to izdarītu, izmantojiet gruntus. Tā sauktie RNS virzieni, kas ir pievienoti gēna sākumam.

Rezultātā patogēnu vīrusu fragmentu skaits tiek reizināts. Katra fāze prasa īpašu temperatūras režīmu un noteiktu laika periodu. DNS molekula veidojas 3 minūšu laikā. Pastiprināšana ietver apmēram 30 ciklus. PCR tiek veikta laboratorijā, izmantojot speciālu aprīkojumu.

Norādes par iecelšanu

PCR analīze var būt saistīta ar C hepatīta klīnisko simptomu klātbūtni. Procedūra ir paredzēta cilvēkiem, kuri:

• sazinājās ar inficētu personu;
• cieš no akūtas un hroniskas aknu slimības;
• tiek ārstētas parenhīmas audu patoloģiskām izmaiņām;
• ir apdraudēti;
• ir asins un tā sastāvdaļu donori.

PCR veic ne tikai ar C hepatītu. Analīzi izmanto medicīnā, bioloģijā, kriminālistikā. Konkrētu rādītāju noteikšana - stadija, kas nepieciešama narkotiku shēmu izvēlei.

Analīzes priekšrocības

Diagnostiskās pārbaudes shēmā ietilpst imunofluorescences analīze un PCR. Izmantojot pirmo, varat noteikt imūnglobulīnu koncentrāciju. Šīs vielas ražo aizsargmehānisms pēc patogēnu vīrusu iekļūšanas organismā. Atšķirībā no PCR, ELISA inkubācijas periodā nav efektīva. Izmantojot polimerāzes ķēdes reakciju, C hepatītu var konstatēt pirmajās 7 dienās pēc inficēšanās.

Šim klīniskajam pētījumam ir šādas īpašības:

• Nepareiza rezultāta minimālā varbūtība.
• Augsta efektivitāte.
• Specifiskums.
• Jutīgums.
• Daudzpusība.
• Automatizējiet procesu.
• Drošība
• Rādītāju iegūšanas ātrums.

Vienīgais PCR trūkums ir tā tehniskā sarežģītība. Tas ir saistīts ar to, ka ārstam ir jāizvēlas pareizais nukleotīdu sastāvs, kura funkcijas ir DNS sintēze. Tā kā metodes jutīgums ir palielinājies, ir iespējams iegūt viltus pozitīvus vai viltus negatīvus rezultātus.

Lai sasniegtu nozīmīgu rādītāju precizitāti, bioloģiskais materiāls tiek rūpīgi iztīrīts no narkotikām un olbaltumvielu savienojumiem. Lai apstiprinātu rezultātu, ir nepieciešams salīdzināt iepriekš pārbaudītos paraugus. Faktori, kas izraisa kļūdu, ir šādi:

Paraugu ņemšanas tehnikas analīzes pārkāpums

• Analīzes metodes pārkāpums.
• Izmaiņas RNS fragmentu secībā.
• Sintēzes nukleotīdu un patogēnu vīrusu gēnu sakritība.

C hepatīta viltus rezultāta iegūšanas varbūtība ir iespējama, jo nav iespējams noteikt slimības ģenētisko pamatu. PCR diagnostika var tieši identificēt patogēnu. Izmantojot DNS amplifikāciju, patogēni tiek atklāti pārtikā, ūdenī un augsnē.

Šīs metodes ierobežojumi nemazina tās efektivitāti un popularitāti. Klīniskie pētījumi tiek veikti regulāri. Tādējādi ārsts var novērtēt veikto ārstēšanas pasākumu efektivitāti. Tas ir nepieciešams, jo C hepatīta vīruss spēj mutēt. Pozitīvas ietekmes neesamība nozīmē vīrusa pielāgošanu lietotajām zālēm.

Sagatavošanās piegādei

Lai veiktu polimerāzes ķēdes reakciju pacientam, kas cieš no C hepatīta, tiek ņemta vēnu asinis. Parasti pētījumam ir nepieciešamas divas bioloģiskās vielas daļas. Ar vienu, PCR tiek veikta tieši, bet otrs tiek nosūtīts uz imunoloģisko analīzi.

