B hepatīta PCR analīze

Hepadnaviridae ģimenes DNS vīruss ir tiešs hepatīta B izraisītājs. B hepatīta PCR analīze ļauj konstatēt inficētas DNS vīrusa klātbūtni pacienta asinīs. Pozitīva HBV DNS tipa rezultāts liecina par infekcijas klātbūtni pacienta asinīs. Jāatzīmē, ka diagnoze, izmantojot PCR analīzi, ļauj ne tikai noteikt infekcijas klātbūtni, bet arī tā kvantitatīvo slodzi un aktivitāti. Šī metode ir uzticama, precīza un reproducējama. HBV DNS kvantitatīvo noteikšanu ar qPCR var izmantot HBV terapijas efektivitātes uzraudzībai un ir noderīga, lai izprastu HBV dabisko vēsturi endēmiskā zonā.

Infekcijas process ar B hepatītu notiek, izmantojot vietējo vai seksuālo kontaktu - tiešā saskarē ar inficētām asinīm. Pēc inficēšanās vīruss nonāk aknu šūnās, kurā tā turpina aktīvo reprodukciju. Caur asinsriti patogēnas šūnas izplatījās visā ķermenī. Jāatzīmē, ka B hepatīta šūnas ir ļoti izturīgas pret skābi un augstu temperatūru. Viņš sešus mēnešus spēj saglabāt savas kaitīgās īpašības.

B hepatīta PCR veidi

Līdz šim ir noteikti divi diagnostikas veidi, ja ir aizdomas par B hepatīta vīrusa klātbūtni: kvalitatīvs PCR (ļauj noteikt ar vīrusa klātbūtnes 100% precizitāti asinīs) un kvantitatīvo PCR (ļauj noteikt vīrusa aktivitātes pakāpi).

Ja ir aizdomas par HBV infekciju, tiek noteikta augstas kvalitātes PCR vai ja citas diagnostikas metodes nav devušas skaidrus rezultātus. Šāda veida PCR analīze ir ļoti viegli atšifrējama: negatīvs (asinīs nav konstatēts vīruss), pozitīvs (vīruss konstatēts asinīs). Kvalitatīvās analīzes galvenais uzdevums ir noteikt inficēto šūnu klātbūtni slimības sākumposmā. Ja vīruss tika diagnosticēts divas nedēļas pēc iespējamās infekcijas, ārstēšanas efektivitāte būs daudz lielāka. Ja vīruss asinīs ir apmēram divi mēneši, slimība kļūst hroniska, tādēļ to nevar pilnībā izārstēt.

Ja kvalitatīva diagnoze apstiprina HBV klātbūtni asinīs, ārsts nosaka kvantitatīvu analīzi.

Kvantitatīvā analīze ļauj noteikt vīrusa attīstības aktivitāti pacienta organismā. Šāda veida PCR analīze ir piešķirta:

• noteikt slimības stadiju;
• uzraudzīt lietotās terapijas efektivitāti;
• noteikt vīrusa rezistences līmeni pret konkrētu narkotiku;
• narkotiku izvēlei.

Vīrusa kvantitatīvie rādītāji asinīs tiek mērīti SV uz mililitru vai DNS uz mililitru.

Ja ārsts nekavējoties nosaka kvantitatīvu diagnozi, nekontrolējot kvalitāti, tad ātrums ir 75 SV / ml. Ja tiek konstatētas mazākas starptautiskas vienības, rezultāts ir tāds, ka HBV netiek atklāts, kad skaitļi ir virs normālā, tiek diagnosticēts vīrusu hepatīta B klātbūtne.

Kvantitatīvās diagnozes interpretācija

Sekojoši rādītāji (kopijās / mililitros) tiek uzskatīti par normām CRP hepatīta B gadījumā: mazāk nekā 10 3 - neaktīvs vīruss; no 10 līdz 10 5 - vīruss parasti ir neaktīvs; 10 - aktīvais vīruss; 7 7 - vīruss augstā darbības posmā.

Pamatojoties uz kvantitatīvajiem rādītājiem, ar 100% precizitāti var noteikt slimības formu (nesējs, akūta vai hroniska), vīrusa reakciju uz ārstēšanu, nepieciešamību pēc papildu diagnostikas.

B hepatīta hroniskā forma ir noteikta, ja vīrusa aktivitāte ir 10,5 kopijas uz mililitru. Pārvadātājs tiek diagnosticēts, ja rādītāji ir mazāki par 10 5 kopijām mililitrā.

Ārstēšanas laikā ir nepieciešams regulāri (reizi trijos mēnešos) atkārtot kvantitatīvo diagnostiku, lai ņemtu vērā laiku, kad vīruss attīstās imunitāte pret lietotajām zālēm, un mainīt metodi. Ja visi pētījumi ir veikti pareizi un ir izvēlēta efektīva ārstēšana, atkārtota analīze (pēc trīs ārstēšanas dienām) parādīs patogēnu šūnu aktivitātes samazināšanos par vismaz astoņdesmit pieciem procentiem.

Aknu biopsiju veic tikai tad, ja sešu mēnešu ārstēšana ir parādījusi, ka ALT līmenis ir divreiz lielāks nekā normāli, un PCR diagnostika liecina par zemāku nekā 10 5 kopiju uz vienu mililitru asins.

Sagatavošanās aptaujai

Analīzei ir nepieciešamas vēnas asinis. Lai iegūtu visprecīzākos rezultātus, ir nepieciešams sagatavoties procedūrai: atteikties ņemt pārtiku vismaz astoņas stundas pirms asins savākšanas; divas dienas atteikties no narkotiku lietošanas (ir obligāti jābrīdina ārsts par zāļu lietošanu); pirms asins nodošanas jums ir jāpavada 20 minūtes atpūtas režīmā; Divpadsmit stundas pirms procedūras atdodiet sporta vingrinājumus, alkoholiskos dzērienus, smēķēšanu un ēšanas taukus.

Ir svarīgi: ja diagnoze ir nepieciešama bērnam, kas jaunāks par pieciem mēnešiem, tad viņam ir jāsniedz glāze vārīta ūdens ik pēc desmit minūtēm pirms sešdesmit minūtēm pirms asins savākšanas procedūras.

Apkopojot

Šodien hepatīta B PCR analīze ir visprecīzākā metode vīrusa diagnosticēšanai. Šī metode ļauj noteikt mutācijas un slēptās slimības formas, diagnosticēt slimību pirmajās infekcijas dienās, lai izvēlētos visefektīvāko ārstēšanu. Laboratorijas palīgs salīdzina analīzes rezultātus ar normu un pēc tam tos nonāk pie secinājuma. Dati tiek apstrādāti divu nedēļu laikā. Lai saņemtu nodošanu PCR analīzei, ir jāsazinās ar hepatologu, infekcijas slimību speciālistu vai virologu. Ir svarīgi atcerēties, ka, jo ātrāk nokļūsiet pie ārsta, jo ātrāk tiks iegūti rezultāti, jo efektīvāka būs ārstēšana.

C hepatīta asins analīzes un PCR izmaksas

C hepatīts ir iekaisuma patoloģija, kas ietekmē aknu šūnas. Slimība attīstās C hepatīta vīrusa (HVC) iekļūšanas rezultātā cilvēka organismā.

Slimības forma var būt akūta vai hroniska.

Visbiežāk vairumā pacientu nav akūtu patoloģijas simptomu, dažreiz slimība ir saistīta ar sāpīgām vēdera sajūtām, samazinātu veiktspēju, palielinātu nogurumu, apetītes zudumu, tumšu nokrāsu ar urīnu, izkārnījumu krāsas maiņu, ādas dzeltenumu un gļotādu, locītavu sāpes. Šādi simptomi parasti parādās 6-8 nedēļas pēc infekcijas, bet var parādīties pēc sešiem mēnešiem.

Attīstoties šādām parādībām, ir jāsazinās ar medicīnas iestādi un jāveic visaptveroša visa organisma pārbaude. Kā daļu no medicīniskās apskates veic asins analīzi C hepatīta ārstēšanai.

Šodien, izmantojot mūsdienīgas diagnostikas metodes, šo patoloģiju var identificēt attīstības sākumposmā, kas ievērojami palielina slimības pilnīgas izārstēšanās iespējas.

C hepatīta testēšanai ir nepieciešamas šādas cilvēku grupas:

• sievietes bērna nēsāšanas laikā;
• personām ar hepatīta pazīmēm;
• medicīniskais personāls;
• potenciālie orgānu un asins donori;
• narkomāni, HIV inficētas personas, netraucēta intīma dzīve.

Nepieciešamo pētījumu saraksts

Kādi testi jāveic C hepatīta ārstēšanai? Lai precīzi diagnosticētu slimību, noteiktu tās cēloņus un noteiktu aknu parenhīmas stāvokli, ir jāveic šādi pētījumi:

• vispārējie urīna un asins analīžu rezultāti;
• asins bioķīmiskā analīze;
• PCR analīze;
• asins analīzes, lai noteiktu HVC antivielas;
• asins analīzes par pieejamajām antivielām pret savām aknu šūnām;
• aknu biopsija.

C hepatīta asins analīzes atšifrēšanu veic speciālists. Apsveriet katru pētījumu metodi sīkāk, kā arī sapratīsim, kura C hepatīta analīze ir visprecīzākā.

Vispārēja analīze

Veicot pilnu C hepatīta asiņu skaitu, Jūs varat novērtēt pacienta stāvokli. Asins parametru izmaiņas netiek uztvertas kā specifiski hepatīta simptomi, tomēr ar šo slimību pastāv šādi traucējumi:

• samazinās hemoglobīna, trombocītu un leikocītu koncentrācija;
• palielina limfocītu saturu;
• tiek pārkāpts asins recēšana;
• palielinās eritrocītu sedimentācijas ātrums (ESR).

Vispārējā urīna analīze ļauj noteikt tās sastāvā urobelīnu - žults pigmentu, kas notiek urīnā, jo traucēta aknu darbība.

Bioķīmiskā analīze

C hepatīta asins bioķīmiskā analīze ļauj identificēt šādus traucējumus:

• paaugstināts aknu enzīmu līmenis (alanīna transamināze - ALT un aspartāta aminotransferāze - AST), kas iekļūst asinīs, kad tiek bojāti hepatocīti. Normālos apstākļos šie rādītāji vīriešiem nedrīkst būt lielāki par 37 SV / l sievietēm - ne vairāk kā 31 SV / l. Palielināta ALT un AST koncentrācija asimptomātiskā C hepatīta gadījumā bieži ir vienīgā šīs slimības pazīme. Turklāt palielinās glutamila transpeptidāzes sārmainās fosfatāzes līmenis (parasti nepārsniedz 150 SV / l).
• tiek pārsniegts bilirubīna (gan vispārējā, gan tiešā) saturs asinīs. Ja dzeltenā pigmenta līmenis serumā pārsniedz 27-34 µmol / l, rodas dzelte (līdz 80 µmol / l vieglā formā, 86-169 µmol / l vidēji smagi, virs 170 µmol / l smagā formā).
• Samazinās albumīna līmenis, palielinās gamma globulīnu koncentrācija. Gamma globulīni sastāv no imūnglobulīniem - antivielām, kas aizsargā organismu pret slimībām izraisošām vielām.
• paaugstināta triglicerīdu koncentrācija asinīs.

PCR tests

Izmantojot PCR tehniku, ir iespējams diagnosticēt slimības izraisītāju. Veicot šo analīzi, ir iespējams noteikt vīrusu, pat ja tā daudzums ir minimāls. C hepatīta PCR analīze ļauj noteikt esošās infekcijas asinīs jau pēc 5 dienām no infekcijas brīža, ti, ilgi pirms antivielu parādīšanās.

Ja C hepatīta asins analīzes rezultāts ar PCR ir pozitīvs, tas norāda uz aktīvas infekcijas klātbūtni organismā. Izmantojot šo metodi, jūs varat veikt kvalitatīvu un kvantitatīvu HVC RNS izpēti.

C hepatīta PCR kvalitatīvās analīzes laikā cilvēka organismā ir iespējams konstatēt esošo vīrusu.

Šī diagnostikas procedūra tiek veikta, ja asinīs tiek atklāts anti-HVC.

C hepatīta analīzes atšifrēšana satur informāciju, ka infekcija ir atklāta vai nav atklāta organismā. Parasti asinīs nav patoloģisku vielu.

Ja C hepatīta tests ir pozitīvs, tas nozīmē, ka patogēns nepārtraukti sadala un inficē aknu šūnas.

Šīs analīzes rezultāti var būt neuzticami, tas ir iespējams šādos gadījumos:

• izmantoto piesārņoto biomateriālu;
• heparīna klātbūtnē asinīs;
• ķīmisko vai olbaltumvielu (inhibitoru) klātbūtnē pētītajā biomateriālā, kas ietekmē PCR elementus.

C hepatīta kvantitatīvā analīze sniedz informāciju par vīrusa daudzumu asinīs, tas ir, nosaka vīrusu slodzi. Ar šo jēdzienu saprot HVC RNS daudzumu asinīs (piemēram, 1 ml). C hepatīta kvantitatīvās analīzes interpretācijā šī vērtība tiek izteikta digitālā ekvivalentā, mērot SV / ml.

Pirms terapeitiskiem pasākumiem tiek ņemta asins PCR attiecībā uz C hepatītu. Pēc analīzes veic 1, 4, 12 un 24 nedēļas. Pētījums 12. nedēļā ir indikatīvs un tiek veikts, lai novērtētu terapeitisko procedūru efektivitāti.

Ja C hepatīta tests grūtniecības laikā ir pozitīvs un vīrusa slodzes vērtības ir pārsniegtas, patogēnu pārnešanas risks no slimo mātes uz bērnu palielinās vairākas reizes. Arī ar paaugstinātu vīrusu slodzi ir grūti īstenot terapeitiskos pasākumus.

Saskaņā ar C hepatīta testu aprakstu, ja vīrusa slodzes vērtības pārsniedz 800 000 SV / ml, tad tas ir augsts. Ja skaitļi ir mazāki par 400 000 SV / ml, vīrusu slodzes līmenis tiek uzskatīts par zemu.