Asins PCR analīzei, kas ņemta no vēnas

Sagatavošana ir svarīga. Pacients ziedo asinis PCR vakarā tukšā dūšā. Dažas dienas pirms procedūras būs jāatsakās no kaitīgas pārtikas, alkohola, nikotīna un narkotikām. Pacientam jāizvairās no seksuāla kontakta, pārmērīga fiziskā un emocionālā stresa. Baseins un trenažieru zāle ir aizliegta. Jebkurā gadījumā būs nepieciešams sagatavoties.

Ir īpašas norādes par medikamentiem. Tas attiecas uz antibiotikām un antidepresantiem. Sievietēm, kuras ir sākušas menstruāciju, vajadzētu atlikt C hepatīta testēšanu. Kolposkopija ir arī iemesls atteikumam.

Norādītie noteikumi ir diezgan vienkārši. Pateicoties tiem, jūs varat sasniegt šīs diagnostikas metodes maksimālu uzticamību. Atšifrēt rezultātus jābūt speciālistam. Patstāvīgi tos interpretēt pacientam, visticamāk, neizdosies.

Analīzes process

PCR diagnostika ir šāda:

Asinis tiek ievietotas termostatā.

• Pirmkārt, ņemiet bioloģisko materiālu. Asinis tiek ievietotas sterilizētās ierīcēs. Nepieciešamais tilpums nepārsniedz 1-1,5 ml. Uzglabāt asinis un tā sastāvdaļas nedrīkst būt ilgākas par 24 stundām. Uzglabāšanas temperatūra nedrīkst pārsniegt 4 grādus pēc Celsija.
• Pēc klīniskā pētījuma uzsākšanas. Sagatavotās asinis ievieto termostatā kopā ar amplifikācijas maisījumu. Parasti nepieciešama ne vairāk kā 25 ml īpaša sastāva. Pastiprināšana tiek veikta automātiski vairākas stundas.
• Paralēli veiciet kontroles testus. Lai to izdarītu, izmantojiet veselīgu cilvēku bioloģiskos materiālus. Tas palīdzēs izvairīties no viltotiem rezultātiem.
• Rādītāju dekodēšana un reģistrēšana. Ģenētisko materiālu konstatē, izmantojot etīdija bromīdu. Specifiskā efekta dēļ DNS fragmenti ir izcelti. Vīrusa klātbūtne (neesamība) atklājas, koncentrējoties uz šīm tabulām.

Dekodēšanas rezultāti

Šo rādītāju vērtību var noteikt tikai infekcijas slimību speciālists un hepatologs. PCR analīze tiek ievadīta diagnostikas kompleksā kopā ar bioķīmiskām asins analīzēm, ultraskaņu, ELISA un biopsiju. Diagnoze tiek veikta, pamatojoties uz visiem rezultātiem. Testu dekodēšanas procedūra ir atkarīga no diagnostiskās pārbaudes stadijas.

PCR pirmajā posmā pozitīvs testa rezultāts ir patogēnu vīrusu DNS fragmentu noteikšana. Veicot kvantitatīvo analīzi, nosaka vīrusu slodzes līmeni. Tas var būt zems (mazāk nekā 8 * 10 ^ 5 SV / ml), vidēja (no 8 * 10 ^ 5 SV / ml), augsts (vairāk nekā 2,4 * 10 ^ 7 SV / ml). Specifisko antivielu un vīrusa RNS daļiņu neesamība tiek uzskatīta par normu (negatīvs rezultāts). Genotipēšanas stadijā konkrēta genotipa RNS norāda uz infekciju.

Saņemot pozitīvu rezultātu, pacientam tiek noteikts efektīvs terapijas režīms. Tajā pašā laikā jāņem vērā informācija par vīrusa klātbūtni asinīs, tā aktivitātes pakāpi un genotipu. Procedūras cena ir atkarīga no testēšanas metodes, bioloģiskā materiāla veida. Izmaksas, kas saistītas ar asins vai citu šķidrumu lietošanu, var pievienot kopējām izmaksām. Pēdējais ir saistīts ar to, ka patogēns bieži tiek atrasts urīnā, izkārnījumos un spermā.