C hepatīta analīze ar PCR tiek uzskatīta par visprecīzāko, un tai ir vairākas priekšrocības salīdzinājumā ar citām pētniecības iespējām, proti:

• slimības izraisītāja tieša diagnoze. Veicot tradicionālos pētījumus, nosaka proteīnu marķieru klātbūtne, kas ir patogēnu atkritumi. Tas tikai norāda, ka infekcija ir asinīs. Testējot C hepatītu, izmantojot PCR, ir iespējams noteikt bīstamās patoloģijas patogēna veidu.
• tehnikas specifiku. Šīs procedūras laikā biomateriālā tiek noteikts unikāls DNS reģions, kas atbilst tikai vienam patogēna veidam. Tas samazina viltotu rezultātu iespējamību.
• augsta jutība. Veicot PCR analīzi, varat noteikt minimālo vīrusa daudzumu. Tas ir svarīgi, ja tiek identificētas nosacīti patogēnas vielas, kas rada draudus tikai tad, ja to līmenis palielinās.
• Izmantojot šo metodi vienā biomateriāla paraugā, uzreiz var noteikt vairākus patogēnus.
• var atklāt slēptās infekcijas. Turklāt analīze ļauj diagnosticēt patogēnos mikroorganismus, kas dzīvo šūnu iekšienē un kuriem ir augsts antigēnu mainīgums.

Ja testa rezultāti ir pozitīvi, tad biomateriālā atrodami vīrusa pēdas, tad tīklā ir infekcija organismā.

Negatīva C hepatīta PCR analīze liecina, ka biomateriālā nav infekcijas pēdu.

Imunoloģiskais pētījums

Šī metode ļauj identificēt antivielas pret visiem hepatīta vīrusa veidiem, kā arī antivielas pret Jūsu ķermeņa aknu šūnām, kuru izskats veicina autoimūnu hepatītu.

Pētījuma laikā iegūtie rezultāti ir nozīmīgi 3 mēnešus, pēc tam Jums vajadzētu atkārtoti ziedot C hepatītu.

Ir iespējams veikt arī eksprespētījumu, izmantojot īpašas teststrēmeles. Šī analīze ļauj noteikt antivielas pret C vīrusu asinīs un siekalās, ko var veikt neatkarīgi, mājās.

Aknu biopsija

Lai veiktu šo analīzi, tiek veikts aknu parenhīmas elements un veikta iegūto biomateriālu histoloģiskā pārbaude. Tas ļauj novērtēt ķermeņa stāvokli: identificēt iekaisuma, nekrotiskos fokusus, fibrozes stadiju utt.

Šodien tiek izmantoti testi, kas aizstāj histoloģisko analīzi aknu parenhīmai.

Lai novērtētu aknu bojājumu stadiju un iekaisuma procesa intensitāti, tiek izmantoti specifiski venozās asins biomarkeri. Izmantojot Fibrotest, varat novērtēt šķiedru audu augšanas pakāpi.

Veicot Actitest, jūs varat iegūt informāciju par patoloģisko procesu intensitāti aknu parenhīmā. Steatototesta lietošana var diagnosticēt aknu taukaudus un novērtēt šī procesa apjomu. Fibromax sastāv no visiem iepriekšminētajiem testiem un var ietvert dažus citus pētījumus.

Sagatavošanās pētījumam

Kādi testi tiek veikti attiecībā uz C hepatītu un kā mēs esam noskaidrojuši šo vai šāda veida pētījumus. Tikpat svarīgi ir zināt, kā sagatavoties analīzei.

Lai iegūtu ticamus rezultātus, ieteicams ievērot šādas prasības:

• C hepatīta testi jāveic rīt, tukšā dūšā. Pēdējā laikā pārtika jālieto vismaz 8 stundas pirms pētījuma.
• Biomateriālu var savākt dienas laikā vai vakarā. Šajā gadījumā ir svarīgi, lai starp pēdējo maltīti un analīzi būtu vismaz 5-6 stundas.
• pirms asins nodošanas C hepatītam, tēja, kafija, sula vai citi dzērieni jāiznīcina, atļauts tikai ūdens.
• 48 stundas pirms pētījuma ir jāizslēdz tauku, ceptu pārtikas produktu un alkohola saturošu dzērienu lietošana.
• vismaz stundu pirms analīzes jums ir jāatturas no smēķēšanas.
• analīzi nevajadzētu veikt tūlīt pēc ultraskaņas, instrumentālās, rentgena pārbaudes, masāžas sesijas vai fizioterapijas.
• vienu dienu pirms pētījuma īstenošanas nepieciešams izslēgt narkotiku lietošanu un intensīvu fizisko aktivitāti. Emocionālais stress ir arī kontrindicēts.
• Pirms pētījuma veikšanas mierīgā stāvoklī ieteicams pavadīt 15 minūtes.

Veicot asins savākšanas procedūru

Kur iegūt C hepatīta testu? Biomateriāls tiek ņemts tālākai izmeklēšanai medicīnas iestādes laboratorijā vai pacienta mājās.

Asinis no vēnas tiek ņemtas šādi:

• izmantojot īpašu tūbiņu, kas ietīts ap pacienta apakšdelmu, venozās asins plūsma tiek pārtraukta. Pateicoties šādām manipulācijām, vēnas tiks piepildītas ar asinīm un būs redzamākas, kas ievērojami atvieglos adatas ievietošanu.
• āda, kurā adata tiks ievietota, uzmanīgi apstrādā ar spirtu vai alkoholu saturošu šķidrumu.
• Adatu maigi ievieto vēnā, pēc tam piestiprina mēģeni, kas īpaši paredzēta asins savākšanai.
• Tūlīt pēc tam, kad adata ir ievietota vēnā, saspiešanas siksnas tiek noņemtas no pacienta rokas.
• pēc tam, kad ir savākta analīzei nepieciešamā asins daudzums, adatu viegli noņem no vēnas.
• Injekcijas vietai jānovieto sterils vates tampons vai marle, kas samitrināta ar spirtu.
• Lai izvairītos no hematomas rašanās, tampons ar nelielu piepūli jāpiestiprina pret adatas ievietošanas zonu, saliekt rokas pie elkoņa locītavas un turiet to šādā stāvoklī vairākas minūtes. Šādas darbības palīdzēs arī ātrāk apturēt asinis.

Ja iekšējās lietošanas tehnika ir laba, šī procedūra ir pilnīgi droša un nerada sāpīgas sajūtas.

Retos gadījumos pēc asins savākšanas vēnas var uzbriest. Šo parādību sauc par "flebītu". Kompresija (nav karsta) palīdzēs atrisināt problēmu, tā jālieto uzbriedušām ādas vietām vairākas reizes dienā.

Dažas problēmas var rasties arī tad, ja ir asiņošanas traucējumi. Aspirīna, varfarīna un citu asins šķīdinātāju lietošana var izraisīt asiņošanu. Tāpēc pirms analīzes veikšanas ir jāatsakās veikt jebkādas zāles. Ja ārstēšanu nevar atcelt, par to jāinformē speciālists.

Datumi un cenas

Cik daudz tiek pārbaudīts attiecībā uz C hepatītu? Hepatīta asins analīzes rezultāti var būt gatavi dažu stundu laikā un pēc dažām dienām (parasti ne vairāk kā 8 dienas). Rezultātu sagatavošanas ilgums ir atkarīgs no vīrusa veida un izvēlētās analīzes metodes. Ātrāk ir pētījums ar PCR metodi. Šajā gadījumā rezultāti būs gatavi tikai dažu stundu laikā.

Cik maksā C hepatīta testa izmaksas? Atkarībā no klīnikas un pētījuma sarežģītības, procedūras cena var svārstīties no 400 līdz 11 000 rubļu.

Jums jāapzinās, ka HVC antivielu veidošanos var aizņemt vairākas nedēļas. Tāpēc patoloģijas attīstības sākumposmā pētījuma rezultāts var būt viltus negatīvs.

Turklāt neuzticamu datu iegūšana ir iespējama ar sliktas kvalitātes analīzi un iegūto biomateriālu transportēšanas nosacījumu pārkāpumu (paraugi jāpiegādā laboratorijā ne vairāk kā 2 stundas pēc asins paraugu ņemšanas).

Ja pētījuma rezultāts ir pozitīvs, nekavējoties sazinieties ar infekcijas slimību ārstu. Speciālists veiks papildu pārbaudi un noteiks atbilstošu ārstēšanu.

B hepatīta PCR un tā rezultātu analīzes būtība

Vīrusu hepatīts B tiek veiksmīgi ārstēts, ja to konstatē laikā, un ir pareizi noteikts antivielu un antigēnu skaits pacienta asinīs. Ar hepatīta enzīma imūnanalīzes palīdzību ir iespējams noteikt vīrusu marķieru klātbūtni, bet tie nevar noteikt precīzu procesa stadiju.

Kvantitatīvai novērtēšanai izmantoja PCR diagnostiku. Izmantojot testu, ir iespējams skaitīt marķieru skaitu, prognozēt slimības gaitu un izārstēšanas iespējamību, izmantojot pretvīrusu zāles.

Pētījuma galvenā priekšrocība ir spēja noteikt pat minimālas vīrusa koncentrācijas, identificēt patogēnu sugas posmā.

B hepatīta diagnostika

B hepatīta vīruss ir ļoti lipīgs un izturīgs pret ārējām ietekmēm. Tā paliek aktīva pacienta asinīs vairākas nedēļas. Tādēļ katram cilvēkam ir inficēšanās risks, pat ja tiek novērota profilakse.

Lai diagnosticētu slimību, norādiet šādus pētījumus:

PCR metodes būtība

Amerikāņu ķīmiķis K.Mullis saņēma Nobela prēmiju, un joprojām tiek izmantota viņa diagnostikas metode.

PCR metodes (polimerāzes ķēdes reakcija) senči tiek uzskatīti par zinātnieku no Norvēģijas H. Kleppe. Viņš vispirms sāka veikt DNS amplifikāciju, izmantojot īsu DNS ķēdi, proti, sintētisku primer (veida kopiju).

Tomēr zinātnieks nespēja realizēt savu ideju. Līdzīgus pētījumus veica amerikāņu ķīmiķis K.Mullis, kurš 1993. gadā saņēma Nobela prēmiju par savu izgudrojumu. Kopš tā laika PCR tika izmantots paternitātes noteikšanai, ģenētisko slimību diagnosticēšanai un vīrusu atklāšanai.

Šīs reakcijas būtība ir tāda, ka ar fermentu palīdzību tiek kopēta noteikta DNS daļa. Jūs varat kopēt tikai apgabalu, kas atbilst norādītajiem parametriem, un, ja tas ir iesniegtajā paraugā. Lai sāktu reakciju, tiek izmantotas šādas sastāvdaļas:

1. Matricas DNS ar kopējamo vietu.
2. Gruntējumi, kas līdzīgi struktūrai ar DNS.
3. Polimerāze, tas ir, enzīms, kas izraisa reakciju. Tam jābūt termostabilam, tas ir, lai izturētu galējības temperatūras.
4. Risinājums ar noteiktiem parametriem, nodrošinot reakcijas gaitu.

Reakcija tiek veikta vairākos posmos:

B hepatīta noteikšanai tiek izmantoti divu veidu reakcijas: kvantitatīvs un kvalitatīvs.

Kvantitatīvais PCR

Kvantitatīvā metode nosaka HBV genoma daudzumu

Kvantitatīvais PCR ietver DNS fragmentu kopiju vienlaicīgu izveidi un molekulu skaita noteikšanu. Mērījumi tiek veikti pēc katra posma, tas ir, reālā laikā. Tas tiek panākts, izmantojot fluorescējošus zondes, kas ir iekļautas molekulu ķēdē un spīd konkrētā pētījuma laikā.

Šo metodi izmanto, lai noteiktu DNS fragmentus, kas ir hepatīta vīrusa marķieri. Izmantojot kvantitatīvo metodi, ir iespējams precīzi izolēt vīrusa genotipu. Citiem vārdiem sakot, tiek aprēķināts HBV genoma kopiju skaits uz pacienta šūnu skaitu.

Kvantitatīvā analīze sniedz atbildes uz šādiem jautājumiem:

1. Ar kādu intensitāti slimība progresē.
2. Cik efektīva ir ārstēšana.
3. Vai ir attīstījusies zāļu rezistence?

Arī kvantitatīvais mērījums ir nepieciešams hroniskas infekcijas stadijas diagnostikai. Ja DNS līmenis ir zemāks par 100 gab / ml normālā transamināžu līmenī, tad persona ir vīrusa nesējs.

Akūtajā fāzē antivielu daudzums ir daudz lielāks, pretvīrusu terapijā antivielu skaita pieaugums norāda uz zāļu rezistences attīstību, tas ir signāls, lai pielāgotu ārstēšanu.

Augstas kvalitātes PCR

Augstas kvalitātes PCR sniedz mazāk informācijas, bet var novērst infekciju.

Augstas kvalitātes PCR var noteikt tikai patogēna klātbūtni asinīs. Ja tie nav, pacients nav inficēts, ja patogēns nonāk asinīs, rezultāts būs pozitīvs.

Tomēr ar kvalitatīvas reakcijas palīdzību nav iespējams noskaidrot vīrusa genomu, slimības stadiju. Tāpēc HBV diagnosticēšanai veica gan kvantitatīvu, gan kvalitatīvu mērījumu.

Sagatavošanās aptaujai

PCR analīzei ir nepieciešamas vēnas asinis. Tas jādara no rīta tukšā dūšā.

Pacientam vajadzētu pienācīgi sagatavoties pētījumam:

1. 10 stundas, lai atteiktos no pārtikas, varat dzert tikai tīru ūdeni.
2. Pirms pārtraukt alkohola lietošanu, 4 stundas nav smēķēt.
3. Pirms pārbaudes jāizvairās no fiziska un emocionāla stresa.
4. Pārtrauciet medikamentu lietošanu 2 dienas, ja tas nav iespējams, ir jābrīdina laboratorijas palīgs. Dažas zāles ietekmē gala rezultātu.

Datu interpretācija

Kvantitatīvā reakcijā iegūtie rādītāji tiek vērtēti atkarībā no DNS kopiju skaita.

Kvalitātes mērījumu datus ir viegli interpretēt. Viņš sniedz vai nu pozitīvu, vai negatīvu atbildi.

Kvantitatīvā reakcijā ir iespējams novērtēt iegūtos rādītājus atkarībā no DNS kopiju skaita. Mērvienība ir kopijas / ml.

Dati tiek dekodēti šādi:

1. Ja HBV DNS daudzums ir mazāks par 90, tad infekcija nav sastopama. Pacientam izveidojās imunitāte pēc vakcinācijas vai tika izārstēta slimība.
2. Kad kopiju skaits 2x100 runā par vīrusa nesēju.
3. Numurs 2x106 norāda uz hronisku slimības stadiju.
4. Ja DNS ir vairāk nekā 2x109, pacientam ir akūta hepatīta stadija.

Kļūdaini rezultāti

Diagnostikas metodes priekšrocības, izmantojot polimerāzes reakcijas, ir šādas:

1. Tieša patogēnu noteikšana. Turpretī ELISA sniedz informāciju par vīrusa antivielu klātbūtni.
2. Specifiskums. Tas ir, tas ir DNS reģions, kas ir kopēts biomateriāla paraugā.
3. Paaugstināta jutība. Metode var pat atklāt atsevišķu šūnu fragmentus.
4. Slimību diagnostika akūtos un latentos posmos. Tas ir, ir iespējams diagnosticēt slimību pirmsklīnisko izpausmju stadijā.

Metodē ir trūkumi, kas rada nepatiesus rezultātus. Būtiskākais trūkums ir materiāla piesārņojuma varbūtība. Galvenais piesārņojuma avots ir slikti apstrādātas caurules, laboratorijas rokas, reaģenti.

Daļa no iepriekšējās reakcijas DNS var iekļūt asinīs. Tāpēc laboratorijām tiek izvirzītas paaugstinātas sanitārās prasības: atsevišķas telpas, plastmasas caurules, laboratoriju ultravioletā apstrāde utt.

Viltus negatīvus rezultātus var izraisīt reakcijas mazāka jutība. Tas notiek šādās situācijās:

• pacients lieto zāles, piemēram, antikoagulantus;
• pirms analīzes persona cieta fizisku stresu (spēlējot sportu, smagu darbu);
• infekcija nesen.

Ja pacientam ir liela infekcijas varbūtība, un pētījuma rezultāts ir negatīvs, viņš ir jāpārskata.

Skatiet arī:

Secinājums

Polimerāzes ķēdes reakcijas metode ir galvenais un informatīvākais HBV diagnostikai. Tas ļauj ne tikai noteikt infekcijas pārvadātāja statusu, bet arī izskaidrot slimības stadiju, lai novērtētu ārstēšanas rezultātus.

Precīzākai diagnozei tiek izmantots kvalitatīvs un kvantitatīvs mērījums. Metodes trūkumi ietver piesārņojuma varbūtību, samazinātu jutību un samērā augstu cenu.

Lai rezultāti būtu visticamākie, vajadzētu pienācīgi sagatavoties pētījumam un veikt to klīnikā ar atbilstošu licenci un labu reputāciju.

PCR analīzes veikšana attiecībā uz C hepatītu un rezultātu dekodēšana

C hepatīta PCR analīze ir pētījums, kura galvenais mērķis ir identificēt izraisītāja ģenētisko materiālu. Analīze atklāj slimības izraisītāju, izmantojot polimerāzes ķēdes reakciju. Šai diagnozei ir augsta precizitātes pakāpe, specifiskums, lai noteiktu vīrusu infekcijas neesamību vai klātbūtni.

Diagnozes būtība

Lai veiktu PCR analīzi C hepatīta vīrusa noteikšanai no pacienta, tiek ņemta vēnu asinis, kas potenciāli satur vēlamā vīrusa HCV (ribonukleīnskābi).

C hepatīta PCR tests ietver procedūru pacienta asins daļiņu pievienošanai:

• gruntis (īstermiņa mākslīgi sintezēti nepieciešamā gēna reģioni);
• īpašs enzīms (RNS polimerāze).

Pēc paraugu ņemšanas bioloģiskais materiāls tiek nosūtīts pētniecībai laboratorijā. Vienai daļai asiņu ir nepieciešama tiešai PCR analīzei, otru nosūta testēšanai ar ELISA. Enzīms īsā laikā spēj palielināt patogēna vīrusa ģenētiskā materiāla skaitu. Īpašā aparātā tiek veikti vairāki siltuma un dzesēšanas procesu cikli. Noslēguma posmā iegūtais materiāls tiek salīdzināts ar vīrusa gēniem un izdarīts secinājums par patoloģijas esamību vai neesamību pacienta organismā.

PCR analīzes būtība un vadība laboratorijā. Filmēts Sibīrijas medicīniskajā laboratorijā.

Pētījumu veidi

Ir 3 diagnostikas veidi, kas ļauj noteikt C hepatīta vīrusa klātbūtni cilvēka organismā:

• genotipizēšana;
• kvalitāte;
• kvantitatīva.

Kvalitatīvā metode

C hepatīta diagnosticēšana ar kvalitatīvu metodi ir piemērojama pacientiem, kuriem asins analīzē konstatētas antivielas pret vīrusu. HCV RNS akūtās fāzes klātbūtnē šādi diagnostikas pasākumi var noteikt slimības klātbūtni 1-2 nedēļu laikā pēc inficēšanās. Šajā laikā antivielas pret C hepatītu vēl nav iespējams attīstīt.

Kvantitatīvā metode

Lai noteiktu vīrusa koncentrāciju asins paraugos, tiek izmantota kvantitatīva diagnostikas metode. Šāds virēmijas tests (koncentrācijas pakāpe) ļauj precīzi noteikt vīrusu RNS vienību skaitu. Galarezultāts ir izteikts atbilstošajā apjomā. Ja runājam par kvantitatīvu analīzi, tad rādītājus mēra 1 ml (1 kubs Cm).

Vīrusu slodzes parametrs ir slimības infekciozitātes līmenis, tas ir, tas atspoguļo pacienta "infekcijas" pakāpi. Praksē tas nozīmē, ka jo lielāks ir vīrusa koncentrācijas līmenis asinīs, jo lielākas iespējas pacientam inficēt citus ar C hepatītu. Kvantitatīvā pētījuma metode arī ļauj noteikt ārstēšanas kvalitāti un efektivitāti.

Genotipēšana

Genotipēšana atklāj slimības izraisītāja mutācijas. Pirms ārstēšanas plāna izrakstīšanas nosaka vīrusa genotipu: no tā atkarīga ārstēšanas kvalitāte un ilgums. Piemēram, I tipa slimības ārstēšanā efektivitāte ir 60%, II gadījumā - III tipa - apmēram 80%.

Hepatīta PCR analīzes priekšrocības

Viena no galvenajām procedūras priekšrocībām ir:

1. Iespēja agrīnai diagnostikai. PCR analīze spēj noteikt vīrusa klātbūtni infekcijas agrīnā stadijā.
2. Zems kļūdu rezultāts. Pētītais bioloģiskais resurss ļauj diagnosticēt ģenētiskā materiāla daļu, kas raksturīga tikai vienam vīrusu infekcijas veidam. Šis apstāklis ​​ļauj novērst viltus diagnostikas rezultātus.
3. Augsta jutīguma pakāpe. PCR analīze spēj noteikt vīrusa RNS nelielos daudzumos, kas arī ļauj izsekot latentās infekcijas laikā.

Norādes

Nepieciešams veikt C hepatīta PCR testēšanu, ja tas ir pieejams:

• saskarē ar slimiem cilvēkiem, kas var izraisīt infekciju;
• aknu cirozes simptomi (liesas palielināšanās, neraksturīgas izmaiņas aknu lielumā, vēnas plexus atklāšana uz vēdera zem ādas);
• pozitīvi ELISA rezultāti;
• paaugstināta AST un ALT aktivitāte (izpaužas asins bioķīmiskajā analīzē);
• nepieciešamību kontrolēt pretvīrusu terapijas veikšanu;
• ārstēšanas sākumposms, lai noteiktu vīrusu slodzi;
• veikt galīgo terapijas posmu, lai izslēgtu iespējamās atkārtošanās;
• pacientam ir B hepatīts, lai izslēgtu jauktu aknu bojājumu attīstību.

Kā sagatavoties asins ziedošanai PCR pētījumiem

Sagatavošanās PCR analīzei ietver šādus ieteikumus:

• asinis tiek ņemtas no rīta;
• analīze tiek veikta tukšā dūšā, tāpēc ir ieteicams pārtraukt starp pēdējo pārtikas devu 8-10 stundām;
• dažas dienas pirms diagnozes izslēdziet taukainus, pikantus un ceptus ēdienus, alkoholiskos dzērienus un smēķēšanu;
• vienu dienu pirms analīzes vajadzētu atturēties no smagas fiziskas slodzes, izslēgt nodarbības sporta zālē vai peldbaseinā.

Analīzes rezultāti: normas un novirzes

Analīze pati par sevi nav ilgtermiņa, un augsti kvalificēts speciālists hepatologs vai infekcijas slimību speciālists atšifrē C hepatīta PCR rezultātus. Pamatojoties uz analīzes rezultātiem, tiek diagnosticēts pacients.

Lai pareizi izskaidrotu aptaujas rezultātus, tās ņem vērā rādītājus:

• asins bioķīmiskā analīze;
• ultraskaņas dati;
• biopsijas rezultāti.

Kvantitatīvās analīzes interpretācija

Iegūstot PCR kvantitatīvās analīzes rezultātus, ņem vērā šādus rādītājus:

C hepatīta PCR diagnostika

C hepatīts ir aknu šūnu iekaisums, kas rodas, inficējoties ar HCV vīrusu (C hepatīts), saskaroties ar inficētās personas asinīm. Flavivīrusa HCV ģenētisko kodu vada RNS (ribonuclenic acid) molekula, kas atrodas vīrusa struktūrā. Šī dzīvībai bīstamā parādība atšķiras ar noslēpumu patoloģijas sākumposmā. Laika intervāls starp infekciju un simptomu rašanos (imūnsistēmas reakcija) var būt no viena mēneša līdz sešiem mēnešiem. Parasti slimība ir hroniska un to ir grūti izārstēt.

Mūsdienu medicīna ļauj diagnosticēt patoloģiju ar nelieliem aknu bojājumiem. Visizplatītākās un efektīvākās diagnostikas metodes ietver PCR analīzi. Šajā rakstā apsveriet, kas tas ir un kādi ir tā veidi.

Kas ir pētījums

C hepatīta PCR analīze ir laboratoriska izmeklēšana, kas atklāj ribaviru, kas ir ribonuklēnskābes (RNS) ģenētiskais materiāls. Tas nosaka RNS molekulu skaitu asinīs, bioloģiskā materiāla kvalitāti, HCV vīrusa ģenētisko tipu.

C hepatīta PCR metode ļauj konstatēt minimālo flavīrusa daudzumu pirms antivielu veidošanās, parasti pēc inficēšanās.

Pētījumu bieži dēvē par RNS analīzi, jo tā atklāj flavavīrusa ribonukleīnskābes daļiņas ar izmēru 30-60 nm.

Pētījums tiek veikts šādi: tukšā dūšā pacients dod asinis no vēnas, ko pēc tam pārbauda ar dažādām metodēm:

• Reālā laika PCR tiek veikts slēgtā automatizētā veidā un tam ir zemāks RNS vīrusa noteikšanas limits, kas vienāds ar 15 SV / ml;
• COBAS AMPLICOR ar jutību 50-100 SV / ml.

Jo augstāks ir diagnostikas metodes jutīguma slieksnis, jo lielākas ir iespējas atrast zemāko vīrusa saturu pētāmajā bioloģiskajā materiālā.

Kāda veida analīzes izmanto

Analīzi, kas veiksmīgi izmantota jau vairākus gadu desmitus, sauc par PCR hepatītu, un to var viegli un ātri noteikt. Medicīnā ir divas reakcijas metodes, kas būtiski atšķiras viena no otras:

• kvalitatīvā metode atklāj konkrēta vīrusa ģenētiskā avota klātbūtni bioloģiskajā materiālā;
• kvantitatīvā analīze nosaka ģenētiskā materiāla skaitu, kas ļauj noteikt patoloģijas stadiju vai novērtēt terapeitiskā kursa efektivitāti;
• genotipa noteikšana nosaka organisma klātbūtnes veidu.

Kopumā asins analīzes palīdz noteikt virēmijas raksturu un patogēna ģenētisko tipu. Parasti pētījumi tiek veikti 1 reizi atkarībā no diagnostikas sistēmas jutības pakāpes. Ja nepieciešams, atkārtotu pārbaudi veic, izmantojot ultrasensīvu reaģentu.

Augstas kvalitātes PCR

Kas ir augstas kvalitātes PCR RNS C hepatītam? Reakcijas būtība ir hepatīta RNS sekvences klātbūtnē, un reakcija ir iespējama tikai ar līdzīgu etimoloģiju saturošu vīrusu proteīnu klātbūtnē ELISA. Salīdzināšanas procesā tiek konstatēta slodze un iespējamais aknu zonas bojājums.

Šīs metodes īpatnība ir spēja noteikt pat atsevišķa gēna klātbūtni.

Jāatzīmē, ka pēc PCR un ELISA testu rezultātu saņemšanas pacientam ir nepieciešama atbilstoša ārstēšana neatkarīgi no tā, kāds bija galīgais imunoloģiskās analīzes rezultāts. Pozitīvs norāda uz infekciju, un PCR negatīvs norāda uz samazinātu vīrusu daļiņu skaitu attiecībā pret jutības līmeni.

Ir vairāki apstākļi, kas ietekmē negatīva PCR un ELISA ražošanu:

• piemērotu materiālu savākšanas apstākļu trūkums;
• iegūtā analīze satur piesārņojumu;
• ja pacientam tiek veikta agrīna heparīna injicēšana.

Pacientam nav jāievēro daži noteikumi par asins paraugu ņemšanu PCR analīzei, šajā gadījumā šīs analīzes kvalitāte ir atkarīga no medicīnas speciālista, kas veic procedūru. Spēja noteikt slimības klātbūtni (īpaši akūtā formā) parādās dažu nedēļu laikā pēc infekcijas.

Kvantitatīvā analīze

Vīrusu slodzes noteikšanai tieši pirms turpmākās terapijas veidošanās un ķermeņa reakcijas ieteicams veikt kvantitatīvu testu. Asins paraugu ņemšanas process tiek veikts līdzīgi kā ar augstas kvalitātes PCR un ELISA, vienīgais nosacījums ir pacienta smēķēšanas trūkums pirms procedūras.

Attiecībā uz datiem, kas iegūti, pētot datus, palielināto slodzi raksturo rādītāji no 800000 SV / ml, zems - 400000 SV / ml. Vīrusa klātbūtne pacienta organismā ir norādīta ar PCR hepatīta gadījumā nav negatīvs kvalitatīvs tests.

Šāda veida pētījumi ļauj noteikt, cik bīstams pacients ir ap viņu apkārtējiem cilvēkiem. Piemēram, augsta līmeņa noteikšana norāda uz paaugstinātu pacienta inficētspēju. Turklāt analīzes rezultāti palīdz formulēt turpmāko visefektīvāko ārstēšanu un noteikt, cik liela ir esošā terapija.

Ātrā negatīvā reakcija uz testiem liecina par izvēlētās tehnikas panākumiem, un lēni norāda uz nepieciešamību veikt pielāgojumus un izmantot daudzpusīgu apstrādi.

Analīzes procedūras veikšanas process ir atkarīgs no konkrētās slimības norises dienas. Pirmā noteikšana tiek veikta pirmajā dienā pēc pacienta uzņemšanas slimnīcā, tad procedūra tiek atkārtota 4, 12 un 24 nedēļās pēc zāļu lietošanas.

Tādējādi kvantitatīvā analīze parāda, kura ārstēšana ir visefektīvākā, pieejamā terapijas ilgums un pacienta briesmas attiecībā pret citiem cilvēkiem.

Genotipēšana

Materiālu analīzes pētījumā ir svarīgi noteikt vīrusa genotipa precizitāti, kas notiek. Pašlaik ir 11 C hepatīta vīrusa šķirnes, kas savukārt ietver noteiktas pasugas.

Visas šīs sugas atšķirīgi reaģē uz dažādām ārstēšanas metodēm, un atsevišķas šķirnes ir absolūti izturīgas pret daudzām zālēm.

Genotips ļauj noteikt un parādīt aknu stāvokli. Nav nekas neparasts, ka rezultāti ir „nav tipizēti”, kas nozīmē, ka ar šo testu sistēmu vīruss pacienta asinīs netiek konstatēts. To var noteikt, ja konkrētais genotips neatbilst šai zonai. Šādā situācijā analīze tiek veikta atkārtoti, un materiāla izpētei tiek izmantota jutīgāka sistēma.

Ļoti jutīga metode

Ultrasensitīvā metode ir nepieciešama dažos gadījumos, kad hepatīta diagnozi nevar veikt ar citām metodēm, tajā pašā laikā, kad analīzi izdara ārstējošais ārsts:

• ja Jums ir aizdomas par C hepatīta vīrusa klātbūtni pacientiem, kuriem ir slēpta slimības klase;
• antivielu pret C hepatīta vīrusu klātbūtne, kas nav apstiprināta ar PCR diagnostiku;
• lai noteiktu izvēlētās ārstēšanas metodes efektivitātes kvalitāti un apstiprinātu slimības likvidēšanu.

Šīs metodes jutīgums ir daudz augstāks nekā parasti izmantotais, tomēr šī metode neizslēdz viltus rezultātu iegūšanu, gan pozitīvus, gan negatīvus. Šādā situācijā ir svarīgi kontrolēt procedūras kvalitāti un paša materiāla inficēšanās iespēju.

PCR analīzes skaidrojums

Analīzes dekodēšana tiek veikta, pamatojoties uz iesniegtajiem materiāliem, bet laboratorijas pētījumu rezultāti ietver dažus iepriekš aprakstītos datus.

Transkripts var ietvert pozitīvu PCR polimerāzes ķēdes reakciju un negatīvu ELISA testu, kas nozīmē, ka pacientam asinīs nav C hepatīta pazīmju, bet agrāk viņš ir pārnesis slimības akūtu formu. Parasti, diagnosticējot, speciālisti izmanto PCR testu indikatorus.

Apkopojot visu iepriekš minēto, var secināt, ka analīzes laikā ir svarīgi ievērot visus noteikumus un ieteikumus, lai iegūtie rezultāti būtu pēc iespējas precīzāki, un, pamatojoties uz iegūtajiem datiem, ir iespējams noteikt izmantotās terapijas efektivitāti un turpmākās atgūšanas iespējas.

C hepatīta PCR analīze

Lai diagnosticētu "hronisku C hepatītu (CVHS)", nepieciešama visaptveroša personas pārbaude, kas ietver klīniskos, laboratorijas un instrumentālos pētījumus. No diagnozes viedokļa svarīga ir pareiza diagnoze ir PCR metode - polimerāzes ķēdes reakcija.

Ko parāda šī analīze un kāpēc tas ir nepieciešams?

Šī laboratorijas metode nosaka C hepatīta vīrusa RNS cilvēka asinīs. Kopā ar imūnsistēmu, kas saistīta ar fermentu, ELISA, lai noteiktu vīrusa antivielas, PCR izmanto, lai diagnosticētu CVHC un tā patogēnu genotipu. Šis pētījums ir viena no jaunākajām laboratorijas diagnostikas metodēm. Tās uzticamība CVHS pārsniedz 97%, kas tiek uzskatīts par ļoti labu pētījumu rādītāju.

CVHS ir trīs PCR asins analīzes: kvalitatīva, kvantitatīva un vīrusa genotipēšana. Pirmais vīrusa pētījums (kvalitatīvā analīze) to atklāj asinīs, tāpēc to izmanto tikai diagnosticēšanai.

Otrais (kvantitatīvais) pētījums nosaka vīrusa slodzes pakāpi organismā, tāpēc to izmanto, lai uzraudzītu terapijas efektivitāti.

Trešais PCR (genotipa noteikšana) precizē diagnozi, nosakot vīrusa genotipu, kas ir ļoti svarīgs pareizas pretvīrusu ārstēšanas iecelšanai.

Polimerāzes ķēdes reakcijas metodes būtība ir tādu fermentu izmantošana, kas vairo patogēna ģenētisko materiālu biomateriālā. Šādas replikācijas procesā cauruli ar asinīm vairākas reizes karsē un atdzesē līdz temperatūrai, kas nepieciešama, lai paātrinātu enzīmu reakciju. Šo manipulāciju rezultātā vīrusa genoma daudzums palielinās daudzas reizes, ļaujot to konstatēt pat ar minimālu daudzumu.

PCR diagnostikai ir daudz priekšrocību salīdzinājumā ar citiem laboratorijas testiem:

• augsta jutība - 97-98%;
• garantēta analītiskā specifika (atklāj tieši to patogēnu, kuru vēlaties atrast, nevis tā saistīto celmu);
• veikšanas ātrums (secinājumu iegūšanai nepieciešams ne vairāk kā 2 dienas).

Triju veidu PCR testi

Visiem pacientiem, kuriem ELISA analīze atklāja HVGS vīrusa antivielas, tiek piešķirta augstas kvalitātes PCR analīze. Pēc augstas kvalitātes PCR veikšanas var iegūt divas atbildes iespējas: "tiek konstatēta" RNS "vai" RNS nav konstatēta. " Lai noteiktu minimālo vīrusa daudzumu asinīs, ir vajadzīgas testēšanas sistēmas, kuru jutība ir vismaz 50 SV / ml. Ja vīrusa koncentrācija pacienta asinīs ir mazāka nekā diagnosticum var noteikt, pētījuma rezultāts var būt kļūdains. Lai izvairītos no šādas diagnostikas kļūdas, laboratorijām, kas veic PCR diagnostiku, jānodrošina ļoti jutīgas testēšanas sistēmas. Laboratorijā "Invitro", piemēram, tiek izmantoti testi, kuru jutība ir 15 SV / ml. Laboratorijas darbiniekiem ir pienākums sniegt informāciju par testu jutīgumu pacientiem un ārstiem pēc pirmā pieprasījuma.

PCR kvantitatīvā analīze nosaka virēmijas pakāpi, ti, patogēna koncentrāciju asinīs, vīrusu slodzi. Šī pētījuma rezultāts, atšķirībā no augstas kvalitātes PCR, ir izteikts skaitļos, piemēram, 2 × 10 * 6 SV / ml, kas nozīmē 2 miljonus starptautisko vienību 1 ml asinīs. Dažas laboratorijas izmanto citu rādītāju - kopiju skaitu / ml. Šie divi rādītāji ir viegli konvertējami: 1 starptautiska vienība ir 4 RNS kopijas. Tādējādi 2 × 10 * 6 SV / ml nozīmē, ka 8 × 10 * 6 vīrusu RNS kopijas 1 ml, t.i. 8 miljoni kopiju 1 ml asins.

Genotipēšana ir viena no sešiem vīrusa genotipiem. Klīniskais attēls, aknu komplikāciju attīstības ātrums un prognoze pacienta turpmākajai dzīvei ir atkarīga no ierosinātāja genotipa. Vīrusa genotips ir ļoti svarīgs jau diagnozes stadijā, jo zāļu kombinācija un pacientam piešķiramā terapeitiskā kursa ilgums ir atkarīgs no tā pareizas noteikšanas.

Tomēr pat šim šķietami „ideālajam” laboratorijas pētījumam ir savi trūkumi:

• pētījums atkārto visu patogēnu, pat nedzīvo, ģenētisko materiālu, kas var izkropļot rezultātu. Tādēļ, lai uzraudzītu efektivitāti ar PCR palīdzību, atkārtota analīze tiek veikta ne agrāk kā 2 mēnešus pēc iepriekšējās analīzes, lai mirušie vīrusi varētu atstāt pacienta organismu;
• daļa no vīrusa genoma, ko nosaka, izmantojot testēšanas sistēmas, teorētiski var būt citos vīrusos vai mikroorganismos, tāpēc pastāv viltus pozitīva reakcija;
• vīrusi ātri mainās. Dažreiz vīrusa mutācijas ātrums un apjoms ir tik liels, ka testa sistēma pārtrauc savu genoma nozveju. Tā rezultātā ir iespējams kļūdains negatīvs rezultāts.

Lai novērstu šos trūkumus, laboratorijas testēšanas sistēmu ražotāji PCR diagnostikai pastāvīgi veic testus, tostarp savstarpējas reakcijas un jutīgumu pret konkrētu vīrusa genotipu.

Kā lietot C hepatīta PCR testu?

Lai PCR pārbaudes noslēgšana būtu ticama, ir stingri jāievēro noteikumi, lai sagatavotos tam:

• pētījums tiek veikts tukšā dūšā (glikoze, tauki, minerāli, kas nokļūst asinīs no pārtikas, var ietekmēt fermenta reakcijas ātrumu un kvalitāti);
• starpība starp pēdējo ēdienu un asins paraugu ņemšanu analīzei ir jābūt vismaz 8 stundām;
• pētījuma priekšvakarā ir aizliegts lietot alkoholu un patērēt taukainus pārtikas produktus, kuru likvidēšanas periods ir ilgstošs;
• dienā pirms došanās uz laboratoriju jāizvairās no spēcīga fiziska un emocionāla stresa;
• līdz asins paraugu ņemšanas laikam nav ieteicams smēķēt.

Lai izvairītos no nepareizu secinājumu parādīšanās, apgalvotajam pacientam laboratorijā ir jādodas nedaudz agrāk, nekā tiks ņemts asinis. Tas aizņem 15-20 minūtes, lai cilvēks noķertu elpu, nomierinātu. Adrenalīns, kas asinīs atrodas pēc ātras pastaigas, var ietekmēt izmeklēšanas rezultātu.

Ja pacientam, kuram tiek veikta analīze, jāveic jebkādas zāles, par to viņam jāinformē ārsts. Iespējams, ka daži no tiem kādu laiku būs jāatsaka (ja iespējams).

C hepatīta PCR analīzes rezultāts

Analīzes veikušās laboratorijas laboratorijas ārsta dekodēšana. Dekodēšana ir no normas iegūto rezultātu novirzes noteikšana. Rādītāju rādītāju nosaka tieši testēšanas sistēmas ražotājs, ko laboratorija izmanto diagnostikai. Tādēļ nav pārsteidzoši, ka dažās laboratorijās vīrusa slodzi nosaka SV / ml, bet citās - kopijās / ml.

Pēc secinājuma saņemšanas ir nepieciešams, lai to varētu pareizi interpretēt. Pētījuma rezultātu apstrādi veic ārstējošais ārsts no C hepatīta. Tikai pēc objektīvas, instrumentālas un laboratoriskas pacienta pārbaudes, ārsts var iegūt pietiekamu datu daudzumu, lai pareizi interpretētu iegūtos PCR rezultātus.

Kvalitatīvās analīzes novērtēšana parasti nerada grūtības pat pacientiem. Rezultāts var būt tikai viens: "atklāts" vai "nav atklāts". Šajā gadījumā otrā no tām ir norma.

Kvantitatīvās analīzes rādītājus ir grūtāk interpretēt. Tas parāda pacienta vīrusu slodzes pakāpi. Pat hepatologu vidū nav vienprātības par to, kā ārstēt atklāto virēmiju. Lielākā daļa ārstu sliecas uzskatīt, ka jāapsver liela slodze, kas pārsniedz 8 × 10 * 5 SV / ml. Slodzi, kas lielāka par 1 × 10 * 7 SV / ml, uzskata par ļoti augstu, bet neliela slodze ir mazāka par 4 × 10 * 5 SV / ml.

Vīrusu slodzes pakāpe norāda uz vīrusa virulenci (agresivitāti): jo lielāks ir tā daudzums asinīs, jo ātrāk var attīstīties aknu komplikācijas. Augsta vīrusa koncentrācija grūtnieces asinīs palielina varbūtību, ka tā iekļūst caur augļa placentāro barjeru auglim. Virēmija ietekmē arī ārstēšanas efektivitāti: ar mazu skaitu terapijas efektivitāte ir augstāka nekā augsta.

Lai pārliecinātos par C hepatīta PCR analīzes precizitāti, ir jādod priekšroka tikai tām laboratorijām, kas ir labi pierādītas. Cenu politika šajā gadījumā nedrīkst būt galvenā loma.